1、卫生许可证。如卫妆准字29(代表省份)-xk(代表许可)-1679(代表批号)
2、生产许可证。如xk16-1083529
3、执行标准。如AB-02,由厂方自己编号
4、如果是特殊类化妆品,应有特殊类化妆品批号。如QG(97)卫妆准字25(代表省份)-QG("特殊化妆品"标记)-07(代表类别)-0907(代表序号)
5、进口化妆品:1999年5月前批准的批号,如:(91)卫妆准字02(代表类别)-JK(代表进口)-0011号,1999年5月后批准的批号,如:卫妆进字(年份)第0000号进口化妆品分类号:01发用类02护肤类03美容修饰类04香水类
6、最后也是最重要的要检查生产日期和保质期,一般都在化妆品包装上有标注。
扩展资料:
保管化妆品的注意事项:
1、温度过高的地方不宜存放化妆品。因为高温会造成化妆品油水分离,膏体干缩,引起变质。
2、阳光或灯光直射处不宜存放化妆品。因为光线照射会造成化妆品水分蒸发,某些成分会失去活力,以致引起变质。阳光中的紫外线还能使化妆品中的一些物质发生化学变化,影响使用效果,甚至发生不良反应。
3、化妆品可放在冰箱的保鲜冷藏室保存,不能放在冷冻室保存。寒冷季节,不宜将化妆品放在室外或长时间随身携带到室外。因为冷冻会使化妆品发生冻裂现象,而且解冻后还会出现油水分离、质地变粗,对皮肤产生刺激作用。
阿达帕林不可以见灯光手机光。
阿达帕林化学结构稳定,在空气和阳光下不易分解。当反复暴露在阳光或紫外线辐射下时,阿达帕林在动物和患者中的安全性还不清楚,使用时应避免大量阳光和紫外线辐射,灯和手机灯不含紫外线,但阳光中含有紫外线。平时应注意清淡饮食,不吃辛辣食物。
阿达帕林(Adapalene),别名达芙文凝胶,是一种白色或类白色粉末的化学品。化学名称6-[3-(1-金刚烷基)-4-甲氧基苯基]-2-萘甲酸,分子式为C28H28O3,分子量为41252000,不溶于水或乙醇,略溶于四氢呋喃。
阿达帕林为皮肤科用药,临床上适用于以粉刺、丘疹和脓疱为主要表现的寻常型痤疮的皮肤治疗。亦可用于治疗面部、胸和背部的痤疮。
药物相互作用:
1、不宜同时使用其他有相似作用机制的药物(如维A酸等)。
2、不应与含硫、间苯二酚或水杨酸的制剂合用,且应在这类药物作用消退之后再开始应用本药。其他相互作用:与其他可使皮肤干燥或刺激皮肤的外用制剂(如药皂、清洁剂、有干燥作用的肥皂或化妆品及高浓度乙醇制剂、收敛剂、香料或石灰制剂等)合用时可增加局部刺激。
解决方法:
生产日期通常标注在化妆品瓶底或瓶身上。
1、不论是保养品或是彩妆品的保存期限,一律是三年它的批号有四码,只有前二码与制造日期有关:第一位代表生产年份,第二位是月份。例如,43xx 就是2010年11月,44xx就是 2010年12月,45xx就是 2011年1月,此次类推就行。而后二位批号无实意。
2、一般的化妆日期含义,日期主要看中间两位(第三和第四位),第一二位为:18,代表产地美国,第三位为:H,代表生产年份,H是2011年,G是2010年,F是2009年,E是2008年,到2012年是J(跳过I),2013年是K。2014年是L依次类推。
3、第四位为3,代表生产月份,是3月份。1-9表示1-9月份,10月、11月、12月用英文单词首字母来表示(10月October用O表示,11月November用N表示,12月December用D表示),第五六位为:OZ代表生产线。
扩展资料
使用方法
1、不要出现敏感现象,就换成整套敏感肌肤的专用保养品
因为这样很不安全,皮肤一旦过敏,就变得异常娇气,如果在此时更换一系列的化妆品的话,那容易给肌肤带来伤害。所以不要一次全部更换,可以从保养品最后程序的产品如晚霜或乳液开始换,逐渐全部换掉,也可以先停用带刺激性的产品,如含有酒精成分或果酸成分的产品。
2、当脸上长出很多痘痘,并不是皮肤没洗干净
如果你以为长那么多痘痘是因为皮肤没洗干净而加强清洁,那样容易更加刺激皮肤。痘痘可能是肌肤敏感的症状,或是因为压力而发的成人痘痘,这时要去看医生,而不能一味的猛擦治痘产品,或去角质或深层清洁,这些都会更加刺激皮肤。
