非清髓造血干细胞移植

非清髓造血干细胞移植,第1张

非清髓性(NST)造血干细胞移植已经广泛应用于血液系统恶性疾病、某些实体器官肿瘤以及非恶性疾病的治疗,且有逐年增加的趋势,在某些疾病有取代标准移植的趋势。这种方法的可行性在许多研究中得到证实,很多患者取得了很好的疗效。1 预处理方案的选择传统的标准清髓性(CST)预处理方案的有效性已得到证实,但该方案通常伴有较高的移植相关死亡率,移植相关死亡率通常在20%~50%之间,主要与移植时的状态、疾病以及疾病所处的阶段有关,标准移植通常仅适用于年轻且无其它相关并发症的患者。研究发现尽管使用了大剂量的标准预处理方案,恶性肿瘤细胞并未被完全清除,而移植后的移植物抗肿瘤(GVM)效应可以清除残存的肿瘤细胞,治愈某些恶性疾病。这一发现促进了NST的发展,用低毒甚至无毒的预处理方案预防移植物被排斥,植入后通过GVM效应发挥治疗作用。通常根据预处理方案的强弱将NST方案分为两类,一类是真正意义上的NST方案,其产生的骨髓抑制是可逆的,即使不给予造血干细胞移植,患者自身的造血可在28d内恢复,植入后的患者通常为混合嵌合体。该类主要包括福达华(F)+环磷酰胺(C),F+去甲氧柔红霉素(I)+阿糖胞苷(A),以及含2Gy全身照射(TBI)为主的预处理方案。另外一类是减低剂量的预处理方案,如含<16mg・kg -1 的白消胺预处理方案以及含<10Gy的TBI方案。如果不予造血干细胞移植造血即不能恢复,移植后早期即可产生完全嵌合体,虽然此类方案被划为NST方案,但从这一意义上来说,其又可被划为CST方案。这一类方案包括F+白消胺(B)(8mg・kg -1 )的FB方案以及F+马法兰(M)(140~180mg・m -2 )的FM方案。 预处理方案的选择主要与疾病对移植物抗白血病(GVL)效应的敏感性有关。通常按对GVL效应的敏感性不同将血液系统恶性疾病分为三类,第一类是对GVL效应高度敏感的疾病,主要包括慢性粒细胞白血病、惰性淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病以及套细胞淋巴瘤。这些疾病移植前不需要较强烈的预处理方案,选用前种方案即可,这一类疾病的共同特点是进展缓慢,70%的移植后复发者可通过供者淋巴细胞输注(DLI)再次缓解。第二类是对GVL效应中度敏感的疾病,主要包括急性髓性白血病、多发性骨髓瘤、大细胞淋巴瘤以及霍奇金病。这类疾病异基因移植的效果优于同基因以及自体移植,但这些疾病复发后行DLI疗效不如第一类疾病好,并且反应通常是短暂的。第三类是对GVL效应相对不敏感的疾病,主要包括急性淋巴细胞白血病以及高度恶性淋巴瘤,该类疾病伴有移植物抗宿主病(GVHD)者复发率低于无GVHD者,复发者DLI通常无效。对于第二、三类疾病应选用更强烈的第二类方案甚至清髓性方案,或当疾病处于微小残留病变时用较小强度的预处理方案。耐药或白血病细胞负荷很高时低剂量预处理效果通常不好。Champlin等用两种不同强度的预处理方案治疗慢性粒细胞性白血病,入选者包括年龄大于50岁或有不能耐受大剂量化疗的并发症的患者,11例接受较低剂量的FIA方案,22例接受FM方案,相关或无关供者的造血干细胞在0d输注,结果显示前者复发率高而后者治疗相关死亡率高。两种NST方案均不能根除白血病细胞,故推测较强的预处理方案可产生较强的GVL效应。这一结论不一定适用于疾病的早期或其它预处理方案。大多数血液系统恶性疾病对GVL效应的敏感性不如慢性粒细胞白血病高,NST移植欲获成功必须在移植前减低白血病细胞负荷或用能够减低细胞负荷的方案。2 NST后的GVHD问题为了减少移植相关死亡率,低强度的以福达华为基础的预处理方案发展较快,这一方案的优点在于获得异基因造血干细胞稳定植入的同时,血液系统以外的毒性非常小,但是该方案仍有较高的与GVHD相关的死亡率。Mackinnon等因此设计了一种新的NST方案,在前述以福达华为基础的方案基础上加入Cam-path,显著降低了GVHD发生率。加入Campath还可以获得持久的植入,降低移植相关死亡率。44例血液系统恶性疾病患者用该方案进行了移植,平均年龄43岁(18~62岁),许多患者具有高危特征,包括19例曾经进行自体移植后复发者。预处理方案为Campath20mg・d -1 ,第-8~-4天福达华30mg・m -2 ,第-7~-3天马法兰140mg・m -2 ,第-2天。36例患者接受粒系集落刺激因子(G-CSF)动员的未经处理的同胞相合者的外周血干细胞,8例接受未经处理的相合无关供者的骨髓,38例单独使用环孢霉素A预防GVHD,6例使用环孢霉素A+氨甲碟磷预防GVHD。可评价疗效的43例患者中42例获稳定植入,中性粒细胞>0.5×10 9 L -1 的中位时间为13d(10~18d),血小板>20×10 9 L -1 的中位时间为17d(10~51d),1例患者移植物被排斥,第31天恢复自身造血。嵌合状态分析显示58%(18/31)患者为完全嵌合,而其他患者表现为1个系或多系的混合嵌合。仅3例患者发生Ⅲ~Ⅳ级急性GVHD,3例患者发生慢性GVHD,这一比率远低于不含有Campath的NST方案。