血液检查_备孕

血液检查是女性在怀孕前应该要做的检查项目之一，血液检查最简单的是做血液检验，血常规是最基本的血液检验，通过血液检测能对女性的肝功能、肾功能、血压、血脂、血糖等多方面进行较全面的了解，实现安全备孕。

血常规

什么是血常规？血常规检查是临床上最基础的化验检查之一。血常规检查项目包括红细胞、白细胞、血红蛋白及血小板数量等。血常规用针刺法采集指血或耳垂末梢血，经稀释后滴入特制的计算盘上，再置于显微镜下计算血细胞数目。血常规化验单上的常用符号是：RBC代表红细胞，WBC代表白细胞，Hb代表血红蛋白（血色素），PLT代表血小板。

尿常规和血常规

肾功能检查

肾功能检查是为了了解肾功能情况而做的一些针对性检查，常规项目为血液化验，包括肾功三项（肌酐、尿酸、尿素氮）。如有需要，还可通过尿液检查或肾脏B超来辅助判断。

发生肾损伤的早期，多数患者可完全没有症状或者症状较为轻微，容易被人忽略。但随着病情的进展，可逐渐出现不同程度的各种症状，比如疲劳、乏力，眼睑、颜面或下肢浮肿等等。及早的肾功能检查可以发现问题，不至于肾脏不可逆的损害，甚至发展为尿毒症。因此，出现以上症状者或糖尿病、高血压患者，都应该每年定期进行肾功能检查。

肝功检查

什么是肝功能检查？肝功能反映肝脏的生理功能，肝功检查的目的是为了检查肝脏有无疾病、肝脏损害程度以及查明肝病原因、判断预后和鉴别发生黄疸的病因等。肝功检查常选择几种有代表性的指标来了解肝功能，如蛋白质代谢功能试验、胆红素代谢功能试验、肝脏染料排泄试验以及各种血清酶检查，包括胆红素、白蛋白、球蛋白、转氨脢、胆道酵素、血清氨、凝血酶时间等。

血压检查

血压检查是体检常规检查项目，测量出的血压值是衡量人体健康情况的一个重要基础性指标。

血压的波动能够实时地反应人体健康状况。如果血压异常升高，应注意是否有高血压综合征的可能，若女性孕期患高血压，可能会影响胎儿的发育成长，严重威胁着母婴健康。如果数值为血压降低，则要分辨降低的数值是否在正常范围内，非正常情况下的长期低血压可致使人体休克或可造成孕后胎儿宫内窘迫综合征。

需要提醒的是，如果女性在平时就已经有头晕头痛、胸闷或明显乏力水肿、体重短时间内明显增加等症状时，应及早进行血压检查，查明原因。如是血压超过正常范围则需就诊。

血脂检查

孕妇在怀孕期间受激素或者饮食的影响，容易引起高血脂。血脂过高会加重肝脏的负担，从而诱发其他的孕期并发症，因此需要进行血脂检查来预防高血脂对孕妇自身和胎儿的伤害。血脂检查结果怎么看？血脂正常值具体如下：

1、TC总胆固醇

正常范围在5.23—5.69毫摩尔/升。2007年《中国成人血脂异常防止指南》确定中国人TC参考区间：合适范围：低于5.18毫摩尔∕升（200毫克∕分升）；边缘升高：5.18-6.19毫摩尔∕升（200-239毫克∕分升）；升高：高于6.22毫摩尔∕升（240毫克∕升）。

2、TG甘油三酯

正常范围差异较大，在0.5-1.7毫摩尔/升。

3、HDL-C高密度脂蛋白胆固醇

正常范围是大于1.00毫摩尔/升。

4、LDL-C低密度脂蛋白胆固醇

范围是低于3.12毫摩尔/升。

5、Lp（a）脂蛋白

健康成人血清中浓度小于300毫克/升。

6、PL磷脂

在肝脏合成最活跃，主要由胆汁和肠分泌，自粪便中排出。磷脂还是构成细胞膜的重要成分。正常范围在1.3—3.2毫摩尔/升。

7、FFA游离脂肪酸

正常情况下，在血中含量极微，而且易受各种生理和病理变化的影响。因此，不能凭一次检测结果来评判，要作连续的动态观测。正常范围在0.4—0.9毫摩尔/升。

8、PPD小而密低密度脂蛋白

正常范围：A型：大于25.5nmB型：小于25.5nm.。

9、9Apo（A）Ⅰ载脂蛋白AⅠ

正常范围：2007年《中国成人血脂异常防止指南》确定中国人其参考区间：1.20-1.60g ∕ L。

10、10Apo（B）载脂蛋白B

正常范围：0.80-1.10g ∕ L。

11、Apo（E）载脂蛋白E

正常范围：0.03-0.06g ∕ L。

血糖检查

血糖检查是通过查血的方式进行检查，通过了解血糖标准值是多少，从而知道孕妇是否有血糖过高或过低的情况，及时给予相应的生活指导，帮助孕妇和胎儿健康度过孕期。那么血糖正常值是多少？

