pcr中为什么必须含有M g++离子

因为PCR聚合酶的活性需要Mg离子，所以为了提高酶的活性，就必须要加适量的Mg离子。

因为镁离子是TapDNA酶不可或缺的辅助因子，镁离子对于稳定核苷酸和稳定扩增体系，提高tapDNA聚合酶的活性十分重要。镁离子浓度过低使酶活力降低，过高使酶催化非特异性扩增。

镁离子是由镁原子失去最外层的两个电子得到的，书写为Mg_+。

pcr的缓冲液中为什么要有镁离子写回答

pcr的缓冲液中为什么要有镁离子

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因为镁离子是TapDNA酶不可或缺的辅助因子，镁离子对于稳定核苷酸和稳定扩增体系，提高tapDNA聚合酶的活性十分重要。镁离子浓度过低使酶活力降低，过高使酶催化非特异性扩增。

镁离子是由镁原子失去最外层的两个电子得到的，书写为Mg_+。

扩展资料：

人体对镁的需要：

镁是人体必需的矿物元素，因为镁在人体的含量较多，故被称为常量元素。正常成人身体内镁的总含量约25克，其中60%-65%存在于骨、齿，27%分布于软组织。镁主要分布于细胞内，细胞外液的镁不超过1%。

它的主要生理功能是：激活人体多种酶的活性；维护骨骼生长和神经肌肉的兴奋性；维护胃肠道和激素的功能。如果镁缺乏，对上述功能会发生影响，可导致血清钙下降；神经肌肉兴奋性亢进；

对血管功能可能有潜在的影响（有人报告低镁血症患者可有房室性早搏，房颤以及室速和室颤，半数有血压升高；可能是绝经后妇女骨质疏松症的一种危险因素；

也有研究表明镁耗竭可导致胰岛素抵抗（与糖尿病有关）。镁在粗粮、绿叶蔬菜和坚果中含量丰富，而肉类、淀粉食物和牛奶中镁的含量属中等。

PCR反应需要加镁离子，并且镁离子浓度的总量应该比dNTPs的浓度高，常用1.5mmol/L。

镁离子是加在PCR反应的缓冲液中的，成分是最复杂的，除水外一般包括四个有效成分：

1、缓冲体系，一般使用HEPES或MOPS缓冲体系；

2、一价阳离子，一般采用钾离子，但在特殊情况下也可使用铵根离子；

3、二价阳离子，即镁离子，根据反应体系确定，除特殊情况外不需调整；

4、辅助成分，常见的有DMSO、甘油等，主要用来保持酶的活性和帮助DNA解除缠绕结构。

缓冲液的目的是提供合适的酸碱度与某些离子，而PCR反应五要素是：引物(PCR引物为DNA片段，细胞内DNA复制的引物为一段RNA链）、酶、dNTP、模板和缓冲液（其中需要Mg2+）。

扩展资料：

标准的PCR过程：

1、DNA变性

在90℃-96℃下，双链DNA模板在热作用下，氢键断裂，形成单链DNA；

2、退火

在60℃-65℃下，系统温度降低，引物与DNA模板结合，形成局部双链；

3、延伸

在70℃-75℃下，在Taq酶（在72℃左右，活性最佳）的作用下，以dNTP为原料，从引物的3′端开始以从5′→3′端的方向延伸，合成与模板互补的DNA链。

每一循环经过变性、退火和延伸，DNA含量即增加一倍。现在有些PCR因为扩增区很短，即使Taq酶活性不是最佳也能在很短的时间内复制完成，因此可以改为两步法，即退火和延伸同时在60℃-65℃间进行，以减少一次升降温过程，提高了反应速度。

参考资料：百度百科-聚合酶链式反应

Mg离子的作用主要是

dNTP-Mg

与核酸骨架相互作用

并能影响Polymerase的活性，一般的情况下

Mg的浓度在0.5-5mM之间调整，同样要记住的是在调整了dNTPs的浓度后要相应的调整Mg离子的浓度

Mg2+离子浓度对PCR扩增效率影响很大，浓度过高可降低PCR扩增的特异性，浓度过低则影响PCR扩增产量甚至使PCR扩增失败而不出扩增条带。

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