随访中位时间9个月(3~29个月),33例仍处于完全缓解状态,没有疾病进展的证据7例患者复发或进展,其中4例随后死亡,4例患者死于移植相关并发症,非复发死亡率11%。这一方案的缺点为巨细胞病毒(CMV)感染率上升,然而CMV感染率上升并没有对该组生存率发生影响。另外一个问题是该方案可以形成稳定的混合嵌合体,因而影响了GVL效应的发挥,Mackinnon等用逐渐递增的供者淋巴细胞输注(DLI)的方法以使混合嵌合体转变为完全嵌合体。移植后6个月开始进行DLI,首次DLI剂量为1×10 6 kg -1 T淋巴细胞,每3个月增加1次T细胞剂量,最终剂量3×10 7 kg -1 ,直至患者达到完全嵌合或不能测出微小残留病变。25例移植后处于混合嵌合状态的患者中,19例DLI后转为完全嵌合体,其余6例T系仍为混合嵌合,5例髓系仍为混合嵌合体。在全相合同胞供者移植中,早期DLI的 使用不增加GVHD的发生率,然而在相合无关供者移植中,早期DLI的使用在一些患者出现了Ⅲ~Ⅳ级GVHD。因此,早期DLI在相合无关供者移植中使用应慎重。总而言之,在以福达华为基础的NST预处理方案中,加入Campath可以促进植入、降低GVHD发生率和移植相关死亡率。这一方案如与预防性使用DLI相结合,可以获得更好的疗效。3 移植后复发的处理尽管预处理方案中使用的大剂量化疗以及异基因移植中的免疫效应,恶性疾病的复发仍是异基因造血干细胞移植失败的最主要原因。因为新技术已能检测出残存的少量白血病细胞,近年来复发的定义已修改。临床或血液学复发指形态学或有疾病复发的临床证据。对于有某些遗传学标记的疾病,遗传学复发指有染色体异常的细胞的再次出现分子生物学复发指用PCR方法可以检测出百万分之一的恶性细胞。这些新技术的出现促使我们更新了缓解及复发的概念,发展与之相对应的治疗方法。移植后复发的机制尚未完全明了,除恶性细胞具有耐药性或缺乏免疫抗原的表达外,恶性细胞导致免疫抑制以及其信号传导系统的缺损导致其对细胞介导的细胞毒作用不敏感亦有可能。二次移植在年轻并且有较长首次缓解期的患者疗效尚可,然而,在年龄较大或疾病处于进展期的患者二次移植的复发率及死亡率均较高。慢性髓细胞性白血病(CML)患者许多与复发相关的预后因素目前已经明了。Cross报道如果bcr-abl基因水平逐渐增高,最终会导致遗传学复发,但并非每一个遗传学复发者都会转为血液学复发。NST后复发的CML患者,减少免疫抑制剂的用量、行DLI或使用酪氨酸激酶抑制剂可以使之完全缓解,但有增加GVHD及感染的危险。DLI效果在急性白血病及多发性骨髓瘤患者效果不如CML明显。Levine总结出一个预测系统预测DLI的效果,在急性白血病及CML移植后复发的患者,移植后缓解期的长短对于DLI的效果及生存是惟一重要的因素。异基因造血干细胞移植后复发的处理方法取决于疾病复发时所处的阶段。复发时处于微小残留病变阶段(如通过PCR法、FISH或遗传学方法检测出)可以仅予供者淋巴细胞输注,逐渐增加输注量。复发时幼稚细胞<25%也可仅予DLI,如不成功,可用DLI+白细胞介素-2(IL-2),也可进一步使用淋巴细胞激活的杀伤细胞(LAK)+IL-2。通过使用干扰素或化学治疗减少肿瘤细胞负荷可以增强DLI产生的GVL效应。如果复发时幼稚细胞>25%仅靠DLI是不够的,可以在化疗后给予DLI或进行NST处理,更进一步可以使用DLI+IL-2或LAK+IL-2,这一方法即使对于耐药性急性淋巴细胞性白血病(ALL)亦可能有效。临床观察证实在一些患者DLI可以完全清除肿瘤细胞而无GVHD发生。DLI成功的关键是经常对移植后的患者进行检测,早期检测出宿主及肿瘤细胞并予以清除。4 非清髓性造血干细胞移植的疗效对于造血系统恶性疾病进行异基因造血干细胞移植治疗时究竟应选用CST或NST方案存在争议。Uzunel等将慢性粒细胞白血病分为两组,一组进行CST预处理,选用Cy/TBI或BU/CY方案,另一组进行NST预处理,选用FBA(ATG)方案,一年后CST组bcr-abl融合基因阳性率为50%,NST组bcr-abl融合基因阳性率为20%。Slattery等以稳态血浆药物浓度监测下的BU/CY预处理方案对CML首次慢性期(CP)患者进行移植,3年无病生存率为86%。Reuven等以FBA NST方案对CML首次CP期患者进行移植,中位随访5年,无病生存率为85%。Jane等观察了异基因造血干细胞移植治疗骨髓增生异常综合征(MDS)的疗效,无关供者2年生存率在CST组和NST组分别为34%及49%。同胞全相合供者移植2年生存率在CST组和NST组分别为50%及48%,并且NST组都是无法接受CST移植的高危患者,以上结果表明对于慢性粒细胞白血病以及MDS患者选用以FBA预处理的NST组疗效不亚于CST组。Khouri等用FC加或不加美罗华预处理方案对20例复发的滤泡及小细胞性淋巴瘤患者进行NST造血干细胞移植,患者中位年龄51岁,仅2例患者需要1次的血小板输注,4例出现≥Ⅱ级GVHD,随访中位时间21个月示所有患者均完全缓解(CR)。以上结果表明,对GVL效应高度敏感的疾病选择NST造血干细胞移植是可行的,具有高效低毒节省费用的优点,应用前景较好。

