用化学诱变剂处理过的细菌，为什么要用缓冲液来制备菌悬液？_备孕

应该是方便后续的筛选，处理成悬浮的单细胞悬液使有发生变异和没有发生变异的细胞分开，在涂布平板可分开成单个细胞的纯的菌落，以防之后筛选出现不纯的菌落，如果将这种不纯的菌落进行育种，传代后很快会出现性状的衰退。

还有就可能化学诱变剂有毒性，长时间接触致死率会过高，处理一段时间后要稀释

希望对你有帮助

1、待霉菌产孢时，向斜面试管加入5mL无菌水，把孢子刮下，倒入已灭菌的三角瓶；

2、向三角瓶中加入表面活性剂；

3、将三角瓶放入摇床振荡1.5h，使孢子活化；

4、然后在3500r/min离心15min，用PH7.2磷酸缓冲洗涤一次，再用缓冲液5mL洗转入小三角瓶内（瓶中预先放置数粒无菌玻璃球），振荡10min，使孢子分散；

5、将分散的孢子液用四层灭菌的擦镜纸过滤，制成单孢子悬液；

6、镜检。

若发现其中存在孢子囊或菌丝，则向里加入蜗牛酶、几丁质酶，充分振荡，使孢子囊溶解，再用四层灭菌的擦镜纸过滤。再镜检

若未发现孢子囊或菌丝，则放置待用。

把现在制成单孢子悬液称为原浓度单孢子悬液。

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拿个EP管称重归零，再用枪头挑取菌落到EP管里头，然后称重。

到了10mg就加1ml无菌水混匀。

目测一下浑浊度，以后制备就目测下浑浊度就好了，不用称，没必要那么准确。

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