(1)肾上腺皮质因增生、腺瘤、癌变等所致的皮质醇增多症患者,其血浆、24小时尿以及唾液中皮质醇含量均明显增高,昼夜节律消失。垂体ACTH癌和异位ACTH综合征患者由于ACTH分泌增多,可致血浆皮质醇相应升高。各种原因所致的高糖皮质类固醇激素结合蛋白(CBG)血症血皮质醇水平明显增高。皮质醇在肥胖症以及心肌梗死、脑血管意外、休克等危重疾病亦可升高。(2)皮质醇浓度下降的疾病有:原发性或继发性肾上腺皮质功能减退症、家族性糖皮质类固醇结合蛋白(CBG)缺陷症、Graves病、低蛋白血症、严重肝病或肾脏疾病等。长期应用糖皮质激素、镇静药、中枢性降压药等药物也可使皮质醇水平下降。
目录1 概述2 血浆皮质类固醇的别名3 血浆皮质醇的医学检查 3.1 检查名称3.2 分类3.3 取材3.4 血浆皮质醇的测定原理3.5 试剂3.6 操作方法3.7 正常值3.8 化验结果临床意义3.9 附注3.10 相关疾病 这是一个重定向条目,共享了血浆皮质醇的内容。为方便阅读,下文中的 血浆皮质醇 已经自动替换为 血浆皮质类固醇 ,可 点此恢复原貌 ,或 使用备注方式展现 1 概述皮质醇(cortisol)由肾上腺皮质束状带所分泌,在血液中以结合态和游离态两种形式存在。游离状态的皮质醇仅占10%左右,具有生物活性,并可从肾脏滤过;结合态者主要与糖皮质类固醇结合蛋白(CBG)相结合,少量与白蛋白结合,无生物活性,不被肝细胞破坏,也不能从肾小球滤过。皮质醇的分泌主要受垂体分泌的促肾上腺皮质激素的调节,其分泌有明显的昼夜节律,上午8时左右分泌达高峰,以后逐渐下降,午夜零点最低。皮质醇对机体的物质代谢、免疫功能和多种器官的生理功能具有十分重要的作用。
2 血浆皮质类固醇的别名血浆皮质醇
3 血浆皮质类固醇的医学检查3.1 检查名称血浆皮质类固醇
3.2 分类激素类测定 >肾上腺素测定
3.3 取材血液
3.4 血浆皮质类固醇的测定原理
血浆中的皮质醇95%以上是与血浆中的蛋白质(CBG)相结合的形式存在。采用加热变性或有机溶剂提取将结合型转变为游离型。以皮质醇3组胺制备125I标记物。样品中的皮质醇和125I标记物共同竞争性的与 *** 抗体结合。根据竞争抑制基本原理,从标准曲线直接查得血浆中皮质醇浓度。
3.5 试剂(1)0.1mol/L pH7.4磷酸盐缓冲液:每1000ml中加明胶1g,NaN3 0.5g。放4℃保存。
(2)抗血清:以皮质醇3BSA为免疫原,注射新西蓝兔获得抗血清,经鉴定滴度达1∶40000,与其它甾体类激素交叉反应<10%。按可供测100管的量分装,冷冻干燥。4℃保存。临用前缓冲液11ml溶解。
(3)皮质醇3125I组胺:取皮质醇3组胺5μg/瓶,用常规氯胺T氧化法标记125I。硅胶G薄板层析分离。经鉴定免疫活性,按可供测100管分装,冷冻干燥,4℃保存。临用前加11ml缓冲液溶解。
(4)标准皮质醇贮存液:取经层析纯化的皮质醇1mg,加无水乙醇100ml。放-20℃可长期保存。
(5)标准液:取去激素正常人血清,每L中加25,50,100,500,1000,2000μg皮质醇。分装每瓶0.5ml,冷冻干燥,4℃保存。临用前加0.5ml蒸馏水溶解。
(6)分离剂:取100目活性炭1.2g,BSA 0.2g加缓冲液100ml,磁力搅拌20min,4℃保存。
3.6 操作方法(1)加热变性法:
①取血浆或标准0.1ml至玻璃管中,加生理盐水0.9ml,混合,放沸水浴中5min。即刻取出冷却。
②取10mm×75mm塑料管,按表1加入样品和试剂。
③加入分离剂后放4℃ 20min,离心(3500r/min 4℃)15min。将上清倾出至计数管中,测放射性,以标准曲线直接得样品值。
(2)乙醇提取法:
①取血浆或标准血清0.1ml加至提取管中,加入60%乙醇0.9ml,置液体快速混匀器1min。离心10min。将上清移至另一管中,即为样品提取液。
②取10mm×75mm塑料管,按和变性提取法见表1相同程序加入样品和试剂。并按相同方法分离B、F,绘制标准曲线和直接得出样品中的皮质醇浓度。
(3)尿液样品测定法:
①收集24h尿液,预先向容器内加麝香草酚约0.2g作防腐剂。将尿液加蒸馏水至总量2000ml。混匀,留取10ml置4℃冰箱保存。
②取尿液1ml至提取管中,加10ml二氯甲烷在振荡器上振摇5min。吸出水相,用0.1mol/LNaOH 2ml洗涤1次,蒸馏水2ml洗两次。吸去水相,放-20℃ 30min。吸出二氯甲烷液5.0ml,氮气吹干。残渣溶于1ml含有5%乙醇的缓冲液溶解。
③取皮质醇标准贮存液(10μg/ml),用含5%乙醇的缓冲液稀释至2.5,10,50,200,800μl/L。
④取10mm×75mm塑料管,按表2加入样品和试剂。
⑤加入分离剂后,按和血浆相同方法离心分离和测量。
⑥以B/B0%对标准管浓度绘制标准曲线,从标准曲线查得样品值乘4即得尿中游离皮质醇μg/L。
3.7 正常值血浆:上午8~9时(442±276)nmol/L,下午3~4时(221±166)nmol/L。
3.8 化验结果临床意义(1)肾上腺皮质因增生、腺瘤、癌变等所致的皮质醇增多增多症患者,其血浆、24小时尿以及唾液中皮质醇含量均明显增高,昼夜节律消失。垂体ACTH癌和异位ACTH综合征患者由于ACTH分泌增多,可致血浆皮质皮质皮质醇相应升高。各种原因所致的高糖皮质类固醇激素结合蛋白(CBG)血症血皮质醇水平明显增高。皮质醇在肥胖症以及心肌梗死、脑血管意外、休克等危重疾病亦可升高。
(2)皮质醇浓度下降的疾病有:原发性或继发性肾上腺皮质功能减退症、家族性糖皮质类固醇结合蛋白(CBG)缺陷症、Graves病、低蛋白血症、严重肝病或肾脏疾病等。长期应用糖皮质激素、镇静药、中枢性降压药等药物也可使皮质醇水平下降。
3.9 附注因血液中皮质醇生理波动较大,早晨最高,以后逐渐降低,入睡后降至最低水平。临床上一般于早晨8时左右采血标本送检。
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