免疫组化与免疫荧光的区别有哪些？

免疫组化与免疫荧光的区别有哪些？ 使用范围广是荧光免疫，我们在检验时称为高敏，但是高敏的他的专属性不强，免疫染色专属性较强，但是对很多不敏感！不知道说清楚没有！###免疫荧光技术（Immunofluorescencetechnique）又称荧光抗体技术,是标记免疫技术中发展最早的一种.它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术.很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位.免疫组织化学又称免疫细胞化学,是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术.它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来,借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用,在细胞、亚细胞水平检测各种抗原物质(如蛋白质、多肽、酶、激素、病原体以及受体等).免疫组化技术近年来得到迅速发展.50年代还仅限于免疫荧光技术,50年代以后逐渐发展建立起高度敏感,且更为实用的免疫酶技术.###使用范围广是荧光免疫,我们在检验时称为高敏,但是高敏的他的专属性不强,免疫染色专属性较强,但是对很多不敏感!不知道说清楚没有!###免疫组化是融合了免疫学原理(抗原抗体特异性结合)和组织学技术(组织的取材、固定、包埋、切片、脱蜡、水化等)，通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色，来对组织(细胞)内抗原进行定位、定性及定量的研究(主要是定位)。

样本是细胞或组织，要在显微镜下观察结果，可能出现膜阳性、质阳性和核阳性。

elisa(酶联免疫吸附试验)用到了免疫学原理和化学反应显色，待测的样品多是血清、血浆、尿液、细胞或组织培养上清液，因而没有用到组织包埋、切片等技术，这是与免疫组化的主要区别，操作上开始需要将抗原或抗体结合到固相载体表面，从而使后来形成的抗原-抗体-酶-底物复合物粘附在载体上，这就是;吸附;的含义。

免疫组化和elisa所用到的原理大致相同，只是因为所检测的样品不同，从而在操作方法上有所不同。

Elisa多用于定量分析，其灵敏度非常高。

westernbolt先要进行SDS-PAGE，然后将分离开的蛋白质样品用电转仪转移到固相载体上，而后利用抗原-抗体-标记物显色来检测样品，可以用于定性和半定量。

免疫学三大工具，免疫组化、Western、ELISA，分别用于定位，定性和定量。

以下western和Elisa的区别不是原创，是找的资料。

westernblotting可以看到特异性的条带，但是定量比较烦elisa可以直接读出浓度，但是如果抗体有非特异性结合，那得到的数值就不可信。

WB只能半定量,但是可以检测细胞膜蛋白,这点ELISA做不到ELISA可用定量方法检测蛋白,也就是说可以观察不同浓度**物对目的蛋白的影响WB所检测的一般是抗原，而Elisa抗原抗体都可以检测。

WB所检测的抗原可以知道其分子量的大小，或是否是多聚体、降解产物等，一句话，WB可以确定所用抗体是与那种蛋白起作用的;而Elisa无能为力，一锅端了。

WB所适用的一抗一般是线性位点的，ELISA线性或构象型抗体都可以使用。

从另一个意义上讲，WB可以做抗体是线性位点还是构象型位点的补充判定，而Elisa不行。

WB一次处理量就是一块胶版，10-20个样品最多了。

Elisa一块96孔板一次可以处理96个样本，可以设置多个复孔、对照、梯度样等来提高检测的可信度。

WB操作常见的非特异性条带，膜本底差，显色不好等等缺点在Elisa上表现得要好得多。