(1)精液保存 最常用的方法是常温保存,即在10~20℃或在接近于这一温度范围内保存精液。具体方法是:将稀释好的精液按一次的输精量(一般为20~30毫升)分装于小瓶内,要求装满塞严,以防振荡和产生气泡,瓶口周围加蜡封严,以隔绝空气并防止进水;然后,放在塑料袋内,把袋口扎紧,放进10~20℃的冷藏箱。没有冷藏箱的地方,也可用冷水或井水以及放在地窖里保存。通常有效保存时间48小时左右。如果原精液品质较好,稀释、保存等处理过程得当,则保存时间可达72小时。
(2)精液的运输 运输精液宜按上述方法分装后,包以毛巾、棉纱布或泡沫塑料等物,以免精液在运输过程中剧烈振荡,造成精子受伤、死亡。
外界温度在10℃以下或20℃以上时,应用广口保温瓶或保温箱运输。把精液瓶放在保温容器内,保温器内放入10~20℃的水,以保持精液所需的适宜贮存温度。要防止精液温度突然升高或降低。精液的运输时间要尽量缩短,最长运输时间不宜超过48小时。
精液保存是为了延长精子的存活时间,扩大精液的使用范围,便于长途运输。现行的精液保存方法,可分为常温(15—25℃)保存、低温(0—5℃)保存和超低温(-79~196℃)保存三种。前两者保存温度在0℃以上,以液态形式作短期保存,故称液态保存;后者保存温度低于0℃以下,以冻结形式作长期保存,也称冷冻保存。本书只介绍前两种方法。
1.常温保存 常温保存(15—25℃)是将精液保存在一定变动幅度的室温下,所以亦称变温保存或室温保存。常温保存所需的设备简单,便于普及推广,特别适宜于猪全份精液保存。
(1)原理 常温保存主要是利用一定范围的酸性环境抑制精子的活动,或用冻胶环境来阻止精子运动,以减少其能量消耗,使精子保持在可逆性的静止状态而不丧失受精能力。常温有利于微生物生长,因此,还要用抗菌物质抑制微生物对精子的有害影响。加入必要的营养和保护物质,隔绝空气,也会有良好作用。
(2)猪精液常温保存稀释液 公猪全份精液在15—20℃下保存效果最适宜,由于保存时间不同,稀释液可分不同种类。采精后立即输精的,可不稀释;1天内输精的,可用单一成分稀释液稀释;如果需要保存1—2天的,可用二成分稀释液稀释;如果需要保存3天以上的,可用IVT等综合稀释液稀释。
2.低温保存 各种家畜的精液都可进行低温保存,一般保存效果比常温保存时间长,但公猪精液则不如常温保存效果好。
(1)原理 低温保存主要是在抗冷剂的保护下,防止精子冷休克,缓慢降温至0-5℃保存,利用低温来抑制精子活动,降低代谢和能量消耗,抑制微生物生长,同时加入必要营养和其他成分,并隔绝空气,以达到延长精子存活时间的目的。因此,射出体外的精子,用低温保存,经一定期限,当温度回升后,又逐渐恢复正常代谢机能而不丧失受精能力,所以存活时间比体温(或常温)条件下显著延长。然而,猪精子对冷刺激,特别从体温急剧降温至10—0℃,会使精子发生不可逆的冷休克现象。因此,在稀释液中须添加如卵黄、奶类等抗冷休克物质,提高精子抗冷能力,并采用缓慢降温方法是必要的。
(2)猪精液低温保存稀释液 猪的浓份精液或离心后的精液,可在5-10℃下保存,所以也可进行低温(5-10℃)保存。
(3)降温速度 精子发生冷休克的敏感温度是10-0℃,为了免除冷休克的发生,降温速度采取缓慢降温方法:从30℃降至5-0℃时,每分钟降0.2℃左右为好,大约用1-2h完成降温全过程。
(4)保温处理 精液经低温保存稀释液稀释后,待降至室温即可进行分装,通常是按一个输精剂量分装至贮精瓶中。
分装后加盖密封,用数层纱布包缠精液容器,并裹以塑料袋防水,置于0-5℃低温环境中;也可将贮精瓶放入30℃温水的容器内,直接置于0-5℃低温环境中;约经1-2h。精液温度即降至0-5℃保存。保存期间,尽量维持温度恒定,防止升温。
(5)冷源 最理想的是使用冰箱;也可用冰块放入广口保温瓶内代替,将贮精瓶按上述方法处理,置于冰块之上,盖紧瓶盖,并每天补充冰块,以维持瓶内温度的恒定。如果没有冰源,也可用化学致冷法降温,或吊入水井深处保存。
(6)升温处理 低温保存的精液在输精前要进行升温处理。升温的速度对精子影响较小,故一般可将贮精瓶直接投入30℃温水中升温即可。
3.液态精液的运输 为了扩大公猪精液的利用,解决母猪不便到人工授精站配种的问题,杜绝疾病传播,进行猪群血液更新等等,精液运输就成为保证人工授精顺利进行不可缺少的一个环节。液态精液运输时应注意下列事项。
(1)按规定进行精液的稀释和保存。运输的精液,应附有详细说明书,标明站名、公猪品种和编号、采精日期、精液剂量、稀释液种类、稀释倍数、精子活率和密度等。
(2)包装应妥善严密,要有防潮、防震衬垫,包装工具可用精液保温箱、广口保温瓶、冰匣等。
(3)运输过程中,必须维持保存的温度,切忌温度变化。
(4)尽量避免在运输过程中剧烈震动和碰撞。
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