干扰素测定是验什么

干扰素测定是验什么,第1张

干扰素检测试剂盒哪家好? 干扰素(IFN)是一类具有广谱抗病毒活性的蛋白质,仅在同种细胞上发挥作用。

根据其来源、理化及生物学性质的不同,可分为IFN-α、IFN-β、IFN-γ3种干扰素。

其中,IFN-α主要由白细胞产生,IFN-β由成纤维细胞产生,IFN-γ主要由T细胞在免疫应答中受到抗原或丝裂原活化后分泌产生。

3种干扰素中,IFN-α、IFN-β抗病毒作用较强,IFN-丁免疫调节作用较强。

目前已可用基因重组技术制备干扰素投入临床使用。

干扰素不能直接灭活病毒,其抗病毒作用是由于它能激活细胞内抗病毒蛋白基因,制造抗病毒蛋白,抑制病毒在体内**。

干扰素不仅可抑制已感染细胞内病毒的**,而且还可使未感染细胞处于抗病毒状态,对中断病毒的细胞间传播有一定作用;但对病毒整合基因可能仅有暂时抑制其mRNA的转录作用,不能清除病毒基因。

干扰素的免疫调节作用表现为它是重要的巨噬细胞活化因子(macro-phageactivatingfactor,MAF),活化的巨噬细胞能杀死病原微生物或杀伤肿瘤细胞。

干扰素能增强各种细胞表达MAF分子从而有利于递呈抗原或利于T细胞对靶细胞的识别和杀伤;还能促进T、B细胞的分化,活化NK细胞和中性粒细胞,从而有助于加强免疫应答。

由于干扰素不是一种淋巴细胞的生长因子,故常抑制淋巴细胞(特别是B细胞)的增殖。

IFN抗病毒活性的特点如下:①仅仅是抑制作用,IFN消失后病毒将重新**,因此必须足量反复应用;②有相对的种属特异性,IFN-γ较IFN-α、IFN-β严格;③IFN不直接灭活病毒,而是通过细胞基因组产生另一些蛋白因子来发挥效能,因此不同细胞对IFN的敏感性不同;④不同感染状态的病毒-细胞系统对IFN的敏感性不同,病毒大量**、引起细胞炎症应答时,IFN易产生效应;对完整细胞中的整合型病毒无作用。

[检测方法]ELISA法[方法学原理]抗人IFN抗体包被在微孔反应板上,待测标本和标准品中的IFN会与抗人IFN抗体结合,游离的成分被洗去,同时加入生物素化的抗人IFN抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。

生物素与亲和素特异结合,抗人IFN抗体与结合在单克隆抗体上的人IFN结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。

加入显色剂,若反应孔中有IFN,HRP会使五色的显色剂呈现蓝色,加终止液变黄色。

在波长450nm处测吸光度,IFN浓度与吸光度成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中的IFN浓度。

[标本准备]静脉血2ml,不抗凝。

[试剂)1.预包被微孔反应板2.浓缩酶结合物3.酶结合物稀释液4.标准晶和标本稀释液5.浓缩生物素化抗体6.TFN标准品7.浓缩洗涤液8.显色剂A、B9.终止液[仪器]酶标仪或全自动酶联免疫检测仪。

[检测步骤]1.

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