3、不要把洗面乳直接抹在脸上搓洗
没搓起泡沫的洗面乳会紧紧地贴在皮肤表面,伤害皮脂膜。正确的方法是先加清水搓揉发泡,因为发泡后的洗洁剂才能发挥清洁效果,而且泡沫状比未发泡的乳状温和。洗脸时要先洗T字部位,两颊轻轻带过就用温水洗掉。
4、注意定时清洗粉扑
要知道不干净的化妆用具,会让肌肤很敏感,所以对化妆用具一定要进行清洗,因为补妆时脸上的油脂会被粉扑吸走,吸满油脂的粉扑与空气接触,正是细菌的最好繁殖地。用脏脏的粉扑不但不雅观,而且容易让肤质变得脆弱或长出痘痘。 一星期要清洗一次粉扑,用专用的清洗剂或温和香皂都可以,洗后用面巾纸按压吸水,再阴干。
选择化妆工具清洁剂须注意一定要选择专业清洁剂进行处理,日常生活中的彩妆使用频率偏高的以底妆为主,粉底比其他彩妆更加厚重也因此底妆工具更易滋生细菌。使用美化妆刷专用清洁液,喷洒于日常使用的毛刷头上,于软布来回擦拭至干净即可。
5、皮肤干痒,不要用滋润乳霜
因为浓稠粘腻的保养品,对敏感肌肤是负担,所以在皮肤感到又干又痒时千万别用。 太油太滋润的保养品,容易刺激敏感肌肤,而且也不容易吸收,选择“乳液”的质地比乳霜和精华液更适合敏感肌肤。
6、不要试图用粉去遮饰红红干干的皮肤
因为这可能是你的皮肤在发炎,而正在发炎的敏感肌肤要首先停止化妆。普通的化妆工具会加剧皮肤的发炎程度,刷蜜粉的同时须选择纯羊毛纯手工的粉刷,即使是敏感肌也能打造清透裸肌
参考资料化妆品_百度百科
化妆品生产批号查询方法:
1、查看口红的底部(其他化妆品护肤品也一般在瓶身和包装盒的底部展示),会有一串代码,这串代码就是口红的生产批号。
注意:每个产品只有唯一的一个生产批号。
2、打开化妆品生产批号查询工具进行查询。
3、输入化妆品品牌和对应的生产批号,就可以知道这个化妆品的生产日期和过期时间了。如果根据批号查询不到生产日期和过期日期,那么这个化妆品就是假货。
七分妆公司成品检验QA程序
一、检验程序
1 检查重量
使用电子称称净重(必须先除皮) 2 检查外观
产品外观实施瓶瓶全检,查看包装外表是否有脏点、污点、缺陷 3 化妆品标签
标签是否贴错/反/漏,标签是否有色差 4 抽样
抽样数量为5‟,抽样检查为微生物查验 5 留样
检验合格后每批产品留样数量应足够两次检验,并且在有效期内不得转移。
二、微检基本点
1 范围
本规范规定了化妆品微生物学检验总则。
本规范适用于化妆品样品的采集、保存、供检样品制备。
2 仪器和设备 21 天平。 22 高压灭菌器。 23 振荡器。 24 三角瓶。 25 玻璃珠。 26 玻璃棒。 27 刻度吸管。 28 研钵。 29 均质器。 210 恒温水浴箱。
211 采样用具:不锈钢勺,剪刀,开罐器等。
3 培养基和试剂 31 生理盐水 成分:氯化钠 蒸馏水加至
85g 1000 mL
溶解后,分装到加玻璃珠的三角瓶内,每瓶90mL,10343kPa(15 lb)20min高压灭菌。
32 SCDLP液体培养基 成分: 酪蛋白胨 大豆蛋白胨 氯化钠 磷酸氢二钾 葡萄糖 卵磷脂 吐温80 蒸馏水
17g 3g 5g 25g 25g 1g 7g 1000mL
制法:先将卵磷脂在少量蒸馏水中加温溶解后,再与其它成分混合,加热溶解,调pH为72~73,分装,10343kPa(15lb)20min高压灭菌。注意振荡,使沉淀于底层的吐温80充分混合,冷却至25℃左右使用。
注:如无酪蛋白胨和大豆蛋白胨,也可用多胨代替。 33 灭菌液体石蜡。 34 灭菌吐温80。
4 样品的采集及注意事项
41 所采集的样品,应具有代表性,一般视每批化妆品数量大小,随机抽取相应数量的包装单位。检验时,应分别从两个包装单位以上的样品中共取10g或10mL。包装量小于20g的样品,采样量应适量增加,其总量应大于16g。
42 供检验样品,应严格保持原有的包装状态,进口产品应为市售包装。容器不应有破裂,在检验前不得打开,防止样品被污染。
