脂肪的检测和观察实验原理

脂肪检测方法可用索式提取法。

一、索式提取法（经典方法）

1、原理：

样品经前处理后，放入圆筒滤纸内，将滤纸筒置于索式提取管中，利用乙醚或石油醚在水浴中加热回流，使样品中的脂肪进入溶剂中，回收溶剂后所得到的残留物，即为脂肪（粗脂肪）采用这种方法测出游离态脂，此外还含有磷脂、色素、蜡状物、挥发油、糖脂等物质，所以用索氏提取法测得的脂肪为粗脂肪。

2、 适用范围与特点

索氏提取法适用于脂类含量较高，结合态的脂类含量较少，能烘干磨细，不宜吸湿结块的样品的测定。此法只能测定游离态脂肪，而结合态脂肪无法测出，要想测出结合态脂肪需在一定条件下水解后变成为游离态的脂肪方能测出。

二、实验操作流程

1、滤纸筒的制备

将滤纸剪成长方形8×375px ，卷成圆筒，直径为150px，将圆筒底部封好，最好放一些脱脂棉，避免向外漏样。

2、称取样品，将样品烘干磨细，称取一定量与纸筒封好上口，最好用测定水的样品。

3、索式抽提器的准备

索氏抽提器由三部分组成，回流冷凝管、提取管、提脂瓶组成。提脂瓶在使用前需烘干并称至恒重。其它要干燥。

4、抽提

将装好样的纸筒放入抽提管 ， 倒入乙醚，乙醚的量从提取管加入，加入的量为提取瓶体积的2/3 接上冷凝装置，在恒温水浴中抽提，水浴温度大约为55℃左右，可用滤纸检验，理论值抽提6-8小时，实际值3-4小时，但也根据样品性质来决定。

5、回收乙醚

当乙醚在提取管内即将虹吸时立即取下提取管，将其下口放到乙醚回收瓶内，使之倾斜，然后将提取瓶放到100-150℃烘箱烘至恒重。

6、计算

脂肪%= (W2-W1)/W x 100，W2——瓶和样品重（g）W1——瓶子重量（g） W——样品重量（g），或：脂肪%=（抽提后滤纸与样品重量—抽提前滤纸重量）/样品重量 × 100，滤纸筒应事先放入烧杯与100-105℃烘箱烘至恒重。

肥肉中主要含有脂肪，用苏丹Ⅲ检验。

肥肉的主要成分是脂肪（其中主要是饱和脂肪酸）

它好像“压缩饼干”那样，与瘦肉同样多的肥肉中，肥肉能够供给人体更高的热量。脂肪还含有人体需要的卵磷脂和胆固醇。

检验方法是用苏丹Ⅲ试剂：苏丹Ⅲ染色后，呈现橙黄色的脂肪滴。

扩展资料

苏丹Ⅲ(Sudan Ⅲ 或 Ⅳ) 能使木栓化,角质化的细胞壁及脂肪,挥发油,树脂等染成红色或橙红色.

脂肪和苏丹染液有比较强的亲和力，苏丹3遇脂肪变橘黄色。（即萃取原理）

适合用于生物脂肪材料的鉴定，可在光学显微镜下看到被染成橘黄色的小粒。

苏丹是鉴别脂肪的染液,苏丹III(IV)可以将脂肪染成橘黄色（红色）。

参考资料来源：百度百科-苏丹Ⅲ

1、材料的选取：

含脂肪量越高的组织越好，如花生的子叶。

2、步骤：

制作切片(切片越薄越好)将最薄的花生切片放在载玻片中央。

染色(滴苏丹Ⅲ染液2～3滴切片上→2～3min后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精)。

制作装片(滴1～2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片)。

镜检鉴定(显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒)。

---