什么是酶联免疫法?

什么是酶联免疫法?,第1张

酶联免疫法是将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测定方法,即酶联免疫吸附测定法。基本原理是使抗原抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。

酶联免疫法别称

ELISA,ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应,用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。

再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例,加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。

扩展资料;

用于临床检验的酶联免疫法检验;双抗体夹心法测抗原法,在临床检验中,此法适用于检验各种蛋白质等大分子抗原,例如HBsAg、HBeAg、AFP、hCG等。只要获得针对受检抗原的特异性抗体,就可用于包被固相载体和制备酶结合物而建立此法。

如抗体的来源为抗血清,包被和酶标用的抗体最好分别取自不同种属的动物。如应用单克隆抗体,一般选择两个针对抗原上不同决定簇的单抗,分别用于包被固相载体和制备酶结合物。这种双位点夹心法具有很高的特异性,而且可以将受检标本和酶标抗体一起保温反应,作“一步法”检测。

双抗体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子抗原,但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原,因其不能形成两位点夹心。

参考资料;搜狗百科--酶联免疫法

OD是optical density(光密度)的缩写,表示被检测物吸收掉的光密度,是检测方法里的专有名词,检测单位用OD值表示,1OD=1og(1/trans),其中trans为检测物的透光值。

光通过被检测物,前后的能量差异即是被检测物吸收掉的能量,特定波长下,同一种被检测物的浓度与被吸收的能量成定量关系。

扩展资料:

利用郎伯-比耳定律来测定溶液浓度和进行元素分析的仪器还有光谱仪(红外线、微波、紫外线、X射线),其中原子类的光谱仪又分为原子发射光谱仪和原子吸收光谱仪,原子发射光谱仪根据激发机理不同,原子发射光谱有3种类

1、原子的核外光学电子在受热能和电能激发而发射的光谱,通常所称的原子发射光谱法是指以电弧、电火花和电火焰(如ICP等)为激发光源来得到原子光谱的分析方法。

以化学火焰为激发光源来得到原子发射光谱的,专称为火焰光度法。

2、原子核外光学电子受到光能激发而发射的光谱,称为原子荧光(见原子荧光光谱分析)。

3、原子受到X射线光子或其他微观粒子激发使内层电子电离而出现空穴,较外层的电子跃迁到空穴,同时产生次级X射线即X射线荧光(见X射线荧光光谱分析)。

火焰原子吸收分光光度法测定大多数金属元素的相对灵敏度为1.0×10-8~1.0×10-10g·mL-1,非火焰原子吸收分光光度法的绝对灵敏度为1.0×10-12~1.0×10-14g。

这是由于原子吸收分光光度法测定的是占原子总数99%以上的基态原子,而原子发射光谱测定的是占原子总数不到1%的激发态原子,所以前者的灵敏度和准确度比后者高的多。

参考资料:百度百科-光密度


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