1、孕妇空腹：不超过5.1mmol/L。

2、孕妇餐后1小时：餐后1小时血糖值一般用于检测孕妇糖尿病检测中，权威数据表明孕妇餐后1小时不得超过10.0mmol/L才是血糖的正常水平。

3、孕妇餐后2小时：餐后正常血糖值一般规定不得超过11.1mmol/L，而孕妇餐后2小时正常血糖值规定不得超过8.5mmol/L。

通过对血糖正常值的检测，了解血糖标准值有助于孕妇提高做好糖尿病防治。

糖尿病能怀孕吗

糖尿病能怀孕吗？糖尿病可以怀孕，但糖尿病妈妈要监控血糖水平，做好产检。大部分的妊娠糖尿病不需要使用胰岛素来控制血糖。通过单纯的饮食控制和运动管理都可以控制血糖，比如采取多餐方式以及多运动等。最好听从营养科医师的指导，这样可以在控糖的同时照顾胎儿的正常发育。

要预防妊娠糖尿病，最基本的原则就是低糖、低脂肪、高蛋白质、高纤维素饮食，再加上少吃多餐。可减少以米、面为主食，改食煮的原味燕麦。

预防妊娠糖尿病的另一要务就是戒懒戒娇气，孕期加强运动。散步是最适合孕妇的运动方式，可以稍微走得快一些，走得微微冒汗即可，不要大汗淋漓，更不要跑。运动时间最好是在三餐后，吃完饭半小时之后出去走一走。

血糖正常值

众所周知，无论是高血糖还是低血糖对身体都是有伤害的。因此，只有血糖浓度在正常范围之内才能给身体的各器官组织供给足够的营养。特别是对于正在怀孕的准妈妈来说，正常的血糖值才不会危及到妈妈和宝宝的健康。一般规定孕妇空腹血糖正常值为3.1-5.6mmol/L。

血液中的糖份称为血糖，绝大多数情况下都是葡萄糖（英文简写Glu）。体内各组织细胞活动所需的能量大部分来自葡萄糖，所以血糖必须保持一定的水平才能维持体内各器官和组织的需要。正常人在空腹血糖浓度为3.61~6.11mmol/L。空腹血糖浓度超过7.0mmol/L称为高血糖。血糖浓度低于3.61mmol/L称为低血糖。

很多人对血糖正常值都有误解，以为这是一个不会变化的数值，所以如果血糖浓度稍微升高或降低就会很慌张。但在正常情况下，血糖浓度在一天之中是轻度波动的，一般来说餐前血糖略低，餐后血糖略高，另外还有很多情况也会导致血糖浓度的波动，例如感冒后可使血糖升高；工作环境和生活环境的突然变化导致病患者暂时性机体不良反应；长期便秘可导致代谢紊乱，血液循环不利，影响血糖，但是这种波动是保持在一定范围内的。

罗氏血糖仪

有高血糖的人需要经常监测血糖，以免出现意外情况，其中罗氏血糖仪可以监测血糖，那么罗氏血糖仪价格是多少呢？

罗氏血糖仪是一款自动血糖仪，五秒钟可以显示精准结果，试纸插入自动开机，试纸拔出自动关机，适宜温度是10到40度，相对湿度小于85%，采血方式是机内肌机外多部位采血，可以手细血管血，静脉血，动脉血和新生儿血。罗氏血糖仪价格在300-900元之间不等。

罗氏诊断公司健康医护部主要向用户提供用于糖尿病监测的血糖检测仪及其他检测系列产品，以帮助患者控制疾病。从设计出世界上第一台便携式血糖仪，到推出了一个又一个具有里程碑意义的新产品，罗氏诊断始终将满足糖尿病监测的不同需要放在首位。

强生血糖仪

强生血糖仪可以有效的测量血糖，那么强生血糖仪哪一款好呢？

目前，强生血糖仪的型号并不比其他品牌的型号少，有：强生稳步血糖仪、强生稳豪血糖仪、强生稳豪倍易型血糖仪、强生稳豪倍优型血糖仪。总的来说在准确度方面，强生的几款机型都还可以，都经过了美国食品药品监督管理局(FDA)核准。

强生血糖仪是一款测量血糖的医疗器械，强生血糖仪有很多型号，强生稳捷、强生稳步、强生随手测、强生稳豪以及强生稳豪倍易，现在稳捷、稳步和随手测都停产了，就只有强生稳豪和稳豪倍易型血糖仪了。强生稳豪倍易型家用血糖仪售价399元，强生稳豪血糖仪售价799元左右，在京东商城上有售。

血糖仪

血糖仪用之前要校准才行，那么血糖仪怎么校准呢？

血糖仪是指患者用于自行检测毛细血管血糖的仪器，采集的血量很少，而且出结果很快，目前临床应用非常广泛。血糖仪应该每半年校正一次，临床上校正可以用测得数值和生化仪测的血浆葡萄糖行对比，如果出现差别比较大，超过1-2mmol/L，这个时候血糖仪需要校正。每个血糖仪厂家都会配备专门的校正试纸和校正液，通过校正试纸和校正液，可以看目前血糖仪的状况是不是稳定，有没有出现比较大的偏差，如果偏差，可以用校正试纸进行校正。

血糖仪校准的时候在关机状态下将试条直接插入一起,屏幕显示当前校正码，滴血符号闪烁。按动C键一次,校正码变换一次,找到与测试条上相同的校正码。按键,储存当前校正码,滴血符号重新闪烁表式校正码设置成功。

血糖正常值范围

想要检测血糖，到医院是最准确的，那么血糖正常值是多少范围呢？

血糖分为空腹血糖、餐后2小时血糖和随机血糖。空腹血糖>正常值为3.9mmol/L，<6.1mmol/L，属于正常范围。餐后2小时血糖<7.8mmol/L为正常范围，随机血糖 7.8mmol/L为正常范围。如空腹血糖≥6.1mmol/L，餐后2小时血糖≥7.8mmol/L，或随机血糖>7.8mmol/L，提示血糖不正常，应回医院复查，必要时可做糖耐量试验。

