什么是PCR?主要的技术步骤是什么?_备孕

PCR即聚合酶链式反应（Polymerase chain reaction）的缩写，它是体外酶促合成特异DNA片段的方法。这一方法的要点是合成两个分别互补于待扩增DNA片段两端的小片段引物，在含有引物、待扩增DNA模板核苷酸底物和DNA多聚酶的反应体系中DNA复制反复进行，在短时间内可以取得大量扩增产物。其原理是寡聚核苷酸链引物在DNA聚合酶的作用下沿模板延伸，合成两个与靶DNA两侧序列互补的引物，在体外进行靶DNA的重复合成。主要的技术步骤是：（1）DNA变性加热使靶DNA序列双链解离成单链DNA。（2）引物与靶DNA退火适当降低温度，使两个引物分别结合成靶DNA两条的3′末端向5′末端延伸。（3）引物延伸在DNA聚合酶的催化下，引物沿着靶DNA3′末端向5′末端延伸。新合成的DNA链在变性解离后，又可作为模板与引物杂交，并且在DNA聚合酶的催化下，引导合成新的靶DNA链。如此反复进行以上3个步骤，即可使靶DNA片段指数性扩增。

1、PCR是聚合酶链式（PolymeraseChainReaction）反应的简称，是一种将几个或几十个拷贝数DNA片段扩增至上百万份拷贝的方法，这是迄今为止最为重要的技术之一。PCR技术的影响不仅仅局限于生物科学领域，几乎人人都可以感受到PCR所带来的改变，在亲子鉴定以及犯罪调查中PCR技术便有广泛应用。 2、PCR可以被认为是与发生在细胞内的DNA复制过程相似的技术，其结果都是以原来的DNA为模板产生新的互补DNA片段。细胞中DNA的复制是一个非常复杂的过程。参与复制的有多种因素。PCR是在试管中进行的DNA复制反应，基本原理与细胞内DNA复制相似，但反应体系相对较简单。

检验核酸病毒有PCR和快检两种方式，一般常规PCR检测是在样品采集之后，要对样品进行核酸纯化，再进行后续的PCR反应，在这个过程中大约需要30~60分钟。在进行PCR检测的过程中，可以进行多个样本的检测，PCR反应的时间大约在两个小时左右。不同医院的仪器设备不同，仪器的好坏能够影响检测样本的多少，通常一个反应板可以同时检测96个样品。

核酸病毒快检主要是将采集的样本直接放入裂解液中，一般并不需要对核酸进行纯化，可以直接进行PCR反应。使用专门的快检仪器，核酸检测的时间要快很多，一般检验的样本在0.5~1.5小时之间出结果。对于一般医院核酸检测来说，使用的是PCR这种检测方式。因为一个批次可以同时进行多个样本的检测，可以更好的减少医院资源的浪费，减少医院的工作量。

核酸快速检测主要适用于特殊情况，一般医院都会特事特办。使用快检可以快速得到核酸报告，比如待检人数比较少，而且还受到医院的仪器设备限制。快速检测虽然能够让人们快速拿到检测报告，但是对于大量的人群筛查是没有优势的。核酸检测主要是利用PCR技术来检测生物体中核酸的过程，在人们的配合下，医护人员一般采用的是采集咽拭子的方式。

医护人员采集人们的少量咽拭子，根据其中病毒的浓度来确定是否是阳性，还是阴性。新冠肺炎病毒的核酸物质主要是RNA，在检验过程中通过技术可以将RNA进行逆转录，转化为DNA。 PCR技术可以通过特殊的酶在生物体外，对转录的DNA片段进行复制，再将DNA片段扩大，从而达到检测的目的。选择核酸检测的方式主要根据自己情况而定，主要依靠医生的判断。

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