RNA与DNA最重要的区别一是RNA只有一条链,二是它的碱基组成与DNA的不同,RNA没有碱基T(胸腺嘧啶),而有碱基U(尿嘧啶)。所以导致他们有以下性质上的不同。
1.两性解离:DNA无,只有酸解离,碱基被屏蔽(在分子内部形成了H键)。RNA有,有PI。
2.粘度大:DNARNA,粘度由分子长度/直径决定,DNA为线状分子,RNA为线团。
3.碱的作用:DNA耐碱RNA易被碱水解。
4.显色反应:
鉴别DNA和RNA+浓HCl
RNA
------→
绿色化合物
DNA
------→
蓝紫色化合物苔黑酚
二苯胺啡啶溴红(荧光染料)和溴嘧啶都可对DNA染色,原理是卡在分子中,DNA的离心和电泳显色可用它们。
DNA和RNA的鉴别染色
利用吖啶橙的变色特性可鉴别DNA和RNA。吖啶橙作为一种荧光染料已被用于染色固定,非固定细胞核酸,或作溶酶体的一种标记。观察死亡细胞荧光变色性变化以及区别分裂细胞和静止细胞群体。虽然测定DNA和RNA含量时较难获得好的重复性结果,但该方法已被许多实验室广泛采用。
5.溶解性:都溶于水而不溶于乙醇,因此,常用乙醇来沉淀溶液中的DNA和RNA。DNA溶于苯酚而RNA不溶,故可用苯酚来沉淀RNA。
6.紫外吸收:核酸的λm=260nm,碱基展开程度越大,紫外吸收就越厉害。当A=1时,DNA:50ug/ml,RNA和单链DNA:40ug/ml,寡核苷酸:20ug/ml。用A260/A280还可来表示核酸的纯度。
7.沉降速度:对于拓扑异构体(核苷酸数目相同的核酸),其沉降速度从达到小依次为:RNA
超螺旋DNA
>
解链环状DNA
松弛环状DNA
线形DNA也就是在离心管中最上层是线形DNA,最下面是RNA。
8.电泳:核苷酸、核酸均可以进行电泳,泳动速度主要由分子大小来决定,因此,电泳是测定核酸分子量的好方法。
9.DNA分子量测定最直接的方法:用适当浓度的EB(溴嘧啶)染色DNA,可以将其他形式的DNA变成线形DNA,用电镜测出其长度,按B-DNA模型算出bp数,根据核苷酸的平均分子量就可计算出DNA的分子量。
检举
回答人的补充
2009-08-30
07:59
高中生物只要知道:
DNA基本组成单位是
脱氧核苷酸
RNA基本组成单位是
核糖核苷酸
从组成上.
脱氧核苷酸是
一分子磷酸、一分子碱基、一分子脱氧核糖
核糖核苷酸是
一分子磷酸、一分子碱基、一分子核糖
每个碱基中只含
A
G
C
T
U中的一个.
这些就差不多了哈
电泳检测吧,28S、18S(真核)或者23S、16S(原核)条带清晰,无明显拖尾就表示RNA无明显降解,品质较好,反之则发生降解。有条件可以用2100生物分析仪检测,本质上还是电泳检测,但速度快,一次可以检测12个样品,峰图与胶图结合容易判断,而且可以定量,比Nanodrop定量准确DNA和RNA的鉴别,较常用的方法是利用两类核酸中不同的戊糖各自具备的不同的颜色反应,而得以定性鉴别.其中鉴定DNA的方法称为二苯胺法,鉴定RNA的方法称为地衣酚(苔黑酚,3,5-二羟基甲苯)法.上述颜色反应不但可用于两类核酸的定性鉴定,也是定糖法定量测定核酸的依据.欢迎分享,转载请注明来源:优选云