2017检验医学知识要点集锦

172. 肾素由肾小球旁器分泌,是人体最强的升压物质,也是让肾上腺释放醛固醇的主要刺激物。

173. 垂体激素均为多肽或糖蛋白。

174. HCG、TSH、LH、FSH均由α,β两条多肽链亚基组成。且它们的α链高度同源性。

175. 生长激素(缺乏得垂体性侏儒症,GH)的促生长作用必须通过生长调节素(SM)的介导作用。SM-C及SM结合蛋白测定因其不跟GH的分泌而波动,故单次即可了解GH功能状况。

176. 催乳素瘤是功能性垂体腺瘤中最常见的,好发于女性。

177. 所有性激素都是类固醇。

178. 睾酮代谢物为雄酮是17—KS的主要来源,雌二醇(生物活性最强的天然雌激素,女性早熟指标))和雌酮代谢物是雌三醇,孕酮(确证排卵)代谢物是孕烷二醇(黄体功能指标)。

179. 测定早晨的睾酮(男青春期10—20,成年期:300—1000)水平可以对男性睾酮水平下降作出最好评价。

180. GNRH兴奋试验主要检测腺垂体促性腺的贮备功能状况。

181. 可以引起性功能紊乱的性激素合成酶有:C—17,20裂链酶,17—B羟类固醇脱氢酶,5A—还原酶。

182. 聚丙烯酰胺电泳普遍用于分离蛋白质及较小分子核酸。

183. 琼脂糖电泳适用于分离同工酶及其亚型,大分子核酸。

184. 等电聚焦电泳适合分离分子量相近而等电点不同的蛋白质组份,分辨率最好。

免疫学

185. 免疫防御(对外)免疫自稳(防自身免疫病)免疫监视(防肿瘤)。

186. 标记免疫技术应用最多,自动化是免疫学检验发展趋势。

187. 抗原的表位至少有二种方式:顺序或线性表位,三维结构的构象表位。

188. 天然抗原绝大多数是胸腺依赖性抗原(TD—AG)。

189. 超抗原被T细胞识别时虽然要与MCHII类分子结合,但不受II类分子的限制,可以直接活化T细胞而且效率高。

190. 抗体由浆细胞产生。抗体分子上VH和VL(高变区)是抗原结合部位,CL,CH1是遗传标记所在,CH2有补体结合点,CH5能固定组织细胞,CH3和CH4还参加I型变态反应。

