设计引物是第一关键，引物有其他位置的错配，可能就会有非特异序列。但是有些体系因素也会影响结果。比如引物浓度不宜太高，mg2+浓度同样不宜太高。虽然这两者可以让产物量更多，但是却增加了非特异出现的几率。另外退火温度的选择也非常重要。一般把退火

可以这么理解：限制性核酸内切酶都识别特定的序列，那么这个序列就成为限制性核酸内切酶识别的对象，也就是把限制性核酸内切酶比作枪，而这个序列就是枪的靶。别的地方也有类似的例子：激素作用的那个细胞就叫做激素的靶细胞。TCGGATCG CGGATC

你好！PCR也叫聚合酶链反应，用作临床检查一般用来检测体内有无特定病原体感染、有无基因突变等情况。如果能在机体样本中扩增出相应条带，则表明有相应细菌或病毒感染，或有相应基因突变。如果没有，则表明没有感染或突变。因为机体正常情况下是不存在那种

TB是结核杆菌的简称。根据你的描述，你做的是结核杆菌的DNA的PCR检测。测定结果是体内结核杆菌的含量少于500copiesml，说明体内不含结核杆菌或含量低于500copiesml。TB-PCR是结核分枝杆菌检测项目，我也不明白为什么

楼上不要乱说呀。给出信息的不是很明确，没有CT值。很多疾病可以形成低密度灶，但脂肪肝多呈全肝性改变，局限性有，但从比例上看很少。你提到边缘清楚，内部均匀，常见的有囊肿，血管瘤，当然，也不能除外良性占位。你可以再做个B超或增加CT进一步诊断。

PCR即聚合酶链式反应（Polymerase chain reaction）的缩写，它是体外酶促合成特异DNA片段的方法。这一方法的要点是合成两个分别互补于待扩增DNA片段两端的小片段引物，在含有引物、待扩增DNA模板核苷酸底物和DNA多聚

变性-退火-延伸（图1）。 PCR中DNA的合成过程均以两个引物特异性结合处为起点。引物 通常是分别取自靶DNA序列两条链的3’端相向的长度在16~25nt的单链DNA片段，即引物头是5’，尾是3’。引物自身为靶DNA一端的互

　PCR是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链，低温（经常是60°C左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶最适反应温度（72°C左右），DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方

反转录完的cdna加30～50ul水稀释。最终跑板子GAPDH的Ct值在16～18之间，cDNA的总体积也达到了50-70ul，够跑8～10个marker。稀释标准，以最终跑板子GAPDH的Ct值不要太大为宜。每多稀释一倍,Ct值增加1。大

单纯按收费标准收费的话 验光一项 三级医院是5元一次 但是如果是医学验光的话就包括了（视力检查 验光镜片检测 主导眼 斜视度集合调节测定 双眼视觉等）共计为60元左右啦附表 陕西省收费标准（2011）收费编号 名称三

楼主可以使用碱性磷酸酶来做，但其实很多时候去磷酸化是根本不必要的。因为很多公司在合成引物的时候，在客户没有特殊要求的时候，引物的5‘端都是去磷酸化的，一般只有用户要求的时候，才会给合成磷酸化的5‘末端。所以PCR产物的5’端也是－OH而不是

PCR技术必须有人工合成的合理引物和提取的样品DNA,然后才进行自动热循环,最后进行产物鉴定与分析.引物设计与合成目前只能在少数技术力量较强的研究院、所进行,临床应用只需购买PCR检测试剂盒就可开展工作,PCR自动热循环中影响因素很多,对不

1、PCR产物的电泳检测时间：一般为48h以内，有些最好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚至消失。2、假阴性，不出现扩增条带模板：模板中含有杂蛋白质，模板中含有Taq酶抑制剂，模板中蛋白质没有消化除净，特别是染色体中的组蛋白，在提

HIV第二代试剂目前市面是已经不存在了，现在用的一般都是三代试剂和第四代试剂，第三代相比较于第二代能够缩短窗口期7-10天，第四代试剂相比较于第三代试剂又能够缩短一周左右，这样的话第四代试剂基本上两周多都能检测处，而第三代试剂基本上是4周能

巨细胞病毒感染是人类巨细胞病毒（HCMV）所致的一种全身性感染综合症。可经性接触传染，可引起胎儿严重的先天性畸形，并能在儿童及成年人中导致广泛的疾病，从无症状的亚临床型潜伏感染到免疫受损者的播散性疾病。CMV属疱疹病毒科乙组疱疹亚种，是人

巨细胞病毒(CMV)是一种疱疹病毒，分布广泛。CMV感染可引起泌尿生殖系统、中枢神经系统、肝脏、肺、血液循环系统等病变，并与恶性肿瘤的发生可能有关。新近报道，艾滋病与CMV感染可能有关。常通过性交传播。故列为性传播疾病。 巨细胞病毒感染

测序不是按碱基算的，而是按反应的算得，现在在上海这边一般在25-30元之间一个反应，一个反应保证有效读数在800个碱基。如果基因组测序现在多是采用的二代测序技术，这样的平摊到每个碱基上的钱更少了。合成引物大约1.3元一个碱基,各个引物合成公

PCR基本原理示意图（如右图）：在一个典型的PCR反应体系中需加入：适宜的缓冲液、微量的模板DNA、4×dNTPs、耐热性多聚酶、Mg2 和两个合成的DNA引物。模板DNa 94℃变性1min，引物与模板40～60℃退火1min，72℃延

第一个步骤，变性。变性是通过加热，使DNA氢键断裂，形成单链。第二步骤，退火。上下游引物结合到变形DNA上下游。第三步骤，延伸。在引物的引导之下，在DNA聚合酶参与，按照碱基互补配对原则，合成新的DNA单链。变性、退火、延伸。PCR技术一般

1ug = 10负六次方g 1ng = 10负九次方g1pg=10负十二次方g1fg = 10负十五次方g这个要看引物片段的大小。不同片段长度的引物分子量不一样，等摩尔量的引物质量也就不一样。按照20bp来估算的，分子量大概是6600。所以