细胞培养室的建立 一、建
细胞间的一些细节问题： 1、
甲醛薰蒸： 40％甲醛
溶液(药用规格、福建三明化工总厂出品)，用量30 ml／m3，室内温度21～24℃，相对湿度75％～85％，加热薰蒸使蒸汽弥漫全室，关闭门窗1 h。 甲醛水溶液为无色，具有强烈刺激性气味的液体，可杀灭多数微生物，价廉，熏蒸消毒时不损坏衣服、家具、皮革、橡胶等。市售的甲醛水溶液中一般含37－40%的甲醛。其主要用法为： （1）．熏蒸消毒: 对室内消毒其用量为20－25%毫升/米，在加热该溶液时最好同时煮沸一壶水，使室内相对温度保持在70-90%左右，室内温度最好在20摄氏度以上，作用时间12-24小时。如消毒皮毛服装，甲醛水溶液的用量可加至125毫升/米,挂衣密度为每平方米3套为宜。熏蒸消毒时应密闭门窗。消毒后一般多用自然通风驱散甲醛气体，其需时较长，急于排出气体，可将25%氨水加热蒸发中和。氨水用量为所用甲醛水溶液的一半，中和时间为30分钟。 （2）．自然挥发: 将较大量的甲醛水溶液放入一敞开容器中，室内温度保持在18摄氏度以上，同时室内喷水以保持相对湿度在70%以上，经16小时可达到室内消毒的目的。 关于甲酸、甲醛和甲醇三者的毒性比较：甲酸的毒性比甲醇大6倍，甲醛的毒性比甲醇大30倍。所以吃进4~10克甲醇，就能引起慢性中毒。它的毒性作用主要表现在损伤视力，使视力减退（不能矫正），视野缩小，以致双目失明，直到死亡。 2、关于紫外线： 紫外线的穿透能力非常弱的，主要靠电离产生氧自由基来消毒。细胞培养室里面一些不能照射紫外的物件可以用一般的材料盖住。如：玻璃和有机玻璃都可以的。紫外有些人认为大型精密的显微镜是不可以照紫外的，因为它们的镜头上涂的膜会被分解掉，但我特意问了我校光学系的老师，他们认为是没有关系的。 此外，不要担心紫外不能照射到的角落，因为紫外杀菌功能除了紫外本身以外，还可以由产生的臭氧来完成。 臭氧过量吸入的作用应该和双氧水的作用是一样的，个人认为也许有一定的致癌性。所以紫外灭菌以后，最好过一个小时再进去。 3、关于新洁尔灭： 【药品名称】苯扎溴铵溶液 (新洁而灭溶液) (乙类非处方药【别名】BenzalkoniumBromideSolution【标准来源】《中华人民共和国药典》2000年版。【性状】 无色或淡黄色的澄明液体芳香味极苦强力振摇能发生多量泡沫，遇低温可能发生浑浊或沉淀。【药物组成】每毫升含苯扎溴铵0.05克 (5%)。【作用类别】皮肤科用药品。【药理作用】苯扎溴铵为阳离子表面活性剂类广谱杀菌剂。【临床应用】用于皮肤黏膜和伤口的消毒。【用法用量】 外用，使用前应稀释即配即用。皮肤消毒使用0.1%溶液；创面黏膜消毒用0.01%溶液； 稀释方法：0.1%溶液：取本品一份，加纯化水或清水50份；0.01%溶液：取本品1份，加纯化水或清水500份。【注意事项】 l. 本品为外用消毒防腐药，不可内服。2. 不得用塑料或铝制容器贮存。3. 涂布部位如有灼烧感、瘙痒、红肿等，应停止用药，洗净。必要时向医师咨询。4. 低温时，可能出现混浊或沉淀，可置于温水中加温，振摇使溶解后使用。5. 儿童必须在成人监护下使用。【不良反应】偶见过敏反应。 【药物相互作用】 l. 不得与肥皂或其他合成洗涤剂并用。2. 局部消毒时勿与碘酊、高锰酸钾、双氧水、磺胺粉等并用。 3. 如正在使用其他药品，使用本品前请咨询医师或药师。【规格】500毫升﹕25克；100毫升﹕5克(5%)。【贮藏】避光，密封保存。 评论：在甲醛灭菌前，先用新洁尔来擦洗整个墙面，此外，平时地板灭菌也可以用它。新洁尔灭和酒精相比，最大的优点是便宜，因为新洁尔灭500ml只需5元，而且可以稀释50倍用，而同样量的酒精价格可能是新洁尔灭的几十倍。 