血糖是指血液中的葡萄糖浓度。葡萄糖是人体的重要组成成分，也是能量的重要来源，人体每天需要大量的糖来提供能量，为各种组织、脏器正常的运作提供动力，血糖必须保持在一定的水平内才能维持体内各器官和组织的需要，过多或过少都会造成身体的损伤。

血糖值

血糖指标是有一定的标准的，那么血糖指标是什么呢？

血糖指标一般分为空腹血糖的指标和餐后两小时血糖的指标。空腹血糖的指标正常值范围是在3.9-6.1mmol/L；餐后两小时血糖的指标正常值范围是4.4-7.8mmol/L。如果超出了这些正常的高值，属于异常的血糖。空腹血糖大于6.1，小于7.1mmol/L属于空腹血糖受损。如果大于等于7.1mmol/L诊断为糖尿病。而餐后两小时血糖大于7.8mmol/L，小于11.1mmol/L，可以诊为糖耐量受损。如果大于11.1mmol/L，可以诊断为糖尿病。

血糖可以通过糖化血红蛋白测定来判断，正常人糖化血红蛋白测定的参考值是：4%～6%，当参考值大于9%时，预测为糖尿病的准确率为78%，当参考值大于10%时，预测为糖尿病的准确率为89%，并且能够提示此时有较严重并发症，应当积极的保健和治疗。

椰子糖

椰子糖吃起来有椰子的香味，那么椰子糖的功效与作用是什么呢？

椰子糖，以椰子为主要原料，采用科学的工艺精心加工而成。保留了椰子的原香原味及营养成份。椰子糖口感香滑、椰香浓郁、风味独特。

椰子糖可以自己做，通常喝完椰汁，去掉椰子皮，用刀把黄色外皮削干净，留白色椰子肉，洗干净后切成薄片，锅中倒入清水烧开后加入椰肉煮5分钟，让椰肉变软，将水分滤干，倒入一个大碗里，加入白糖拌匀腌制40分钟，腌好后白糖全部化成水，倒入锅内大火煮开转小火慢慢烧至水份收干，煮至糖水烧干变粘稠，关火，用硅胶铲一直翻炒，一直翻炒至糖份不断蒸发，慢慢看到椰肉挂上糖霜，直至让每块椰肉都挂上糖霜，放到冷却即可食用。

雅培安妥血糖仪

有些人会用雅培安妥血糖仪测血糖，那么雅培安妥血糖仪怎么样呢？

雅培安妥血糖仪不错，美国雅培公司是世界上著名的医学检验仪器生产商。有着200年的历史。2002年，雅培公司总销售额达177亿美元，在全美财富500强中名列第100位；同时，又被福布斯杂志评为美国第48位整体表现卓越的公司。雅培公司在营养品、药品、医疗器械、诊断仪器及试剂领域都有世界领先的产品。凡从事医学检验的医务人员大都知道雅培生化分析仪、雅培血球计数器，其质量，精确度为世界一流水平。

雅培血糖仪的种类为雅培利舒坦血糖仪，雅培辅理善越捷型血糖仪，雅培安妥超越血糖仪。市面上选择雅培利舒坦血糖仪比较多，因为它是一款微痛血糖仪，其采血量极少。美国FDA（美国食品药品监督管理局）唯一批准六部位采血，可选择上臂、前臂、大腿、小腿、手或手指六部位采血，减轻十指连心采血痛苦。特别适合于儿童和老人频繁监测。

雅培利舒坦血糖仪

血糖仪的品牌很多，雅培利舒坦血糖仪就是其中一种，那么雅培利舒坦血糖仪怎么样呢？

雅培利舒坦血糖仪相对来说评价是比较高的，雅培血糖仪的种类为雅培利舒坦血糖仪，雅培辅理善越捷型血糖仪，雅培安妥超越血糖仪。

其实市面上选择雅培利舒坦血糖仪比较多，因为它是一款微痛血糖仪，其采血量极少。美国FDA唯一批准六部位采血，可选择上臂、前臂、大腿、小腿、手或手指六部位采血，减轻十指连心采血痛苦。特别适合于儿童和老人频繁监测。雅培利舒坦血糖仪可记忆250组测试资料,有7、14、28天血糖平均值，V3的纽扣电池，原数据保存。

雅培血糖仪

雅培血糖仪需要正确使用才准，那么雅培血糖仪使用方法是什么呢？

取出电池上的隔离条，按住1开关键，开机。快按左键或右键更换提示音设置。快按1开关键，保存提示音设置，并进入时间设置。快按左键或右键设置正确的小时数，快按①开关机保存设置，依次完成分钟、日期、月、日、时间模式日期制式的设置。

然后校正：取出校正片，校正片中有批号的一面或者有代码的一面朝上插入到血糖仪的试纸插口中至推紧，检查批号或代码是否一致，校正完毕取出并保存好。取出试纸，将试纸末端有3条黑色带的接触面朝上，插入血糖仪的试纸插口并插紧，待出现滴血图标，表示可以开始滴血。