43 接到样品后,应立即登记,编写检验序号,并按检验要求尽快检验。如不能及时检验,样品应放在室温阴凉干燥处,不要冷藏或冷冻。
44 若只有一份样品而同时需做多种分析,如微生物、毒理、化学等,应先做微生物检验,再将剩余样品做其它分析。
45 在检验过程中,从打开包装到全部检验操作结束,均须防止微生物的再污染和扩散,所用采样用具、器皿及材料均应事先灭菌,全部操作应在无菌室内进行,或在相应条件下,按无菌操作规定进行。
5 供检样品的制备 51 液体样品
511 水溶性的液体样品,量取10mL加到90mL灭菌生理盐水中,混匀后,制成1:10检液。 512 油性液体样品,取样品10mL,先加5mL灭菌液体石蜡混匀,再加10mL灭菌的吐温80,在40℃~44℃水浴中振荡混合10min,加入灭菌的生理盐水75mL(在40℃~44℃水浴中预温),在40℃~44℃水浴中乳化,制成1:10的悬液。 52 膏、霜、乳剂半固体状样品
521 亲水性的样品,称取10g,加到装有玻璃珠及90mL灭菌生理盐水的三角瓶中,充分振荡混匀,静置15min。取其上清液作为1:10的检液。
522 疏水性样品,称取10g,放到灭菌的研钵中,加10mL灭菌液体石蜡,研磨成粘稠状,再加入10mL灭菌吐温80,研磨待溶解后,加70mL灭菌生理盐水,在40℃~44℃水浴中充分混合,制成1:10检液。
53 固体样品,称取10g,加到90mL灭菌生理盐水中,充分振荡混匀,使其分散混悬,静置后,取上清液作为1:10的检液。
如有均质器,上述水溶性膏、霜、粉剂等,可称10g样品加入90mL灭菌生理盐水,均质1min~2min;疏水性膏、霜及眉笔、口红等,称10g样品,加10mL灭菌液体石蜡,10mL灭菌吐温80,70mL灭菌生理盐水,均质3min~5min。
三、菌落总数
Aerobic Bacterial Count
1 范围
本规范规定了化妆品中菌落总数的检验方法。 本规范适用于化妆品菌落总数的测定。 2 定义
本规范采用下列定义
菌落总数(aerobic bacterial count)是指化妆品检样经过处理,在一定条件下培养后(如培养基成分、培养温度、培养时间、pH值、需氧性质等),1g(1mL)检样中所含菌落的总数。所得结果只包括一群本方法规定的条件下生长的嗜中温的需氧性菌落总数。
测定菌落总数便于判明样品被细菌污染的程度,是对样品进行卫生学总评价的综合依据。
3 仪器和设备 31 三角瓶。 32 量筒。
33 pH计或精密pH试纸。 34 高压灭茵器。 35 试管。
36 平皿: 直径9cm。
37 刻度吸管: 10mL、2mL、1mL。 38 酒精灯。 39 恒温培养箱。 310 放大镜。
4 培养基和试剂
41 生理盐水:见总则中31。 42 卵磷脂、吐温80—营养琼脂培养基 421 成分: 蛋白胨 牛肉膏 氯化钠 琼脂 卵磷脂 吐温80 蒸馏水
20g 3g 5g 15g 1g 7g 1000mL
422 制法:先将卵磷脂加到少量蒸馏水中,加热溶解,加入吐温80,将其他成分(除琼脂外)加到其余的蒸馏水中,溶解。加入已溶解的卵磷脂、吐温80,混匀,调pH值为 71~74,加入琼脂,10343kPa(15 lb)20min高压灭菌,储存于冷暗处备用。 43 05%氯化三苯四氮唑(2,3,5-triphenyl terazolium chloride,TTC) 成分: TTC 05g
蒸馏水 100mL
溶解后过滤,10343kPa(15 lb)20min高压灭菌,装于棕色试剂瓶,置4℃冰箱备用。 5 操作步骤
51 用灭菌吸管吸取1:10稀释的检液2mL,分别注入到两个灭菌平皿内,每皿1mL。另取1mL注入到9mL灭菌生理盐水试管中(注意勿使吸管接触液面),更换一支吸管,并充分混匀,制成1:100检液。吸取2mL,分别注入到两个灭菌平皿内,每皿1mL。如样品含菌量高,还可再稀释成1:1000,1:10000,„„等,每种稀释度应换1支吸管。