二、培养准备时的一些问题： 1、多聚赖氨酸： 多聚赖氨酸溶液（Poly-L-Lysine Solution） Conc.: 0.1% w/v, in water Storage: 18-26℃ Thimerosal, 0.01%, added as preservative 多聚赖氨酸溶液是广泛应用的组织切片与玻片黏合剂，该多聚阳离子分子与组织切片上的阴离子相互作用会产生较强的黏合力。 适用组织学，免疫组织化学，冰冻切片，细胞涂片，原位杂交等使用的玻片的防脱片处理，以防实验操作过程中组织掉片。也可用于细胞培养，增加细胞贴壁能力。 [使用说明] 免疫学 操作步骤（可直接在玻片上涂布） 1． 灭菌的ddH2O 1:10稀释该多聚赖氨酸溶液。 2． 用之前将稀释的多聚赖氨酸溶液放在室内，使其温度到室温18-26℃ 3． 将玻片浸在稀释的多聚赖氨酸溶液5分钟。注意增加时间不会提高包被效果。 4．在60℃烘箱1小时干燥，或室温18-26℃过夜干燥待用。 [注意] 1． 每100mL已稀释的多聚赖氨酸溶液要包被的玻片40-90张， 超过90张片子将影响其黏合力。 2． 用之前的玻片必须保持清洁。必要时用含1% HCl的70%乙醇溶液来清洗。 3． 不要在用过的稀释液中加新的溶液。 4． 释过的多聚赖氨酸溶液要放在2-8℃，至少在3个月内是稳定的。 5． 用过的稀释液要过滤，若出现浑浊或长菌要丢弃。 2、洗液的一些问题： 重铬酸钾硫酸洗液 通常称为洗洁液或洗液，其成分主要为重铬酸钾与硫酸,是强氧化剂。 K2Cr2O7 4H2SO4 K2SO4 Cr2(SO4)3 3[O] 因其有很强的氧化力，一般有机物如血、尿、油脂等类污遗迹可被氧化而除净。事先将溶液稍微加热，则效力更强。新鲜铬酸洗液为棕红色，若使用的次数过多，重铬酸钾就被还原为绿色的铬酸盐，效力减小，此时可加热浓缩或补加重铬酸钾，仍可继续使用。 配方：稀洗液 重铬酸钾 10g 粗浓硫酸 200ml 水100ml 浓洗液 重铬酸钾 20g 粗浓硫酸 350ml 水40ml 配法：先取粗制重铬酸钾20g，放于大烧杯内，加普通水100ml使重铬酸钾溶解（必要时可加热溶解）。再将粗制浓硫酸（200ml）缓缓沿边缘加入上述重铬酸钾溶液中即成。加浓硫酸时须用玻璃棒不断搅拌，并注意防止液体外溢。若用瓷桶大量配制，注意瓷桶内面必须没有掉瓷，以免强酸烧坏瓷桶。配时切记，不能把水加于硫酸内（将因硫酸遇水瞬间产生大量的热量使水沸腾，体积膨胀而发生爆溅）。 使用时先将玻皿用肥皂水洗刷1～2次,再用清水冲净倒干,然后放入洗液中浸泡约2小时,有时还需加热,提高清洁效率。经洗液浸泡的玻皿，可先用自来水冲洗多次，然后再用蒸馏水冲洗1～2次即可。 附有蛋白质类或血液较多的玻皿，切勿用洗液，因易使其凝固，更不可对有如酒精、乙醚的容器用洗液洗涤。 洗液对皮肤、衣物等均有腐蚀作用，故应妥善保存。使用时带保护手套。为防止吸收空气中的水分而变质，洗液贮存时应加盖。注意： 洗液具有强烈的腐蚀性，接触皮肤后会，皮肤会变黄，2天后会脱一层皮。 3、氟尿嘧啶： 别名：5 氟尿嘧啶 英文名：Fluorouracil (5 FU)。作用与用途：本品为嘧啶类的氟化物，属于抗代谢抗肿瘤药，能抑制胸腺嘧啶核苷酸合成酶，阻断脱氧嘧啶核苷酸转换成胸腺嘧啶核苷核，干扰DNA合成。对RNA的合成也有一定的抑制作用。 操作：在神经元培养时可以用来抑制胶质的生长。 4、L-谷氨酰氨： 资料： 氨基酸是组成蛋白质的基本单位.不同种类的细胞对氨基酸的要求各异,但有几种氨基酸细胞自身不能合成,必须依靠培养液提供,这几种氨基酸称为必需氨基酸.其中谷氨胺是细胞合成核酸和蛋白质必需的氨基酸,在缺少谷氨酰胺时,细胞生长不良而死亡.因此,各种培养液中都有较大量的谷氨酰胺.但是,由于谷氨酰胺在溶液中很不稳定,应置于-20℃冰箱中保存,在使用前加入培养液内.已含谷氨酰胺的培养液在4℃冰箱中储存2周以上时,还应重新加入原来量的谷氨酰胺. 细胞培养实验室环境设计 1 实验室设计 细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响.