用采血笔从指尖、前臂、上臂、大鱼际采血，将血滴接触试纸末端的白色区域，血滴即被吸进去，继续向试纸末端滴血，直到血糖仪开始测试。倒计时结束，血糖仪显示血糖结果，取出试纸，血糖仪将自动关闭。

甘油三酯高是什么原因

甘油三酯高本身不是病，但会致病，那么甘油三酯高容易得什么病呢？

甘油三酯高会引起等脑梗死、冠心病等心脑血管疾病，如果不能及时治疗，也可能会引起继发性疾病，比如糖尿病、胰腺炎、甲状腺功能减退、肾病综合征等。还有体内甘油三酯高会让血液变得粘稠，如果这些粘稠的血液长期粘在血管壁上面，容易导致血管硬化，而血管硬化会让血液的流速变缓，容易出现血栓。

这些血栓也会粘在血管壁上面，如果在血液的不断冲刷下血栓掉落，很可能就会堵塞血管，尤其是在堵塞了脏器里面的血管之后，会让脏器出现缺血、坏死的情况，严重者会危及生命。

雅培利舒坦血糖仪

血糖仪的品牌很多，雅培利舒坦血糖仪就是其中一种，那么雅培利舒坦血糖仪怎么样呢？

雅培利舒坦血糖仪相对来说评价是比较高的，雅培血糖仪的种类为雅培利舒坦血糖仪，雅培辅理善越捷型血糖仪，雅培安妥超越血糖仪。

验血

很多的检查其实都是需要验血的，那么验血能验出什么呢？

验血能够查出很多种情况，比如验血可以检测个人的血型是A型、B型、O型还是AB型。验血能够查出是否存在着贫血，有的人面色苍白，疲乏无力，一查是已经严重的贫血了，比如血红蛋白＜80g/L。另外，验血也能够查出人有没有糖尿病，有的人空腹血糖达到了8.0mmol/L以上，甚至到了十几个毫摩尔每升，已经是糖尿病，一定要注意严格的控制饮食。

验血的时候，有的人会出现谷丙转氨酶、谷草转氨酶升高的情况，乙肝五项也有阳性的结果，尤其是乙肝表面抗原是阳性，这就是慢性乙型肝炎的患者，一定要注意定期的复查肝功能检查HBV-DNA，在医生的指导下系统的治疗。验血还可以查肿瘤的标志物，比如甲胎蛋白可以筛查肝癌是否已经有了症状。

血液测试可以预测生死，准确率高达80%，这是不是纯属迷信？

曾经看过这样的一篇报道：局英国《每日邮报》报道，科学家发现一种方法可以预测人们的死亡率的风险。他们发现血液中的一种标记，可以探测到癌症，慢性心脏病和其他严重疾病的累积因素。据此科学报道可知，血液测试确实会预测一定的死亡率但绝不是绝对预测，所以准确率高达80%是不正确的，但血液测试预测生死也不完全是迷信。

要知道血液是在心血管内循环流动，遍及全身。它保持着整个身体与外界环境间的联系，也维持着各器官组织间的相互联系。血液有着运输物质，维持组织的兴奋性，调节机能，防御作用等重要的生理功能。

普通的血液测试又能查出哪些病呢？

1.血液系统疾病

通过血常规检查，可以检查红细胞的情况从而了解有没有贫血，有没有缺铁。还可以检查白细胞的数量，判断是不是有引起疾病。通过血小板的计数，可以判断有没有血小板减少，有没有出血倾向。

2.内分泌系统的疾病

通过检查血液中的各种激素的含量，判断其是否在正常范围内。如果发现有不正常的情况则进一步检查治疗。

除以上列举的两种疾病，血液测试还可以检查出脏器的功能，代谢疾病，肿瘤，感染性疾病，传染病等等疾病。虽然血液检查可以检查出很多的指标，可以减产出很多的疾病，但是现在的疾病更是层出不穷，不是单单的血液测试就可以检查出来的，需要依靠多种手段来确诊的。

抗原和相应的抗体在动物体内或体外都能发生特异性结合反应，这种反应称为抗原抗体反应，习惯上把体内的抗原抗体反应称为免疫反应，体外的抗原抗体反应称为血清学反应，因为抗体主要存在于血清中。

血清学反应可以用已知的抗体检查未知的抗原，也可用已知抗原测定未知的抗体。人们根据抗体能与相应抗原发生反应并出现可见的抗原—抗体复合物的原理，设计了许多血清学诊断方法，不仅可以检测动物体内乃至体外的病原微生物，或其抗原性成分，而且还可以测定动物机体对病原微生物的侵袭或对其抗原成分的免疫反应。在抗原—抗体复合物成不可见状态时，可以通过琼脂扩散、凝集实验以及酶标记等指示系统，使其变为可见或可测状态。

目前已知的血清学诊断方法很多，现仅介绍几种在目前条件下规模化猪场通过学习都能做到的诊断方法：

（1）凝集试验猪病诊断过程中常用的操作方法有以下几种：

①全血平板凝集试验实践中主要用于细菌性疾病的抗体检测和抗原（经分离培养后）的鉴定。现举例用已知猪丹毒抗原（丹毒杆菌的纯培养液）测定被检猪血清中的抗体。其操作步骤如下：

a.材料猪丹毒凝集抗原，玻片，9号针头，酒精棉球，酒精灯，铂耳（取血环）等。b.操作用铂耳取已知抗原1滴，置于玻片上。用酒精棉球擦拭针头，铂耳在酒精灯上灼烧消毒。用针头刺破被检猪的耳静脉，以铂耳取血与玻片上的抗原等量混合，在2～3分钟内观察结果。c.结果判定出现颗粒状的凝集，为阳性反应。否则为阴性。