191. 免疫学中常用木瓜蛋白酶或胃蛋白酶水解Ig分子,木瓜蛋白酶水解为2Fab+Fc,而胃蛋白酶水解为F(ab)2+nFc。

192. 免疫球蛋白的血清型有:同种型(正常个体都有)同种异型(只存在同种的某些个体中)独特型(某一个体独有的。独特性网络在免疫应答的调控中起重要作用)。

193. 天然IgG分子无活性。

IgM:五聚体,为天然凝集素和冷凝集素,是B细胞膜上主要表面膜Ig,激活补体能力最强。

IgG:单体,电泳最慢,再次免疫应答的主要抗体,至少要两分子。

194. 0.1ml的2-巯基乙醇能破坏IgM但不破坏IgG,用此方法可以区分它们。

195. 母乳中的分泌型IgA提高了婴儿出生后4—6个月内的局部免疫屏障,常称为局部抗体。

196.补体激活经典途径的固有成份按激活先后顺序为C1,C2…….C9。旁路途径直接从C3开始激活。

197. C1由C1q,C1r,C1s,三种组成。灭活的补体在片在符号前加i,有酶活性的上加一横。

198. 补体大多是糖蛋白多属β球蛋白,但C1q,C8是r蛋白,C1s,C9是a球蛋白。

199. 补体系统中C3含量最多,C2含量最少。

200. 替代途经的激活物主要是细胞壁成分。

201. 补体清除免疫复合物的方式:吞噬调理免疫粘附免疫复合物抑制。

202. 编码人C4,C2,B因子的基因在第六染色体短臂上与MHC的基因相邻,命名为III类组织兼容性基因。

203. 产生补体主要是肝细胞、巨噬细胞。

204. 已发现的归巢受体有:CD44,LFA-1,VLA-4,MEL-14/LAM-1等。

205. CD2表达于全部T细胞和NK细胞表面,CD3表达在全部T细胞。

206. CD4+T:又称辅助性T细胞CD8+T:又称细胞毒性T细胞。

207. SIG的功能是作为B细胞表面的抗原受体,可与相应抗原特异性结合并将抗原内摄处理。

208. MHCII是递呈细胞(AC)递呈抗原的必须物质,是递呈细胞(有单核吞噬,树突状,B细胞)的标志。

209. 明确的白介素有15个,IL-2主要由T细胞(CD+4)受抗原或丝裂原刺激后产生。

210. II型干扰素又称免疫干扰素或IFNR,主要由T细胞产生。

211. 肿瘤坏死因子:TNFa:由细菌脂多糖活化的单核细胞产生引起出血坏死也称恶病质素,TNFb:由抗原或丝裂原刺激的`淋巴细胞产生有肿瘤杀伤和免疫调节功能又称淋巴毒素。

212. 红细胞生成素(EPO)是糖蛋白,主要由肾小管内皮细胞合成也可由肝和巨噬细胞产生。

213. 人类MHC称为HLA复合体,位于第六对染色体的短臂上。其多态性为复等位基因所致,当群体中位于同一位点的等位基因多于两种时为复等位基因,HLA的遗传特点:单倍型,共显性,连锁不平衡。HLA是体内最复杂的多态性基因系统。

214. I和II类MHC分子是引起同种异体移植排斥反应的主要抗原。

215. 当抗原递呈细胞向免疫活性细胞递呈抗原时,免疫活性细胞在识别特异性抗原时,必须识别递呈细胞上的MHC抗原称为MHC限定性。

216. 抗原—MHCⅡ类分子复合物与CD4+T细胞受体结合抗原—MHCⅠ类分子复合物与CD8+T细胞受体结合。以上结合是使Th细胞活化的首要信号。

217. 细胞免疫的效应方式有:细胞毒,迟发超敏。体液免疫以血清中有循环抗体为特征。

炎症细胞有:中性、肥大、嗜酸、嗜碱、血小板、内皮细胞。

炎症介质:血管和平滑肌收缩介质、趋化因子、酶类、蛋白多糖。

免疫炎症类型:IgE介导,免疫复合物,细胞,皮肤嗜碱细胞型。

218. 抗原抗体结合基于结构互补与亲和性,由一级结构决定。

219. 抗原抗体结合力有:静电吸引、范德华力、氢键、疏水作用力,其中疏水作用力最强。

220. 常用佐剂有:氢氧化铝,明矾(弗氏)是目前动物免疫中最常用的。

221. 抗血清常见保存条件:4度保存低温保存冰冻干燥保存。

222. 抗体特异性纯化有:亲和层析,吸附法。

223. 脾淋巴细胞特征是抗体分泌功能和能在选择培养基中生长,骨髓瘤细胞则可无限分裂既永生性。

224. 细胞融合的选择培养基有三成份:次黄嘌呤(H)氨甲蝶呤(A)胸腺嘧啶核苷(T)称为HAT培养基。

225. 补体结合试验中5种成份分三个系统(反应,补体,指示),结果判定以不溶血为阳性。

226. 常用的标记酶有:辣根过氧化物酶(底物为邻苯二胺,四甲基联苯胺(常用))碱性磷酸酶(底物为磷酸酯)。

227. 酶标抗体制备常用 二醛法 及 过碘酸盐法。

228. RIA(放免)核素标记抗原,竞争抑制,2-3个数量级,标记物限量。

IRMA(免疫放射)核素标记抗体,非竞争结合,3个数量级以上,标记物过量。229. 常用的荧光素有:异硫氰酸(FITC)四乙基罗丹明(RB200)四甲基异硫氰酸罗丹明(TRITC)藻红蛋白(R-RE)。

230.荧光标记蛋白的常用方法:搅拌法和透析法。

荧光抗体鉴定包括效价及荧光素与蛋白的结合率,大于1:16为理想,一般固定标本的荧光抗体以F/P=1.5为宜,用于活细胞染色的以2.4为宜。

231. 时间分辨荧光免疫测定以镧系元素(如:铕)化合物为荧光标记物。

232. 偏振免疫测定的偏振波长是485nm(蓝光)。

233. 发光免疫技术:生物发光:荧火虫荧光素化学发光底物有:氨基苯二酰肼类主要为鲁米诺及异鲁米诺衍生物、哑啶酯类电化学发光底物为三联吡钌、三丙胺。

234. 双抗体夹心法的质控点最好是相应抗原。

235. 外周血单个核细胞的分离的分层液常用:Ficoll(由上到下为血浆,单个核细胞,粒,红)和Percoll(由上至下:死细胞,单个核细胞,淋,红,粒)。

236. 纯淋巴细胞群的采集有:黏附贴壁法,吸附柱过滤法,磁铁吸引法。亚型的分离法有:E花环沉降法,尼龙分离法,亲和板结合法,荧光激活细胞分离仪法。237. 淋巴细胞活力测定常用台盼蓝染色法,死细胞为蓝色。保存时二甲亚砚为保护剂。