细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响,要求工作环境清洁,空气清新,干燥和无烟尘.细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧,常规操作和封闭培养于一室,而洗刷消毒在另一室. 2 常用设施及设备 (1)超净工作台:也称净化工作台,分为侧流式,直流式和外流式三大类. (2)无菌操作间:一般由更衣间,缓冲间和操作间三部分组成.操作间放置净化工作台及二氧化碳培养箱,离心机,倒置显微镜等.缓冲间可放置电冰箱,冷藏器及消毒好的无菌物品等. (3)操作间:普通培养箱,离心机,水浴锅,定时钟,普通天平及日常分析处理物 (4)洗刷消毒间:烤箱,消毒锅,蒸馏水处理器及酸缸等. (5)分析间:显微镜,计算机及打印机等. 3 培养器皿 常用细胞培养器皿有培养瓶,培养板,培养皿等.常准备量是使用量的三倍.器皿应选择透明度 好,无毒,利于细胞粘附和生长的材料,常用一次性聚苯乙烯材料制品或中性硬度玻璃制品.常用的器皿有下面几种. (1)液体储存瓶:用于储存各种配制好的培养液,血清等液体,常用规格有500ml,250ml, 100ml等几种. (2)培养瓶:根据培养细胞种类要求不同培养瓶的形态各异,用于细胞传代培养的细胞要求瓶壁厚簿均匀,便于细胞贴壁生长和观察,瓶口要大小一致,口径一般不小于1cm,允许吸管伸入瓶内任何部位,规格有200ml,100ml,50ml,25ml,10ml等几种. (3)培养皿:用于开放式培养及其它用途.分直径30mm,60mm,120mm等几种. (4)吸管:常用的有长吸管和短吸管两类,长吸管也称刻度吸管.其改良后管上部有球型刻度称改良吸管,刻度吸管用于移动液体.常用1ml和10ml两种.短吸管也叫滴管,分弯头和直头两种. (5)离心管:离心管是细胞培养中使用最广泛的器皿,根据用途不同形态各样,常用于细胞培养的离心管有大腹式尖底离心管和普通尖底离心管两类.前者分别为50ml,30ml,15ml后者则多为10ml和5ml. (6)其它:如三角烧瓶,烧杯,量筒,漏斗,注射器等. 4 细胞培养温度 维持培养细胞旺盛生长,必须有恒定而适宜的温度.不同种类的细胞对培养温度要求也不同. 人体细胞培养的标准温度为36.5℃±0.5℃,偏离这一温度范围,细胞的正常代谢会受到影响,甚至死亡.培养细胞对低温的耐受力较对高温强,温度上升不超过39℃时,细胞代谢与温度成正比人体细胞在39-40℃1小时,即能受到一定损伤,但仍有可能恢复在40-41℃1小时,细胞会普遍受到损伤,仅小半数有可能恢复41-42℃1小时,细胞受到严重损伤,大部分细胞死亡,个别细胞仍有恢复可能当温度在43℃以上1小时,细胞全部死亡.相反,温度不低于0℃时,对细胞代谢虽有影响,但并无伤害作用把细胞放入25-35℃时,细胞仍能生存和生长,但速度减慢放在4℃数小时后,再回到37℃培养,细胞仍能继续生长.细胞代谢随温度降低而减慢.当温度降至冰点以下时,细胞可因胞质结冰受损而死亡.但是,如果向培养液中加入一定量的冷冻保护剂 (二甲亚砜或甘油),可在深低温下如-80℃或-196℃(液氮)长期保存. 5 合适的气体环境 气体是哺乳动物细胞培养生存必需条件之一,所需气体主要有氧气和二氧化碳.氧气参与三 羧酸循环,产生供给细胞生长增殖的能量和合成细胞生长所需用的各种成分.开放培养时一般把细胞置于95%空气加5%二氧化碳混合气体环境中.二氧化碳既是细胞代谢产物,也是细胞生长繁殖所需成分,它在细胞培养中的主要作用在于维持培养基的pH值.大多数细胞的适宜pH为7.2-7.4,偏离这一范围对细胞培养将产生有害的影响.但细胞耐酸性比耐碱性大一些,在偏酸环境中更利于细胞生长.但有一些细胞也喜欢偏碱环境中生长,如成纤维细胞最适合pH是7.4-7.6.每种细胞都有其最适pH值.