②试管凝集试验是一种定量法，用于测定被检血清或其他体液中有否某种抗体及其效价，可做临床的辅助诊断，或用于流行病学监测。在猪场中，本法常用于猪布氏杆菌病的诊断。

A.材料布氏杆菌病试管凝集抗原（1∶20倍稀释），布氏杆菌病阳性血清、阴性血清（1∶25倍稀释），稀释液（0.5 %石炭酸生理盐水），灭菌小试管，1毫升吸管，试管架，待检血清等。B.操作取试管7支置于试管架上，设阳性和阴性血清及抗原对照各1支，测定管4支，以后每增加1个样品，只需增加4支测定管。

按表10示意稀释血清，加抗原，完成后每支试管内应含1毫升液体。

表10 布氏杆菌试管凝集反应（单位：毫升）

试管号 1 2 3 4 5 6 7血清稀释倍数 1∶25 1∶50 1∶100 1∶200 阳性血清对照1∶25 阴性血清对照1∶25 抗原对照0.5%石炭酸生理盐水 1.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5待检血清 0.5 0.5 0.5 0.5 抗原（1∶20稀释） 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5弃0.5 弃0.5加入抗原后，将试管充分振荡，置于37℃温箱反应24小时后，判定结果。C.判定标准“-” 液体均匀混浊，管底无凝集物，不凝集。

“+” 液体透明度较差，管底有少量凝集物，为25%凝集。

“++” 液体中等浑浊，管底有中等量的伞状沉淀，50%菌体凝集。

“+++” 液体几乎透明，管底有明显伞状沉淀，75%菌体凝集。

“++++” 液体完全透明，管底出现大片的伞状沉淀，100%菌体凝集。

结果判定：已出现50%菌体凝集的血清最高稀释度为该血清的凝集价。在检测猪布氏杆菌病时，血清凝集价在1∶50以上时，可判为阳性反应。若凝集价为1∶25，则为可凝集（需重复试验1次）。如猪群中基本无阳性反应。则凝集价1∶25也可判为阴性。

③间接红细胞凝集实验（简称间接血凝试验）

该试验能大大提高反应的敏感性。用抗体致敏红细胞检测相应的抗原，称为反向间接血凝试验；反之，称为正向间接血凝实验。在猪病的诊断中，常采用本法对猪口蹄疫、水泡病、猪瘟、传染性胸膜肺炎等疾病抗原的鉴定，或抗体的检测。现举例猪口蹄疫的抗体检测（正向间接血凝），操作步骤如下：

A.目的检测被检血清样品中猪口蹄疫抗体的效价。B.材料猪口蹄疫（O型）正向间接血凝标准致敏红细胞（由兰州兽医研究所提供），标准阳性阴性血清，稀释液，96孔“V”形有机玻璃微量血凝板，微量加样器，滴头，被检血清等。C.操作将待检血清置60℃水浴中灭活30分钟，用微量加样器对血凝板上的每孔加入25微升稀释液，取25微升待检血清加到第一孔，用加样器以吸入与排出的动作混合3～4次，取出25微升放入第二孔混匀，依次到第九孔，取出25微升弃掉。血清稀释度从第一到第九孔分别为1∶2，1∶4，1∶8，1∶16，1∶32，1∶64，1∶128，1∶256，1∶512（第一排的10～12孔设阳性血清对照、阴性血清对照和抗原对照）。每孔加入25微升致敏红细胞，振荡1～2分钟，置37℃温箱或室1～2小时或更长时间，然后判定结果。D.判定标准“-” 红细胞沉底，呈圆点状，不凝集。

“+” 红细胞大部分集中于中央，周围只有少数凝集，即25%凝集。

“++” 红细胞呈薄层凝集，中心致密，边缘分散，即50%凝集。

“+++” 红细胞凝集程度较上有所增加，即75%凝集。

“++++” 红细胞呈薄层凝集，布满整个孔底或边缘，蜷曲呈荷包蛋边状，即100%凝集。

结果判定：以出现50%凝集（++）的血清最高稀释度，为该血清的间接血凝价。

④血凝（HA）与血凝抑制（HI）试验在猪的传染病中，细小病毒感染、乙型脑炎、伪狂犬病等，适宜进行血凝和血抑试验，本试验以检测猪细小病毒血清抗体为例，介绍如下：

A.材料猪细小病毒浓缩诊断抗原，豚鼠沉积红细胞配成的0.5%悬液。稀释液、标准阳性和阴性血清、被检血清、96孔V形有机玻璃微量血凝板、25～50微升微量移液管、微量振荡器、普通离心机等。B.试验方法a.血凝（HA）试验用滴管在96孔血凝板上以第一孔至试验所需要稀释倍数孔，每孔滴加稀释液25微升，用移液器从第一孔开始依次稀释，置微量振荡器上振荡15秒，最后每孔滴加0.5%豚鼠红细胞25微升，振荡30分钟，置室温（20℃左右）1小时后判定。b.血凝抑制（HI）试验被检猪血清先经56℃、30分钟灭活，然后加入50%豚鼠红细胞（最终浓度）和等量的高岭土，摇匀后放室温15分钟，经2000转/分离心10分钟，取上清液以除掉血清中非特异性的凝集素和抑制素，然后用稀释液将每份处理过的血清1∶5～1∶10至240倍比稀释，在向每孔加入等量4个血凝单位的标准血凝素（抗原），混匀后置室温1小时，加入新配制的0.5%豚鼠红细胞悬液，混匀后置室温2小时，判定结果，同时设阳性、阴性血清及红细胞和抗原的对照，HI抗体滴度≥1∶20者为阳性，猪感染PPV后7天左右可检出HI抗体，12～14天可达1∶1024～5000。