52 将融化并冷至45℃~50℃的卵磷脂吐温80营养琼脂培养基倾注到平皿内,每皿约15mL,随即转动平皿,使样品与培养基充分混合均匀,待琼脂凝固后,翻转平皿,置37℃培养箱内培养48h。另取一个不加样品的灭菌空平皿,加入约15mL卵磷脂吐温80营养琼脂培养基,待琼脂凝固后,翻转平皿,置37℃培养箱内培养48h,为空白对照。
53 为便于区别化妆品中的颗粒与菌落,可在每100mL卵磷脂吐温80营养琼脂中加入1mL05%的TTC溶液,如有细菌存在,培养后菌落呈红色,而化妆品的颗粒颜色无变化。
6 菌落计数方法
先用肉眼观察,点数菌落数,然后再用放大5~10倍的放大镜检查,以防遗漏。记下各平皿的菌落数后,求出同一稀释度各平皿生长的平均菌落数。若平皿中有连成片状的菌落或花点样菌落蔓延生长时,该平皿不宜计数。若片状菌落不到平皿中的一半,而其余一半中菌落数分布又很均匀,则可将此半个平皿菌落计数后乘以2,以代表全皿菌落数。
7 菌落计数及报告方法
71 首先选取平均菌落数在30~300个之间的平皿,作为菌落总数测定的范围。当只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时,即以该平皿菌落数乘其稀释倍数(见表1中例1)。 72 若有两个稀释度,其平均菌落数均在30~300个之间,则应求出两菌落总数之比值来决定,若其比值小于或等于2,应报告其平均数,若大于2则报告其中稀释度较低的平皿的菌落数(见表1中例2及例3)。
73 若所有稀释度的平均菌落数均大于300个,则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表1中例4)。
74 若所有稀释度的平均菌落数均小于30个,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表1例5)。
75 若所有稀释度的平均菌落数均不在30~300个之间,其中一个稀释度大于300个,而相邻的另一稀释度小于30个时,则以接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表1中例6)。
76 若所有的稀释度均无菌生长,报告数为每g或每mL小于10CFU。
77 菌落计数的报告,菌落数在10以内时,按实有数值报告之,大于100时,采用二位有效数字,在二位有效数字后面的数值,应以四舍五入法计算。为了缩短数字后面零的个数,可用10的指数来表示(见表1报告方式栏)。在报告菌落数为“不可计”时,应注明样品的稀释度。
表1 菌落计数结果及报告方式
四、粪大肠菌群
Fecal Coliforms
1 范围
本规范规定了化妆品中粪大肠菌群的检验方法。 本规范适用于化妆品中粪大肠菌群的检验。 2 定义
本规范采用下列定义
粪大肠菌群(Fecal coliforms)系一群需氧及兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌,在445℃培养24h~48h能发酵乳糖产酸并产气。
该菌来自人和温血动物粪便,是重要的卫生指示菌。 3 仪器
31 恒温水浴箱或隔水式恒温箱:44℃±05℃。 32 温度计。 33 显微镜。 34 载玻片。 35 接种环。 36 电炉。 37 三角瓶。 38 试管。 39 小倒管。
310 pH计或pH试纸。 311 高压灭茵器。
312 刻度吸管:10mL、2mL、1mL。 313 平皿。
4 培养基和试剂 41 双倍乳糖胆盐培养基 成分: 蛋白胨 猪胆盐 乳糖
04%溴甲酚紫水溶液 蒸馏水
40g 10g 10g 5mL 1000mL
制法:将蛋白胨、胆盐及乳糖溶解于蒸馏水中,调pH到74,加入04%溴甲酚紫水溶液5mL,混匀,分装试管(每支试管中加一个小倒管)。6895kPa (10 lb)20min灭菌。 42 伊红美兰(EMB)琼脂 成分: 蛋白胨 乳糖 磷酸氢二钾
10g 10g 2g
琼脂
2%伊红水溶液 05%美蓝水溶液 蒸馏水
20g 20mL 13mL 1000mL
