还有就可能化学诱变剂有毒性,长时间接触致死率会过高,处理一段时间后要稀释
希望对你有帮助
1、待霉菌产孢时,向斜面试管加入5mL无菌水,把孢子刮下,倒入已灭菌的三角瓶;2、向三角瓶中加入表面活性剂;
3、将三角瓶放入摇床振荡1.5h,使孢子活化;
4、然后在3500r/min离心15min,用PH7.2磷酸缓冲洗涤一次,再用缓冲液5mL洗转入小三角瓶内(瓶中预先放置数粒无菌玻璃球),振荡10min,使孢子分散;
5、将分散的孢子液用四层灭菌的擦镜纸过滤,制成单孢子悬液;
6、镜检。
若发现其中存在孢子囊或菌丝,则向里加入蜗牛酶、几丁质酶,充分振荡,使孢子囊溶解,再用四层灭菌的擦镜纸过滤。再镜检
若未发现孢子囊或菌丝,则放置待用。
把现在制成单孢子悬液称为原浓度单孢子悬液。
1、不一定,根据所培养的细菌的营养需要选择培养基,可以是固体培养基也可以是液体培养基。肉汤培养基只是其中的一种而已。2、培养结束后,如果是固体培养,直接收集菌泥,之后加入到生理盐水或磷酸缓冲液,重悬均匀后即成。如果是液体培养可先3000rpm离心去上清,或无菌过滤(滤纸孔径小于0.45微米),将滤纸上的菌泥收集,其他方法同上。
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