⑤乳胶凝集试验（LAT）

本法在猪病中主要作用于伪狂犬病和猪萎缩性鼻炎的诊断，是用其病毒或细菌致敏乳胶抗原来检测被检猪的血清、全血或乳汁中的抗体，具有简便、快速、特异、敏感的优点。

A.材料伪狂犬病毒致敏乳胶抗原，伪狂犬病阳性血清、阴性血清、稀释液，玻片，吸头，被检血清或全血或乳汁（通常采初乳，经3000转/分钟离心，取上清液做待检样品）。B.试验方法a.定性试验取被测样品（血清，全血或乳汁）、阳性血清、阴性血清、稀释液各1滴，分置于玻片上，各加乳胶抗原1滴，用牙签混匀，搅拌并摇动1～2分钟，于3～5分钟内观察结果。b.定量试验先将血清在微量反应板或小试管内作连续倍比稀释，各取1滴依次滴加于乳胶凝集反应板上，另设对照（同上），随后各加乳胶抗原1滴。如上搅拌并摇动，然后判定。

C.结果判定首先对照组要出现如下结果，本试验才能成立：阳性血清加抗原呈“++++”，阴性血清加抗原呈“-”，抗原加稀释液呈“-”。

“++++”全部乳胶凝集，颗粒聚集于液滴边缘，液体完全透明。

“+++”大部分乳胶凝集，但颗粒明显，液体稍混浊。

“++”约50%乳胶凝集，但颗粒较细，液体较混浊。

“+”仅有少许凝集，液体混浊。

“-”液滴呈原有的均匀乳状。

以出现“++”以上凝集者，判为阳性凝集。

注意事项：试剂盒应在2～8℃冷暗处保存，暂定1年。乳胶抗原为乳白色状液体，如出现分层，使用前轻轻摇匀。

（2）沉淀实验具体方法有多种，如环状沉淀实验、琼脂扩散实验和免疫电泳等。在猪病的诊断中，目前最常用的是琼脂扩散实验，现以检测伪狂犬病的抗体为例，将其操作方法介绍如下：

A.材料伪狂犬病标准抗原，阳性血清，阴性血清，待检血清（56℃灭能30分钟），生理盐水，打孔器，微量移液器，培养皿，琼扩琼脂（配制方法：含有0.1%石炭酸的磷酸缓冲盐水，加入1%的优质琼脂，在沸水中融化均匀，若有杂质，须用纱布过滤，然后分装于盐水瓶内，保存备用）。B.操作a.浇琼脂板和打孔将已融化的琼脂趁热倒入平皿，制成3毫米厚的琼脂板，待凝固后进行打孔。一组共7个孔，中间1孔，孔径4毫米，孔距3毫米。用打孔器打孔，剔出孔内的琼脂然后将琼脂板在酒精灯上来回过2～3次，使琼脂与玻板之间的空隙封闭。b.向孔内加样中央孔加抗原，外周孔第1，5孔加阳性和阴性血清作对照，第2，3，4，6孔加待检血清。将加完样的琼脂平皿加上盖子，置37℃恒温箱扩散24～36个小时，然后判定结果。C.结果判定首先检查标准阳性血清孔和抗原孔之间是否出现明显的致密的白色沉淀线，而阴性孔则不出现，只有在对照组出现正确结果的前提下，被检孔才可参照标准判定。

注意事项：

第一，琼扩所用的琼脂必须是优质的琼脂粉，若用普通的琼脂条，应事先净化精制。精制的简易方法是：取条状琼脂24克，加蒸馏水1000毫升，在沸水中融化，趁热倒入搪瓷盘中，待冷却后切成1平方厘米大小的琼脂块，用蒸馏水或无离子水浸泡2～3天，每天换水4～5次，然后将处理好的琼脂块隔水融化，加入0.1%石炭酸磷酸缓冲盐水，配成1%琼脂。

第二，制备琼脂板应在水平台上进行，防止薄厚不匀。板的厚度要求一致（7.5厘米的平皿，用15毫升琼脂液）。浇制时防止产生气泡。平皿浇制的琼脂板在4℃冰箱内可保存15天。

第三，打孔的孔径、孔距力求准确、合适。

第四，孔中滴加抗原和血清时，孔内必须加满而又不能外溢。加样时不能带进小气泡。

（3）酶联免疫吸附试验（ELISA）

它是根据抗原与抗体特异性结合的功能，以酶做标记物，利用酶对底物具有高效催化作用的原理而设计的。它既可以用于抗原的诊断，也可进行血清抗体的检测，可达到定性和定量的目的。已广泛地用于传染性疾病的诊断，血清流行病学调查和抗体水平的评价等。

目前在兽医防治的研究和实践中，对于猪瘟、伪狂犬病、繁殖障碍与呼吸综合征、流行性腹泻、旋毛虫病、猪气喘病等疾病，均采用免疫酶技术进行病原诊断、抗体检测和血清学流行性调查，并且已成为规模化猪场化验室工作的一项重要内容。利用免疫酶技术测定抗原和抗体的方法很多，下面简要介绍3种适合猪场使用的免疫酶技术。

