怎么用细菌培养皿检测细菌

细菌和真菌的分布

作为自然界中微生物的细菌和真菌是我们肉眼看不见的，必须借助于一定的器械（显微镜），但是它们又是无处不在的。未了弄清楚它们的分布情况，特进行探究：

1、实验中要选取五套培养皿进行实验，一个做为对比，另外四个用来培养不同环境中的细菌，并且是在不同的环境中培养，以便得出细菌和真菌的生存条件。

2、实验所使用的培养皿要经过高温灭菌（让学生想一想是为什么），并且每一组的培养皿要在相同的环境条件下培养。也即是说要准备至少5套培养皿（每一个小组）。因为对比不同环境中的细菌与真菌的存在情况，是属于单因素比较，所以除了采样地点是变量外，进行微生物培养的条件等也要保持一致（温度、湿度等）。

3、经过高温处理后可以将培养皿上、培养基内混有的细菌或真菌的孢子等杀死（经过严格的高温灭菌的环境中是不可能有细菌和真菌存在的），这样就排除了实验外其他环境的污染。因此，在实验前不要盲目的打开培养皿，以防止细菌或真菌的孢子等落在培养基上，实验中用无菌棉棒的目的同样是为了防止棉棒上的微生物污染培养基。也就是说在接种的时候要注意污染。

4、在不同的环境中细菌的分布是不相同的，因此在采集菌种的时候要注意选择环境，做到要有一定的代表性。

5、接种好的培养基要放在特定的环境条件下进行培养。

（将对照组放在一定的环境中培养，将另外四组放在四个不同的环境中进行培养，以便研究细菌和真菌的生存条件，同时也可以思考我们在生活中用什么方法来防止细菌和真菌的污染；尤其是医院又以什么为标准来判断。）

6、在检测不同环境中的细菌和真菌时，每一个小组的成员要作好分工，以保证在规定的时间内做好观察与记录。同时也便于小组成员间的相互讨论以及小组之间的讨论。（分析细菌和真菌的生存环境，分布范围，多少等等）。

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种子带菌的检验方法：应用噬菌体检验种子是否带有病原细菌，是一种快速、简单易行的方法。此法常用于水稻白叶枯病细菌的检验。近年我国有关单位也用于水稻细菌性条斑病和玉米细菌性枯萎病细菌的检验。检测稻种携带白叶枯病菌、细菌性条斑病菌的方法与步骤是：供测定用的种子样品，应通过多点取样才有代表性，样品经充分混匀后随机称取50克。由于白叶枯病菌和噬菌体主要存在于颖壳内外，米粒上极少，故在进行种子检验时，一般只要测定颖壳即可。先将种子脱壳（用木砻脱壳或手工剥开）、磨碎（用磨碎机或剪碎），取6克左右放入研钵中，加入25毫升0.1%蛋白胨水，置水箱浸泡30分钟。取出滤液放入有刻度的离心管中，以每分钟4000转离心30分钟。吸出上清液，留下沉淀2毫升，连同管壁沉淀一并倒入装有小玻璃珠的小三角瓶中，振荡5分钟，使因离心而团聚的细菌分散。在三角瓶中加入0.2毫升（109pfu/ml）相应的噬菌体，置于30摄氏度恒温水浴锅中振荡，使其吸附10分钟。再加入2毫升相应噬菌体的抗血清（1:100倍，稀释倍数视抗血清效价而定），置恒温水浴锅中振荡、中和5分钟。到时间后，立即加入16毫升蛋白胨水稀释，以消除抗血清的作用。然后取稀释液5毫升分别放入5个培养皿，各加入新鲜浓指示菌1毫升，再倒入牛肉汁琼脂培养基，摇匀，冷凝后置于28摄氏度恒温箱中，进行平板培养，12小时后即可检查平板上的噬菌斑数（即活的细菌数）。

将所得对照和试验两组的噬菌斑数进行比较，假如检查液中二者的溶菌斑数相同，认为鉴定的样品中不存在病菌；如试验组的噬菌斑数比对照多，则认为有病原菌存在。

GB4789.3-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数》中的规定操作步骤：

1、乳糖发酵试验：样品稀释后，选择三个稀释度，每个稀释度接种三管乳糖胆盐发酵管。36±1℃培养48±2h，观察是否产气。

2、分离培养：将产气发酵管培养物转种于伊红美蓝琼脂平板上，36±1℃培养18-24h，观察菌落形态。

3、证实试验：挑取平板上的可疑菌落，进行革兰氏染色观察。同时接种乳糖发酵管36±1℃培养24±2h，观察产气情况。

SN0169-92《中华人民共和国进出口商品检验行业标准出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法》规定操作：

1、推测试验：样品稀释后，选择三个稀释度，每个稀释度接种三管LST肉汤。36±1℃培养48±2h，观察是否产气。

2、证实试验：将产气管培养物接种煌绿乳糖胆盐（BGLB）肉汤管中，36±1℃培养48±2h，观察是否产气。以BGLB产气为阳性。查MPN表，报告每ml(g)样品中大肠菌群的MPN值。

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扩展资料：

大肠菌群并非细菌学分类命名，而是卫生细菌领域的用语，它不代表某一个或某一属细菌，而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌，这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致。一般认为该菌群细菌可包括大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷白氏菌和阴沟肠杆菌等。

大肠菌群是作为粪便污染指标菌提出来的，主要是以该菌群的检出情况来表示食品中有否粪便污染。大肠菌群数的高低，表明了粪便污染的程度，也反映了对人体健康危害性的大小。

粪便是人类肠道排泄物，其中有健康人粪便，也有肠道患者或带菌者的粪便，所以粪便内除一般正常细菌外，同时也会有一些肠道致病菌存在，因而食品中有粪便污染，则可以推测该食品中存在着肠道致病菌污染的可能性，潜伏着食物中毒和流行病的威胁，必须看作对人体健康具有潜在的危险性。

参考资料来源：/baike.baidu.com/item/%E5%A4%A7%E8%82%A0%E8%8F%8C%E7%BE%A4/7324866?fr=aladdin#4"target="_blank"title="只支持选中一个链接时生效">百度百科-大肠菌群

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