赫赛汀2017进医保。人力资源和社会保障部对外公布36种药品进入医保目录后的价格谈判结果，并同步确定了这些药品的医保支付标准，赫赛汀名列其中。经过谈判，每支药品支付标准降到7600元，降幅近七成。
被纳入《国家基本医疗保险、工伤保险和生育保险药品目录（2017年版）》乙类范围的药品，大多都是患者热盼的肿瘤靶向药，以及治疗心血管病、血友病等重大疾病的药品。与2016年平均零售价相比，谈判药品平均降幅达44%，最高降幅达70%。
扩展资料：
赫赛汀适应症：
转移性乳腺癌：本品适用于HER2过度表达的转移性乳腺癌：作为单一药物治疗已接受过1个或多个化疗方案的转移性乳腺癌；与紫杉醇或者多西他赛联合，用于未接受化疗的转移性乳腺癌患者。
乳腺癌辅助治疗：本品单药适用于接受了手术、含蒽环类抗生素辅助化疗和放疗（如果适用）后的HER2过度表达乳腺癌的辅助治疗。
转移性胃癌：本品联合卡培他滨或5-氟尿嘧啶和顺铂适用于既往未接受过针对转移性疾病治疗的HER2过度表达的转移性胃腺癌或胃食管交界腺癌患者。
曲妥珠单抗只能用于HER2过度表达的转移性胃癌患者，HER2过度表达的定义为使用已验证的检测方法得到的IHC3+或IHC2+/FISH+结果。
参考资料来源：人民网-药品准入首次“国家谈判” 医保直面药企“讨价还价”
百度百科-赫赛汀
一般的话靶向药物价格会更加贵一点，但是副作用要小很多。望采纳！
癌症治疗方法
（1）手术治疗。手术治疗是早、中期患者的最主要的治疗手段之一，给许多癌症患者带来长期生存的希望。如早期的食管癌、宫颈癌、乳腺癌患者的5 年治愈率已超过90%。即使中晚期患者经过手术也能大大提高治愈率，或者达到延长生存时间的目的。因此，每个癌症患者一经确诊，皆应该首先考虑是否有手术切除的可能性。
凡能手术治疗者，应及时采取手术治疗，莫失良机。癌瘤的手术分根治性和姑息性两类。根治性手术是指组织切除范围大于肿瘤，争取消除全部瘤组织（包括转移瘤）。
（2）放射治疗。放射源有同位素（镭、钴60、铯37 等）、X 线治疗机和粒子加速器（产生高能电子束、中子束等）。有外照射和内照射两类方法。外照射是指从体外一定距离来照射人体的某一个部位。内照射则是将放射性同位素放入特制容器中置留患者体中，或把某种放射性同位素口服或注射，被患者的病变部位所吸收，从而受到照射。
放射治疗可造成正常组织细胞的损害，产生一些副反应，如放射性肺炎、放射性食道炎、放射性肠炎、血细胞减少、胃肠反应等，一般在放疗停止后均能恢复。为了减轻放疗的不良反应，常配合养阴补肾、益气健脾的中药治疗。
（3）化学治疗。就是抗癌药物的治疗。对于中晚期的患者，癌肿的广泛转移，给手术、放疗造成困难，因此药物治疗就成为重要的手段，由于抗癌药物的发展及化疗方案的改进，治疗效果大大提高，使不少晚期癌症患者减轻症状延长生存时间。
抗癌药物按作用机制可分为五类。
①影响核酸合成的药物：如甲氨蝶呤、阿糖胞苷、氟尿嘧啶、巯基嘌呤等。
②影响蛋白质合成的药物：如长春新碱、门冬酰胺酶等。
③直接破坏DNA 的药物：如环磷酰胺、氮芥、丝裂霉素等。
④嵌入DNA 中干扰模板作用的药物：如阿霉素、柔红霉素、普卡霉素等。
⑤影响体内激素平衡的药物：如性激素、肾上腺皮质激素等。
（4）中药治疗。中药配合手术、放疗、化疗等治疗肿瘤，多采用调理培补之法。这既可改善全身状况，增强抗病能力，又可减轻副作用，提高疗效。中药治疗容易被老年患者所接受。
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