①斑点酶联免疫吸附实验（Dot—ELISA）

A.材料硝酸纤维滤膜（孔径0.45微米），0.01摩/升、pH7.2的磷酸盐缓冲盐水，封闭液（磷酸盐缓冲盐水加入10%马血清或0.1%明胶），30%双氧水（H2O2），3，3′-二甲基联苯胺（DAB）抗原液，阴性对照，待检液，待检血清，阳性血清及阴性血清，酶标兔抗猪免疫球蛋白G（IgG），0.05摩/升三羟甲氨基甲烷—盐酸缓冲液，洗涤液（磷酸盐缓冲盐水加入0.05%吐温-20）。B.检测抗原操作第一，硝酸纤维薄膜（NCM）的处理：在滤膜上划6毫米×6毫米的方格，在方格中央用蘸水笔末端压成圆形痕迹。置于蒸馏水中浸泡10分钟，取出后晾干备用。

第二，点样：取1毫升待检液在硝酸纤维滤膜圆圈内点样，同时设立阳性与阴性对照，自然干燥或置于37℃温箱中干燥。

第三，封闭：将硝酸纤维滤膜置于封闭液中，37℃、30分钟，用洗涤液洗涤1次，约3分钟。

第四，加猪阳性血清，将硝酸纤维薄膜置于猪阳性血清中，37℃作用1小时，取出用洗涤液洗涤3次，每次3分钟。

第五，加酶标兔抗猪免疫球蛋白G，37℃作用1小时，然后洗涤3～4次，每次3分钟。

第六，加底物溶液（0.05摩/升三羟甲氨基甲烷—盐酸缓冲液100毫升，加3，3′-二甲基联苯胺40毫克，30%双氧水50微升），作用5～10分钟。

第七，终止显色，将硝酸纤维滤膜置于蒸馏水中冲洗2～3分钟。

第八，自然干燥，或37℃下干燥。

第九，判定标准：

“-” 不呈现斑点，与阴性对照相同。

“+” 斑点较弱或沉淀内有不均质的棕色点。

“++” 斑点浅棕色，对比度清晰。

“+++” 介于++和+++两者之间。

“++++”斑点深棕色，背景白色。

出现阳性反应的血清最高稀释度为该血清的Dot—ELISA效价。

第十，注意事项：试验中的点样抗原、血清及酶标抗体的稀释度，应根据预备试验确定；试验中应使用不溶性供氢体；如3，3′-二甲基联苯胺，4-氯-1-萘酚等，不能使用可溶性供氢体；根据试验的目的要求，确定检测抗原或抗体；封闭液可使用异种动物血清、牛血清蛋白（BSA）或明胶溶液等进行封闭，根据预备试验选择最佳封闭条件。C.检测抗体操作第一，硝酸纤维滤膜的处理，同检测抗原。

第二，点样，取已知抗原液点样，自然晾干或37℃干燥。

第三，封闭，同检测抗原。

第四，将点样后的硝酸纤维滤膜按点样格子剪成小块，置入系列稀释液的待检血清（1∶10，1∶50，1∶100，1∶200，1∶400，1∶800，1∶1600，1∶3200，1∶6400，1∶12800）中，同时设立阳性和阴性血清对照，37℃作用1小时，然后用洗涤液洗涤3次，每次3分钟。

第五，以下均同检测抗原第六、第七、第八、第九、第十项操作。

②酶联免疫吸附实验（ELISA）

现介绍猪病诊断常用的两种方法：

A.间接法将已知抗原吸附（或称包被）与固相载体，孵育后洗去未吸附的抗原，随后加入含有特异性抗体的被检血清，感作后洗涤未起反应的物质，加入酶标抗同种球蛋白（如被检血清是猪血清，则需用抗猪球蛋白），感作后再经洗涤，加入酶底物，底物分解后出现颜色变化，颜色变化的速度及程度，与样品中的抗体量有关，即样品中的抗体愈多，颜色出现愈快、愈深。

a.材料0.05摩/升、pH9.6碳酸盐缓冲液，稀释液用0.01摩/升、pH7.2磷酸缓冲盐水（含0.13摩/升氯化钠，0.5%犊牛血清），洗涤液用0.01摩/升、pH7.2磷酸盐缓冲盐水（含0.13摩/升氯化钠，0.05%吐温-20），30%双氧水，邻苯二胺（OPD），pH5.0磷酸二氢钠—柠檬酸缓冲液，2摩/升硫酸，抗原，阳性血清，阴性血清，待检血清，酶标兔抗猪免疫球蛋白，40孔聚苯乙烯联板，酶联免疫检测仪。b.操作第一，用碳酸盐缓冲液配置一定浓度的抗原包被液包被酶联板，每孔100微升，置37℃条件下2小时，或在4℃冰箱内过夜。

第二，倾去孔内液体，用洗涤液加满各孔，洗涤3次，每次3分钟，然后倾尽洗涤液。

第三，除调零孔外，其余孔加入用稀释液稀释的待检血清，每孔100微升，同时设立阳性、阴性血清对照，置37℃下反应1.5小时。

第四，抗体效价测定。将待检血清进行血清进行倍比稀释，每份血清加两排孔，即同一稀释度的血清加上下相邻的两个孔，每孔100微升，凋零孔不加血清。同时设立阳性、阴性血清对照。置37℃反应1.5小时。