制法:先将琼脂加到900mL蒸馏水中,加热溶解,然后加入磷酸氢二钾、蛋白胨,混匀,使之溶解。再以蒸馏水补足至1000mL。校正pH值为72~74,分装于三角瓶内,10343kPa(15 lb)15min高压灭菌备用。临用时加入乳糖并加热融化琼脂。冷至60℃左右无菌操作加入灭菌的伊红美蓝溶液,摇匀。倾注平皿备用。 43 蛋白胨水(作靛基质试验用) 成分: 蛋白胨(或胰蛋白胨) 氯化钠 蒸馏水 高压灭菌。 44 靛基质试剂
柯凡克试剂:将5g对二甲氨基苯甲醛溶解于75mL戊醇中,然后缓慢加入浓盐酸25mL。 试验方法:接种细菌于蛋白胨水中,于44±05℃培养24h。 沿管壁加柯凡克试剂03~05mL,轻摇试管。阳性者于试剂层显深玫瑰红色。
注:蛋白胨应含有丰富的色氨酸,每批蛋白胨买来后,应先用已知菌种鉴定后方可使用。 45 革兰氏染色液: 451 染液制备 4511 结晶紫染色液: 结晶紫 95%乙醇 1%草酸铵水溶液 4512 革兰氏碘液: 碘 碘化钾 蒸馏水加至 300mL。
4513 脱色液:95%乙醇。 4514 复染液: a 沙黄复染液: 沙黄 95%乙醇 蒸馏水
将沙黄溶解于乙醇中,然后用蒸馏水稀释。
b 稀石碳酸复红液:称取碱性复红10g,研细,加95%乙醇100mL,放置过夜,滤纸过滤。取该液10mL,加5%石碳酸水溶液90mL混合,即为石碳酸复红液。再取此液10mL加水90mL,即为稀石碳酸复红液。
20g 5g 1000mL
制法:将上述成分加热融化,调pH值为70~72,分装小试管,10343kPa(15 lb)15min
1g 20mL 80mL
将结晶紫溶于乙醇中,然后与草酸铵溶液混合。
1g 2g 300mL
将碘与碘化钾先进行混合,加入蒸馏水少许,充分振摇,待完全溶解后,再加蒸馏水至
025g 10mL 90mL
452 染色法
4521 将涂片在火焰上固定,滴加结晶紫染色液,染1min,水洗。 4522 滴加革兰氏碘液,作用1min,水洗。
4523 滴加95%乙醇脱色,约30s,或将乙醇滴满整个涂片,立即倾去,再用乙醇滴满整个涂片,脱色10s,水洗。
4524 滴加复染液,复染1min,水洗,待干,镜检。 453 染色结果
革兰氏阳性菌呈紫色,革兰氏阴性菌呈红色。
注:如用1:10稀释石碳酸复红染色液作复染,复染时间仅需10s。
5 操作步骤
51 取10mL 1:10稀释的检液,加到10mL双倍浓度的乳糖胆盐培养基中,置44℃±05℃培养箱中培养24h~48h,如不产酸也不产气,则报告为粪大肠菌群阴性。
52 如产酸产气,划线接种到伊红美蓝琼脂平板上,置37℃培养18 h~24 h。同时取该培养液1~2滴接种到蛋白胨水中,置44℃±05℃培养24h。
经培养后,在上述平板上观察有无典型菌落生长。粪大肠菌群在伊红美蓝琼脂培养基上的典型菌落呈深紫黑色,圆形,边缘整齐,表面光滑湿润,常具有金属光泽。也有的呈紫黑色,不带或略带金属光泽,或粉紫色,中心较深的菌落,亦常为粪大肠菌群,应注意挑选。 53 挑取上述可疑菌落,涂片作革兰氏染色镜检。
54 在蛋白胨水培养液中,加入靛基质试剂约05mL,观察靛基质反应。阳性者液面呈玫瑰红色;阴性反应液面呈试剂本色。
6 检验结果报告
根据发酵乳糖产酸产气,平板上有典型菌落,并经证实为革兰氏阴性短杆菌,靛基质试验阳性,则可报告被检样品中检出粪大肠菌群。
五、绿脓杆菌
Pseudomonas Aeruginosa
1 范围
本规范规定了化妆品中绿脓杆菌的检验方法。 本规范适用于化妆品中绿脓杆菌的检验。 2 定义
本规范采用下列定义。
绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)属于假单胞菌属,为革兰氏阴性杆菌,氧化酶阳性,能产生绿脓菌素。此外还能液化明胶,还原硝酸盐为亚硝酸盐,在42℃条件下能生长。 该菌对人有致病力,可使伤处化脓,引起败血症等。 3 仪器
31 恒温培养箱:37℃、42℃。 32 三角瓶。 33 试管。 34 平皿。