238. 植物血凝素(PHA)刀豆素(CONA)刺激T细胞增殖。增殖试验有:形态法(分别计数淋母,过渡性淋母,核有丝分裂相及成熟小淋,前三者为转化细胞,计200个,算转化率)、核素法。

239. SmIg(膜免疫球蛋白)是鉴定B细胞可靠的指标。

240. B细胞功能检测方法:溶血空斑形成试验(直接法只能检测IgM生成细胞,其它用间接法,即在脾细胞和SRBC混合时加入抗Ig抗体)。

241. 测定人NK细胞活性多用以K562细胞株为靶细胞,测鼠NK细胞活性则用YAG细胞株。

242. 嗜酸粒细胞活化产物的测定:产物有:阳离子蛋白(ECP),主要碱基蛋白(MBP),X,EPD,EDN等,其中ECP毒性最强因而认为是嗜酸的特异性标志。

243. 新月体性肾小球肾炎的免疫病理类型有:免疫复合物,抗肾小球基底膜(GBM)抗体,抗中性白细胞质抗体。含有新月体的肾小球数目和比例是该病的关键。

244. 自身免疫病(AID)的特征:高滴度自身抗体,病理特点为免疫炎症损伤与抗原分布一致,能建动物模型。

248. 抗乙酰胆碱受体抗体:对重症肌无力(MG)具有诊断意义。

249. 抗核RNP抗体:为MCTD(混合性结缔组织病)的诊断指标。

250. 抗SSA/抗SSB抗体:为干燥综合征(SS)的诊断指标。

251. 抗Jo-1抗体:多发性肌炎(PM)患者常为阳性。

252. 抗Scl-70抗体:进行性系统性硬皮症(PSS)的诊断指标。

253. 内风湿性关节炎(RA):自身抗体有RF、抗角蛋白抗体(AKA)。其中AKA为RA的确诊指标,而RF为初筛指标,因为RF还可出现于其它的自身免疫性疾病。

254. Farr法测定dsDNA抗体的特异性高,为公认标准法,当抗dsDNA抗体结合率大于20%时对SLE有意义。

255. 多发性骨髓瘤(最常见免疫增殖病)以IgG型最常见IgM型容易引起高粘滞血症IgE型罕见,且易并发浆细胞白血病轻链型易并发肾功能不全。

256. 重链病类别常见γ链(IgG),α链(IgA),μ链(IgM)三型。

257. 原发性B细胞缺陷病类型:全Ig缺失(BROTON病,女带,男患病,最先考虑测Ig浓度,CD分子,SmIg)部分Ig缺失Ig正常但无抗原反应。

258. 原发性T细胞缺陷病:易并发移植物抗宿主反应(GVHR)。T细胞缺陷常同时伴有体液免疫缺陷。

259. 原发性联合免疫缺陷病,以重症联合免疫缺陷(SCID)的预后最差。

260. 在原发性免疫缺陷病中,以补体缺陷发病率最低。

261. 只有感染了乙肝才能感染丁肝。

262. 艾滋病T淋巴细胞亚群检查可发现T细胞绝对数下降,且以CD4+T淋巴细胞下降为主,CD4+T/CD8+T小于1。检测的抗体主要是P24,GP120。

263. CEA大于60μg/L时可见于结肠、胃、肺癌。手术6周后CEA水平正常。

264. 血清CEA结合甲状腺降钙素测定有助于甲状腺髓样癌的诊断和估计。

265. AFP是原发性肝癌的最灵敏最特异的标志。PSA是前列腺癌特意的指标,

266. 糖类抗原有:CA125:上皮性卵巢癌和子宫内膜癌CA15-3:乳腺癌CA19-9:胰腺癌、结直肠癌。

267. AFU(A—L岩藻糖苷酶)是原发性肝癌的新指标。

268. 神经元特异性烯醇化酶(NSE)是神经母细胞瘤和小细胞肺癌(基因有P53,RB)的标志物。

