音叉(tuning fork)是呈“Y”形的钢质或铝合金发声器。
各种音叉可因其质量和叉臂长短、粗细不同而在振动时发出不同频率的纯音。音叉检查在鉴别耳聋性质——传音性聋或感音性聋方面，是一种简便可靠的常用诊查方法。
用音叉取“标准音”是钢琴调律过程中十分重要的环节之一。它的重要性在于关系到一台钢琴各键音处在什么音高位置上。
在教学中，音叉可以用来演示共振。
敲击音叉，采集声波波形图。试验发现：轻敲音叉，音叉振幅小，波形图的幅度小，这时音叉发出的声音也小；重敲音叉，音叉的振幅大，波形图的幅度大，这时音叉发出的声音也大。说明：响度跟音叉振动的振幅有关。振幅越大，响度越大；振幅越小，响度越小。
目前最常为音乐家使用的音叉，频率为440Hz。此音高长久以来就被作为乐团的调音标准，因为他同时为小提琴第二弦的音高以及中提琴第一弦及大提琴第一弦的高八度音高。不过市场上也有各种其他音高的音叉，如发出钢琴中央部基准组所有音高的音叉。
音叉在1711年由英国人约翰·朔尔（John Shore）发明。他是一位宫廷小号手，作曲家格奥尔格·弗里德里希·韩德尔及亨利·普赛尔皆曾在曲子中专门写下给他表演的段落。他还是一个鲁特琴手，鲁特琴非常难以调音，朔尔发明音叉来给鲁特琴调音。
音叉受到敲击后所发出的音符非常的微弱，常常只有拿到耳边才听得清楚。为此，有时在敲击后会将音叉压在如桌子等固体平面上，此举让这个平面有共振板的作用，大幅增加了音量。
音叉主要用于乐器调音，虽然电子调音器现已存在，而且一些音乐家拥有绝对音感。当音叉需要调音时，可以在两端分叉的部分做调整：磨短尖端的部分以频率调高或者修整两叉中间接合处以频率调低；或者调整两尖叉的重量。即便经过调音，音叉的频率仍会因为材料的弹性模数改变而受影响，为了使音叉发出准确的音高，仍应将其封存在温湿度控制良好的地方。大型的音叉通常由电力驱动，如同电铃，因此可不间断地震动。
首先，音叉频率是400Hz，而不是频度。Hz（赫兹）的单位是衡量频率的。不同的物体都有自己的固有频率，这个固有频率和物体的材质、形状、重量、等有密切关系，因此同样是音叉由于大小和形状的不同会有不同的固有频率，所以音叉的频率是400赫兹就说明这个音叉的固有频率是400赫兹，当然这是他的固有频率，他依然可以不按照这个频率震动，如果不按照这个频率震动就是受迫震动，受迫震动的震动频率就和固有频率没有关系了，这是的频率就取决于外界提供受迫震动的震源频率。另外，如果是受迫频率越接近固有频率音叉的振幅（也就是声音）也就越大。 达到固有频率时音叉就会产生共振。这就是为什么军队过桥时不会采用齐步或正步走的原因。
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