35 刻度吸管:10mL、2mL、1mL。 36 显微镜。 37 载玻片。 38 接种针、接种环。 39 电炉。 310 高压灭茵器。
4 培养基和试剂 41 SCDLP液体培养基 见总则中32。
42 十六烷基三甲基溴化铵培养基 成分: 牛肉膏 蛋白胨 氯化钠
十六烷基三甲基溴化铵 琼脂 蒸馏水
lb)20min灭菌后,制成平板备用。 43 乙酰胺培养基 成分: 乙酰胺 氯化钠 无水磷酸氢二钾
10g 5g 139g 3g 10g 5g 03g 20g 1000mL
制法:除琼脂外,将上述成分混合加热溶解,调pH为74~76,加入琼脂,6895kPa (10
无水磷酸二氢钾 硫酸镁(MgSO4·7H2O) 琼脂 蒸馏水
073g 05g 20g 1000mL
酚红 0012g(12%溶液1mL)
制法:除琼脂和酚红外,将其它成分加到蒸馏水中,加热溶解,调pH为72,加入琼脂、酚红,10343kPa(15 lb)20min高压灭菌后,制成平板备用。 44 绿脓菌素测定用培养基 成分: 蛋白胨 氯化镁 硫酸钾 琼脂 甘油(化学纯) 蒸馏水
20g 14g 10g 18g 10g 1000mL
制法:将蛋白胨、氯化镁和硫酸钾加到蒸馏水中,加温使其溶解,调pH至74,加入琼脂和甘油,加热溶解,分装于试管内,6895kPa(10 lb)20min高压灭菌后,制成斜面备用。 45 明胶培养基 成分: 牛肉膏 蛋白胨 明胶 蒸馏水
3g 5g 120g 1000mL
制法:取各成分加到蒸馏水中浸泡20min,随时搅拌加温使之溶解,调pH至74,分装于试管内,经6895kPa(10 lb)20min灭菌后,直立制成高层备用。 46 硝酸盐蛋白胨水培养基 成分: 蛋白胨 酵母浸膏 硝酸钾 亚硝酸钠 蒸馏水
10g 3g 2g 05g 1000mL
制法:将蛋白胨和酵母浸膏加到蒸馏水中,加热使之溶解,调pH为72,煮沸过滤后补足液量,加入硝酸钾和亚硝酸钠,溶解混匀,分装到加有小倒管的试管中,6895kPa(10 lb)20min灭菌后备用。
47 普通琼脂斜面培养基 成分: 蛋白胨 牛肉膏 氯化钠 琼脂 蒸馏水
10g 3g 5g
15g 1000mL
制法:除琼脂外,将其余成分溶解于蒸馏水中,调pH为72~74,加入琼脂,加热溶解,分装试管,10343kPa(15 lb)20min高压灭菌后,制成斜面备用。
5 操作步骤
51 增菌培养:取1:10样品稀释液10mL加到90mL SCDLP液体培养基中,置37℃培养18h~24h。如有绿脓杆菌生长,培养液表面多有一层薄菌膜,培养液常呈黄绿色或蓝绿色。 52 分离培养:从培养液的薄膜处挑取培养物,划线接种在十六烷基三甲基溴化铵琼脂平板上,置37℃培养18h~24h。凡绿脓杆菌在此培养基上,其菌落扁平无定型,向周边扩散或略有蔓延,表面湿润,菌落呈灰白色,菌落周围培养基常扩散有水溶性色素,此培养基选择性强,大肠艾希氏菌不能生长,革兰氏阳性菌生长较差。
在缺乏十六烷基三甲基溴化铵培养基时也可用乙酰胺培养基进行分离,将菌液划线接种于平板上,放37℃培养24h,绿脓杆菌在此培养基上生长良好,菌落扁平,边缘不整,菌落周围培养基略带粉红色,其它菌不生长。
53 染色镜检:挑取可疑的菌落,涂片,革兰氏染色,镜检为革兰氏阴性者应进行氧化酶试验。
54 氧化酶试验:取一小块洁净的白色滤纸片放在灭菌平皿内,用无菌玻璃棒挑取绿脓杆菌可疑菌落涂在滤纸片上,然后在其上滴加一滴新配制的1%二甲基对苯二胺试液,在15s~30s之内,出现粉红色或紫红色时,为氧化酶试验阳性;若培养物不变色,为氧化酶试验阴性。 55 绿脓菌素试验:取可疑菌落2~3个,分别接种在绿脓菌素测定培养基上,置37℃培养24h,加入氯仿3mL~5mL,充分振荡使培养物中的绿脓菌素溶解于氯仿液内,待氯仿提取液呈蓝色时,用吸管将氯仿移到另一试管中并加入1mol/L的盐酸1mL左右,振荡后,静置片刻。如上层盐酸液内出现粉红色到紫红色时为阳性,表示被检物中有绿脓菌素存在。