269. 排斥反应有:宿主抗移植反应(HVGR)和移植物抗宿主反应(GVHR)。

微生物学

270. 生物学按界、门、纲、目、科、属、种分类,种是最小单位。

271. 结核菌可利用甘油为碳源,梭状芽胞菌可以氨基酸为碳源,

272. 流行性感冒杆菌要Ⅴ,Ⅹ因子才能生长。

273. 致病性岛:由基因编码决定的一团与致病性相关的基因组。

274. 微生物超净工作台应选择垂直气流通风方式。

275. O/129抑菌试验对弧菌有用,而对气单胞菌无用。

276. 杆菌肽敏感试验:用于A群链球菌(敏感)与非A群链球菌(耐药)的鉴定。

277. 奥普托欣试验:肺炎链球菌敏感。

278. L型细菌特点:生化减弱渗透压敏感,培养应高渗(20%蔗糖)染色不定,多为G-形态不一(巨球形是特征)固定要用10g/L鞣酸不能用火焰生长在增菌液中微浑、颗粒样沉淀或沿试管壁生长返祖现象。

279. L型细菌常见菌落有三种:油煎蛋样菌落(L)、颗粒型菌落(G)、丝状菌落(F)。

280. 原生质体与原生质球都是细胞壁缺陷的细菌。

281. 肽聚糖的结构由聚糖骨架,四肽侧链和五肽交联桥(G-无交联桥)。

282. 磷壁酸为G+特有,分壁和膜两种。

283. 细菌外膜层由脂多糖,脂质双层,脂蛋白组成。细胞质内有蛋白合成地、核质(主要遗传物质)质粒、胞质颗粒,是细菌蛋白质和酶类合成的重要场所。

284. 鞭毛是由细胞质伸出的蛋白性丝状物。

285. 性菌毛仅有1—10根,毒力和耐药质粒都能通过它转移,有致病性。

286. RNA主要存在于细胞质中,占细菌干重的10%,DNA存在于染色体和质粒中。

287. G+等电点2—3,G-等电点4—5。

288. 细菌营养转运的方式有:离子,透性酶,磷酸酶。营养摄取的机制:被动扩散,主动吸收,基团转位。

289. 嗜冷菌最适温度为10—20℃,嗜温菌为20—40℃,嗜热菌为50—60℃。

290. 细菌代谢所需能量主要以生物氧化作用而来。

291. G-菌的菌体脂多糖能引起发热故称热原质。

292. 土中的厌氧芽胞杆菌是创伤感染病原菌的主要来源。

293. 1000毫升饮用水中大肠杆菌群不过3个。

294. 有芽胞破伤风菌需沸水煮三小时才杀死。

295. 水中加入2%碳酸钠能将沸点提到105度,又能防止金属生锈。

296. 紫外线波长265—266nm时杀菌力最强。

297. 无芽胞菌一般的致死为1800—6500微瓦/cm,杀死芽胞要十倍。

298. 滤菌器用于除菌的孔径是0.22微米,

299. 高压蒸汽灭菌指示生物物种:嗜热脂肪芽胞杆菌(ATCC7053)

紫外线杀菌指示生物物种:枯草芽胞杆菌黑色变种(ATCC9372)。

300. 细菌遗传物质主要在于染色体、质粒和转位因子中。

301. 质粒:不依赖染色体而复制,不兼容性,转移性,指令性。

主要有耐药质粒、Col质粒(编码肠毒素)、VI质粒(编码细菌与致病性有关的蛋白)。

302. 转位因子为存在于细菌染色体或质粒上的一特异的核苷酸序列可在DNA中移动,主要有三类:插入顺序(最小的转位因子)、转座子、转座噬菌体。

303. 遗传型变异机制有基因突变、基因转移、基因重组。

304. 突变:突变率由复制的准确度,DNA发生损伤的机会,及对损伤DNA修复程度来决定。一般在106--109。

305.