第五，洗涤同第二。

第六，除调零孔外，每孔加入酶标记兔抗猪免疫球蛋白G 100微升，置37℃下反应1.5小时。

第七，洗涤同第二。

第八，每孔加入新配置的底物溶液（取邻苯二胺40毫克，溶于100毫升pH5.0的磷酸盐—柠檬酸缓冲液，临用前加入30%双氧水0.15毫升）100微升，室温下观察显色（5～30分钟）。

第九，每孔加入50微升，2摩尔/升硫酸终止反应。

第十，用酶联免疫检测仪测定每孔490纳米波长的光密度（OD）值。

B.夹心法本法是检测抗原的方法，将特异性免疫球蛋白吸附于固相载体表面，然后加入含有抗原的溶液，使抗原和抗体在固相表面形成复合物，洗除多余的抗原，再加入酶标记的特异性抗体，感作后冲洗，加入酶的底物，颜色的改变与被测样品中的抗原量成正比。

a.材料同间接法。b.操作（以检测猪瘟病毒抗原为例）

第一，抗体包被：将一定溶度的猪瘟高免血清（用碳酸盐缓冲液进行稀释）包被酶联板，每孔100微升，置37℃下反应2小时，或4℃冰箱中过夜。

第二，洗涤：同间接法。

第三，加被检样品，除调零孔外，每份样品加2个孔，每孔加100微升，同时设立阳性抗原、阴性抗原对照，酶结合物对照（抗体加磷酸盐缓冲盐水加酶结合物），置37℃下反应1.5～2小时。

第四，洗涤，同第二。

第五，加底物溶液，同间接法第八。

第六，同间接法第九。

第七，同间接法第十。

C.结果判定常用的判定方法有3种。

阴阳性表示法：待检样本吸收值：规定吸收值≥0.2～0.4为阳性。规定吸收值等于阴性样本平均吸收值加SD（标准差）。

阳性阴性比（P/N）法：样本吸收值/阴性样本平均吸收值≥2～3者为阳性。

终点表示法：以出现阳性反应的样本最高稀释度，为该样本的滴度。D.注意事项第一，包被过程中以高pH和低离子强度的条件为佳，包被浓度在1～100毫克/毫升选择最佳浓度。

第二，血清或抗原稀释液应含5%～10%异种动物血清，或1%牛血清白蛋白，或0.5%明胶，以起封闭作用，防止非特异性反应，否则应在第二与第三步之间加封闭液进行封闭。

第三，洗涤要充分，酶结合物应按照要求进行稀释和使用，底物溶液一定要现配现用。

第四，显色时阴性对照刚出现微黄色时，应立即终止反应。

第五，用阳性阴性比方法判定结果时，阴性对照孔若小于0.1，则易出现误判。

第六，用自动酶联仪检测时，应按仪器规定说明确定调零孔。

第七，同一稀释度2个孔的490纳米波长光密度值的平均值，为该稀释度的光密度值，对照孔应作同样处理。

③猪瘟单克隆抗体纯化酶联免疫吸附试验A.材料本试验的试剂盒由中国兽药监察所提供。本抗原包括猪瘟弱毒单抗纯化酶联抗原和猪瘟强毒单抗纯化酶联抗原，分别供检测经猪瘟弱毒疫苗免疫后产生的抗体和感染猪瘟强毒后产生的抗体之用。同时提供酶标抗体，阳性、阴性血清，酶联板及其他器材和试剂。B.试验方法第一，用包被液将猪瘟弱毒单抗纯化酶联抗原、猪瘟强毒单抗纯化酶联抗原各做100倍稀释，以100微升分别加入做好标记的酶联板孔中，置湿盒于4℃过夜。

第二，弃去孔内液体，用洗涤液冲洗板3次，每次间隔3～5分钟，拍干。

第三，用稀释液将待检血清作400倍稀释，每孔加入100微升，同时将猪瘟阳性阴性血清以100倍稀释作对照，37℃下培育1.5～2小时。

第四，重复第二步。

第五，用稀释液将兔抗猪免疫球蛋白G辣根过氧化物酶结合物作100倍稀释，每孔加入100微升，37℃下培育1.5～2小时。

第六，重复第二步。

第七，每孔加入底物溶液（每块板所需的底物溶液按邻苯二胺5毫克加底物缓冲液5毫升加30%双氧水18.75微升配制）100微升，室温下观察显色反应（一般阴性对照孔略微显色，立即终止反应，并以阴性孔作空白调零）。

第八，每孔加入终止液50微升，于酶联读书仪上测定490纳米波长的光密度（OD）。C.判定标准a.在猪瘟弱毒酶联板上光密度＞0.2为猪瘟弱毒抗体阳性。

光密度＜0.2为猪瘟弱毒抗体阴性。b.在猪瘟强毒酶联板上光密度≥0.5为猪瘟强毒抗体阳性。

光密度＜0.5为猪瘟强毒抗体阴性。

D.注意事项第一，运输单纯纯化酶联抗原时，必须使用冰盒低温运输。

第二，配制洗涤液时，应使用新鲜蒸馏水或无离子水；每次洗板后，尽量不使孔中有残余液体，以免影响结果。

第三，底物溶液临用前配置，待邻苯二胺完全溶解于底物缓冲液后再加双氧水，混匀后立即加入孔中。