56 硝酸盐还原产气试验:挑取可疑的绿脓杆菌纯培养物,接种在硝酸盐蛋白胨水培养基中,置37℃培养24h,观察结果。凡在硝酸盐蛋白胨水培养基内的小倒管中有气体者,即为阳性,表明该菌能还原硝酸盐,并将亚硝酸盐分解产生氮气。
57 明胶液化试验,取绿脓杆菌可疑菌落的纯培养物,穿刺接种在明胶培养基内,置37℃培养24h,取出放冰箱10min~30min,如仍呈溶解状时即为明胶液化试验阳性;如凝固不溶者为阴性。
58 42℃生长试验:挑取可疑的绿脓杆菌纯培养物,接种在普通琼脂斜面培养基上,放在41~42℃培养箱中,培养24h~48h,绿脓杆菌能生长,为阳性,而近似的荧光假单胞菌则不能生长。
6 检验结果报告
被检样品经增菌分离培养后,在分离平板上有典型或可疑菌落生长,经证实为革兰氏阴性杆菌,氧化酶及绿脓菌素试验皆为阳性者,即可报告被检样品中检出绿脓杆菌;如绿脓菌素试验阴性而液化明胶、硝酸盐还原产气和42℃生长试验三者皆为阳性时,仍可报告被检样品中检出绿脓杆菌。
六、金**葡萄球菌
Staphylococcus Aureus
1 范围
本规范规定了化妆品中金黄金色葡萄球菌的检验方法。 本规范适用于化妆品中金**葡萄球菌的检验。 2 定义
本规范采用下列定义
金**葡萄球菌(Staphylococcus aureus)为革兰氏阳性球菌,呈葡萄状排列,无芽胞,无荚膜,能分解甘露醇,血浆凝固酶阳性。
该菌是葡萄球菌中对人类致病力最强的一种,能引起人体局部化脓性病灶,严重时可导致败血症。
3 仪器和设备 31 显微镜。 32 恒温培养箱。 33 离心机。
34 刻度吸管: 1mL、5mL、10mL。 35 试管。 36 载玻片。 37 酒精灯。
4 培养基和试剂 41 SCDLP 液体培养基 见总则中32。 42 Baird Parker 氏培养基 成分: 胰蛋白胨 牛肉膏 酵母浸膏 丙酮酸钠 甘氨酸
氯化锂(LiCl·6H2O) 琼脂 蒸馏水
增菌剂的配制:30%卵黄盐水50mL与除菌过滤的1%亚碲酸钾溶液10mL混合,保存于冰箱内。
制法: 将各成分加到蒸馏水中,加热煮沸完全溶解,校正pH。分装每瓶95mL,10343kPa高压灭菌15min。临用时加热溶化琼脂培养基,每95mL加入预热至50℃的卵黄亚碲酸钾增菌
10g 5g 1g 10g 12g 5g 20g 950mL pH 70±02
剂5mL,摇匀后制成平板。培养基应是致密不透明的。使用前在冰箱贮存不得超过48h。 43 血琼脂培养基
成分: 营养琼脂 100mL 脱纤维羊血(或兔血) 10mL
制法:将营养琼脂加热融化,待冷至50℃左右无菌操作加入脱纤维羊血,摇匀,制成平板,置冰箱内备用。 44 甘露醇发酵培养基
成分: 蛋白胨 10g 氯化钠 5g 甘露醇 10g 牛肉膏 5g 02%麝香草酚蓝溶液 12mL 蒸馏水 1000mL
制法: 将蛋白胨、氯化钠、牛肉膏加到蒸馏水中,加热溶解,调pH74,加入甘露醇和指示剂,混匀后分装试管中,6895kPa(10 lb) 20min灭菌备用。 45 兔(人)血浆制备
取 38% 柠檬酸钠溶液,10343kPa(15 lb) 30min高压灭菌,1份加兔(人)全血4份,混匀静置;2000rpm~3000 rpm离心3min~5min。血球下沉,取上面血浆。 46 无菌液体石蜡。
5 操作步骤
51 增菌:取1:10 稀释的样品10mL接种到90mL SCDLP 液体培养基中,置37℃培养箱,培养24h。
52 分离:自上述增菌培养液中,取1~2接种环,划线接种在Baird Parker平板,如无此培养基也可划线接种到血琼脂平板,置37℃培养24h~48h。在血琼脂平板上菌落呈金**,大而突起,圆形,不透明,表面光滑,周围有溶血圈。在Baird Parker 平板上为圆形,光滑,凸起,湿润,直径为2mm~3mm,颜色呈灰色到黑色,边缘为淡色,周围为一混浊带,在其外层有一透明带。用接种针接触菌落似有奶油树胶的软度。偶然会遇到非脂肪溶解的类似菌落,但无混浊带及透明带。挑取单个菌落分纯在血琼脂平板上,置37℃培养24h。