转化:受体菌直接提取供体菌提供的游离DNA的片段整合重组使受体菌的性状发生变异。

转导:以噬菌体为媒介,将供体菌的基因转移到爱体菌内而致受体菌基因改变,分普遍和局限。

接合:受体菌和供体菌直接接触,供体菌通过性菌毛将所带的F质粒或类似遗传物质转移到受体菌。

溶源性转换:是噬菌体的DNA与细菌染色体重组,使宿主遗传结构发生变异。

原生质融合:两种经过处理失去细胞壁的原生体混合和可发生融合后的双倍体可发生染色体间的重组。

306. 基因重组可使基因再激活表现为:交叉复活和多重复活。

307. 粘附素是细菌表面的蛋白质有菌毛和非菌毛。

308. 毒力有侵袭力和毒素。侵袭力:菌体表面结构,菌毛,侵袭性酶(凝固酶,透明质酸酶,链激酶,胶原酶等)。

细菌的内毒素一般由:脂质A(主要成份)、,非特异性核心多糖、菌体特异性多糖组成。一般7---10天后机体产生特异性免疫。IgG和IgM能在血中直接中和病毒。

309. 医院感染大多以散发形式流行。

310. 细菌分类目前国际上普遍采用伯杰分类系统,也有用CDC(USA)。

311. 日光灯波长约0.5微米。显微镜的分辩率为波长一半。

312. 荧光显微镜的光源为高压汞灯。

313. 抗酸染色步骤和时间:5%石碳酸复红(5-10min)—3%盐酸酒精(脱到无色)—吕氏美蓝(30S-1min)。

314. 糖类发酵是鉴定细菌最常用的生化反应。

315. 怀疑细菌性心内膜炎时血培养应不少于三次。

316. 血培养中,不能立刻接种的血标本应用SPS抗凝。

317. 直接镜检2h报告,最后鉴定和药敏一般不过3天,除血外,必须在24h内预报。

318. 肠杆菌科的强选择培养基(SS琼脂),弱选择培养基(EMB,麦康凯)。

319. α溶血是草绿色溶血,β溶血是透明溶血环,γ溶血红细胞不溶解,双环。

320. 细菌数量达106—107CFU/ml时培养肉汤才见混浊。

321. 血培养中有105CFU/ml时才能通过革兰氏染色检出细菌。

322. 测定病原体的感染性最好选用无菌动物或悉生动物。

323. 冷冻干燥保存法是最有效的菌种保存方法,利用各种斜面和半固体加石蜡油是最常用和最简便的菌种保存方法,一般不含糖,不用液体。

324. 真菌,霍乱弧菌,铜绿假单胞菌及粪碱需在室温保存,而脑膜炎、淋球菌、初次分离的流感嗜血杆菌应保存于37℃。同时,每转种三代要鉴定一次。

325. AMS系统是目前微生物鉴定中最常用的自动化仪器。

326. 绝大部分致病性真菌属于半知菌亚门。形态有单细胞和多细胞两种。

327. 真菌的基本结构:菌丝和孢子,鹿角状菌丝仅见于黄癣菌,假菌丝与真菌丝的主要区别是它壁两边有时交叉,是由孢子延长而来,

有性孢子有:卵生孢子,接合孢子,子囊孢子,担孢子。

无性孢子有:叶状,分生,孢子子囊。

328. 真菌最常用沙保弱氏培养基,最适温度22—28℃,最适PH5—6,培养4周以上,

329. 真菌菌落三型:酵母型,霉菌型。

可用10%氢氧化钾加热使标本透明。

330. 血清出芽试验有芽管出者为白念菌,念珠菌中仅白念菌产厚壁孢子,试管培养是真菌分离、传代、保存菌种最常用的方法。鉴定曲霉常用察氏琼脂,以烟曲霉菌居多。

331. 药敏实验:K—B法(半定量),公认的标准法,采用水解酪蛋白(M—H)琼脂,PH7.2,90mm内径,注入25—30ml琼脂,厚度为4mm,抗菌药片直径6.35mm,吸水量20微升。0.5麦氏比浊管相当于1.5X108/ml。校正后的菌液应在15分钟内接种。各药敏纸片间距不少于24mm,距平板内缘不小于15mm。

332. 对所有产ESBLS的菌株应报告耐所有青霉素,头孢类及氨曲南。

333. 自泌尿道分离的肠杆菌药敏试验不报氯霉素的敏感性。

334. 利福平不能单独用于化疗。至今还未发现产B—内酰胺酶的肺链。至今未发现肺链对万古的抑菌圈小于17mm。

335. 定量评价抗菌药物杀菌效力的试验:主要是最低杀菌浓度(MBC)和杀菌曲线。抑菌浓度指数(FIC),<0.5协同作用,0.5—1相加作用,1—2无关作用,>2拮抗作用。

336.目前院内感染主要是G-杆菌。

寄生虫学

337. 宿主分类:终宿主、中间宿主、储存或保虫宿主、转续宿主。

338. 寄生虫对宿主:夺取营养、机械损伤、化学毒、变应原作用。

339. 寄生虫流行特点:地方性、季节性、自然疫源性。

340. 土源性蠕虫不用中间宿主,而生物源性寄生虫要。

341. 蛔虫感染期2—3个月,成虫在小肠以空肠多。

342. 鞭虫寄生于肓肠生活史约一个月,人是唯一传染源。

343. 蛲虫寄生于回肓部。

344. 钩虫的丝状蚴为感染期,成虫在小肠部可致大粪毒、黄肿病、桑叶黄。钩虫病患者常用异食症。

345. 丝虫的丝状蚴寄生于大淋巴管或淋巴结内可致流火、象皮肿、乳糜尿。

346. 吸虫除血吸虫外都是雌雄同体。

347. 旋毛虫:成虫和幼虫在同一宿主,不用在外发育,但要转换宿主,被寄生的宿主又是中间宿主。致病分:侵入期,幼虫移行期,囊包形成期。检验以活组织检查最可靠,免疫学检验是临床最常用的方法。

348. 吸虫除血吸虫(圆柱状,雌雄异体,虫卵致病最重)外都是两侧对称,

349. 华枝睾吸虫(肝吸虫)卵最小,姜片虫虫卵最大,

350. 肺吸虫第一中间宿主为川卷螺,第二中间宿主为淡水石蟹。囊蚴是其感染期,致病分:脓肿期,包囊期,纤维瘢痕期。

351. 人是猪带绦虫唯一终宿主,猪或人是中间宿主。

352. 人是牛带绦虫唯一终宿主,只被成虫寄生。

353. 痢疾阿米巴生活史:包囊—小滋养体---包囊。

354. 杜氏利什曼虫:感染称为黑热病,分人源型(平原型)、犬源型(山丘型)、野生动物型(荒漠型),主要的控制传染措施是防治白蛉。

355. 阴道滴虫有4根前鞭毛和1根后鞭毛。

356. 隐孢子虫以空肠上端感染最重,是艾滋病主要死因之一。

实验室管理

误差是测定值与真值的差。

精密度是每次测定值与算术平均值的符合程度。

系统误差决定正确度,可以校正和设法消除增加次数不能减少。

随机误差决定精密度,不能修正,但可增加次数来减小。

含有过失误差的值为异常值。

有效数字按照:四舍六入五单双的原则。

质控品到实验室后有效期一年以上。

实验方法的评价:

