氨基酸纸层析的操作步骤

氨基酸纸层析的原理是什么 　　氨基酸纸层析的原理是什么

纸层析是氨基酸混合物生化分离鉴定的常用技术，可用于蛋白质中氨基酸成分的定性鉴定和定量测定。
纸层析是以滤纸为惰性载体的分配层析，其中吸附在滤纸纤维素上的水为固定相，用于铺展的有机溶剂为流动相。
层析时，将取样点放在离滤纸一端约2~3cm的地方，称为原点；然后在密闭容器中沿滤纸的一个方向铺展色谱溶剂，使混合氨基酸在两相中连续分布。结果，由于不同的分布系数(Kd),它们分布在滤纸的不同位置。
被分离物质在纸色谱图上的位置可以用流速(RF)来表示。【/br/】所谓Rf是指纸色谱中原点到氨基酸驻留点(也称色谱点)中心的距离(x)与原点到溶剂前沿的距离(y)之比:某种物质的Rf值在一定条件下是恒定的。
RF值与色谱滤纸的结构、性质、溶剂体系、温度、湿度、类型和质量等因素有关。

相关知识

1.色谱法(色谱法):是一种物理分离方法。
它利用混合物中各组分的物理化学性质的差异，使各组分不同程度地分布在两相中，其中一相为固定相(称为固定相)，另一相流经此固定相(称为流动相)并使各组分以不同的速度运动，从而实现分离。

2.几种常用的色谱方法

①吸附层析②离子交换层析③薄层层析④凝胶层析(凝胶过滤)⑤亲和层析

⑥分配色谱(适用于溶于水和有机溶剂的混合物)

当一种物质在两种不互溶的溶剂中振荡时，它将在两相中不均匀分布。
当达到平衡时，这种物质在两种溶剂中的浓度之比是一个常数，即分配系数。

如果混合物的组分在这两相中的分配系数相差很大，它们就可以被分离。

3.氨基酸的极性和结构。