53 染色镜检:挑取分纯菌落,涂片,进行革兰氏染色,镜检。金**葡萄球菌为革兰氏阳性菌,排列成葡萄状,无芽胞,无夹膜,致病性葡萄球菌,菌体较小,直径约为05μm~1μm。 54 甘露醇发酵试验:取上述分纯菌落接种到甘露醇发酵培养基中,在培养基液面上加入2mm~3mm 的灭菌液体石蜡,置37℃培养24h,金**葡萄球菌应能发酵甘露醇产酸。 55 血浆凝固酶试验:吸取1:4新鲜血浆05mL,放入灭菌小试管中,加入待检菌24h肉汤培养物05mL。混匀,放37℃恒温箱或恒温水浴中,每半小时观察一次,6h之内如呈现凝块即为阳性。同时以已知血浆凝固酶阳性和阴性菌株肉汤培养物及肉汤培养基各05mL,分别加入灭菌1:4 血浆05mL,混匀,作为对照。
6 检验结果报告
经增菌培养后,在分离平板上有典型或可疑菌落生长,经染色镜检,证明为革兰氏阳性葡萄球菌,并能发酵甘露醇产酸,血浆凝固酶试验阳性者,可报告被检样品检出金**葡萄球菌。
七、霉菌和酵母菌
Molds and Yeast Count
1 范围
本规范规定了化妆品中霉菌和酵母菌数的检测方法。 本规范适用于各种化妆品中霉菌和酵母菌的总数测定。 2 定义
本规范采用下列定义。
霉菌和酵母菌总数是指化妆品检样在一定条件下培养后,1g或1mL化妆品中所污染的活的霉菌和酵母菌菌落总数,藉以判明化妆品被霉菌和酵母菌污染程度及其一般卫生状况。 本方法根据霉菌和酵母菌特有的形态和培养特性,在虎红培养基上,置28℃培养72h,计算所生长的霉菌和酵母菌数。
3 仪器和设备
31 恒温霉菌培养箱:28℃。 32 振荡器。 33 天平。 34 三角瓶。 35 试管。 36 试管架。
37 平皿:直径90mm。
38 刻度吸管:1mL、2mL、10mL。 39 量筒。 310 酒精灯。 311 高压灭菌器。
4 培养基和试剂
41 生理盐水 见总则中31。 42 虎红(孟加拉红)培养基
成分: 蛋白胨 5g 葡萄糖 10g 磷酸二氢钾 1g 硫酸镁(含7H2O) 05g 琼脂 20g 1/3000虎红溶液 100mL (四氯四碘荧光素)
蒸馏水 1000mL 氯霉素 100mg
制法: 将上述前5种成分加入蒸馏水中溶解后,再加入虎红溶液。分装后,10343kPa(15
lb)20min高压灭菌。另用少量乙醇溶解氯霉素,过滤除菌后,加入培养基中,若无氯霉素,可用链霉素代替,每1000mL培养基加链霉素30mg。
5 操作步骤
51 样品稀释 见菌落总数测定中61。
52 取1:10的检液2mL分别注入2个灭菌平皿内,每皿1mL(若菌量较多时可顺序再做10倍稀释),另取1个灭菌空平皿(作空白对照),每皿分别注入融化并冷至45℃左右的虎红培养基约15mL,充分摇匀。凝固后,翻转平板,置28℃培养箱,培养72h,计数平板内生长的霉菌和酵母菌数。若有霉菌蔓延生长,为避免影响其它霉菌和酵母菌的计数时,于48h应及时将此平板取出计数。
53 计算方法:先点数每个平板上生长的霉菌和酵母菌菌落数,求出每个稀释度的平均菌落数。判定结果时,应选取菌落数在5~50个范围之内的平皿计数,乘以稀释倍数后,即为每g(或每mL)检样中所含的霉菌和酵母菌数。其它范围内的菌落数报告应参照菌落总数的报告方法报告之。
54 每g(或每mL)化妆品含霉菌和酵母菌数以CFU/g(mL)表示。
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关于批号:
批号由生产产地+生产年份+天数+截止日期组成。
生产地:以数字‘2’开头的,表示在苏州生产的,以‘9’开头的,表示在上海生产的
,且一般用于内销;
关于生产年份:
A代表04年
B代表05年
C代表06年
D代表07年
E代表08年
巴黎欧莱雅 你值得拥有!谢谢!
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