重复性试验:考察候选方法的随机误差。

回收试验:主要用于确定比例误差。

干拢试验:衡量候选方法的准确度形成恒定系统误差。

国际通用真空采血管颜色标志:红色:普通血清管,橘红色:快速血清管(内含促凝剂),金黄色:惰性分离胶促凝管,绿色:肝素抗凝管,浅绿色:血浆分离管(肝素锂),黑色:枸椽酸钠血沉管,浅兰色:枸椽酸钠血凝管,紫色:EDTA抗凝管,灰色:草酸钾/氟化钠抗凝管(测血糖时常用)

LIS:实验室信息系统。

止血带压迫最好不过1分钟。

常用流动相的极性大小是:水>甲醇>乙醇>丙醇>正丁醇>乙酸乙酯>氯仿>乙醚>甲苯>四氯化碳>环已烷>石油醚。

离子选择电极测定的是离子活度,而不是离子浓度。

脑脊液中蛋白质少,测定用考马斯亮兰染料结合法(线性差,手工多用),邻苯三酚红钼络合显色法(线性好,多用自动分析)。


欢迎分享,转载请注明来源:优选云

原文地址:https://54852.com/hy/965776.html

(0)
打赏 微信扫一扫微信扫一扫 支付宝扫一扫支付宝扫一扫
上一篇 2023-07-26
下一篇2023-07-26

随机推荐

  • 梦妆苦橙维他命生机鲜活精华露怎么没吸管

    产品就不带吸管的,直接可以按出来。梦妆这个品牌很多人应该都不陌生,它是韩国最大化妆品公司之一旗下的品牌,专注以花草为灵感的妆、养产品,进入中国多年,凭借着高性价比深受消费者喜爱。精华基底是透明凝露,里面会有一些橙色果肉纤维一样的东西。气味就

    2023-12-14
    25000
  • 50多块兰蔻小黑瓶是真的吗能用吗

    是真的可以用。目前兰蔻小黑瓶更新到了第二代,其核心成分依旧是 二裂酵母发酵产物溶胞物 ,另外再搭配酵母提取物。说到发酵产物,其实很多护肤品都会用发酵产物,比如说SKII的pitera。所谓发酵就是利用微生物的代谢,将物质分解、转化成小分子,

    2023-12-14
    16700
  • 兰蔻金色殿堂香水怎么样兰蔻金色殿堂香水持久吗

    兰蔻金色殿堂香水怎么样,兰蔻的香水是不是不错的选择呢?下面就来跟大家做一个详细的介绍,想知道兰蔻的这款经典的香水究竟是不是好的产品,大家的口碑如何呢?马上告诉大家兰蔻金色殿堂香水怎么样香水采用了简装的包装,所以暂时没机会看到正装的包

    2023-12-14
    16800
  • dior男士护肤保湿乳液好还是精华好

    精华好用。男生使用精华液好,无论是女生还是男生都需要使用精华液,精华分子细腻,很好被皮肤吸收。很多人认为男孩子的皮肤比较粗糙,所以就不需要使用护肤产品,其实这种说法是不对的,就是因为粗糙才要使用护肤产品,改善肌肤最基本的问题,让肌肤焕发风采

    2023-12-14
    18300
  • 芭宝丽化妆品怎么样

    问题一:芭宝丽化妆品怎么样其是国内比较知名的化妆品品牌,不错的。问题二:芭宝丽护肤品怎么样没听说过问题三:多大年龄的人适合用芭宝丽化妆品30以后问题四:芭宝丽化妆品适合20用吗意大利PUPA,kiko

    2023-12-14
    23500
  • 国内化妆品一线品牌都有什么品牌

    国内护肤品一线品牌有宣致、标婷维、隆力奇、佰草集、自然堂、安安、相宜本草、羽西等。1、佰草集——民族品牌,中国第一套具有完整意义的现代中草药中高档个人护理品,以中草药添加剂为特色,秉承了中国美容经典的精髓,糅合中草药精华与现代生物科技的最新

    2023-12-14
    14300
  • 护肤品中的透明质酸钠有什么作用

    主要作用如下:1、提高药效性HA是构成人体细胞间质、眼玻璃体、关节滑液等结缔组织的主要成分,具有在体内发挥保水、维持细胞外空间、调节渗透压、润滑、促进细胞修复的特性。2、抗皱性皮肤的湿润水平与透明质酸含量密切相关,随着年龄的增长,皮肤中透明

    2023-12-13
    16600
  • BB霜是什么东西

    BB霜(BBCream) 就是BlemishBalmCream的缩写,是为了保护,安定和舒缓肌肤而研发的新型纯天然粉底。它是来自韩国,将修复、保湿、润色、控油一次完成,成为超人气商品。BB霜原来是对剥皮或美白(增白)后,受损和损伤的皮肤保护

    2023-12-13
    23100
  • 蜂蜡的作用与功效以及副作用

    蜂蜡,中药名,为蜜蜂科昆虫中华蜜蜂或意大利蜂分泌的蜡。将蜂巢置水中加热,滤过,冷凝取蜡或再精制而成。那么大家知道蜂蜡的主要功效有哪些接下来我带大家了解一下吧。蜂蜡的功效与作用 蜂蜡既可单独食用

    2023-12-13
    17200

发表评论

登录后才能评论
保存