【用途】主要用于嗜血杆菌的分离,亦可用于奈瑟菌的增菌培养.
【原理】流感嗜血杆菌培养时,需要依赖血液中的X及V因子方能生长繁殖,当培养基加热至80~90℃时,可使血液中的红细胞破裂,以利于嗜血杆菌,奈瑟菌等的生长培养.凡疑有这些菌种存在的标本,均应接种巧克力平板.血液标本培养,增菌后又细菌生长,若移种巧克力平板上,有利于分离更多的细菌.
【成分】牛肉浸出液1L蛋白胨10氯化钠5琼脂15无菌脱纤维马血、羊血或兔血100mlpH7.7.4
【制备】将前四项成分混合,加热溶化,校对pH,高压灭菌(121℃15min)后在80~90℃以无菌方法加入血液,摇匀后置90℃水浴中.维持该温度15min,使之呈巧克力色取出,至室温冷至约50℃,倾制平板 .凝固后,抽样置于35℃培养18~24h,如无细菌生长,冷藏备用.
【接种】将可疑标本直接划线接种于该培养基上,置35℃普通培养或置含5%~10%二氧化碳环境培养18~24h,取出观察细菌生长状况.
【观察结果】流感嗜血杆菌菌落微小(0.8mm),无色透明、光滑整齐、似露滴状,48h后达1.5mm,从血液或脑脊液中分离的菌落往往形成液状,菌落较大,老培养物菌落中心呈凹陷.
【质量控制】流感嗜血杆菌ATCC10211,生长良好,菌落典型.肺炎链球菌,ATCC6305,生长良好,菌落典型.
【保存】置冰箱,1周内用完.
【试剂名称】巧克力琼脂【使用目的】流感嗜血杆菌的分离培养,不加抗生素亦可用于奈瑟菌的增殖培养。【试验原理】巧克力琼脂是分离嗜血杆菌的培养基。因为大量杂菌的存在,从呼吸道采集的标本中分离嗜血杆菌通常是困难的。巧克力琼脂为了增强选择性,改善对杂菌的抑制,添加了相应的抗生素。而不加抗生素,奈瑟菌在巧克力琼脂上生长良好。因此,不加抗生素的巧克力琼脂,也可用于奈瑟菌的增殖培养。【主要组成成份】琼脂粉、血红蛋白粉、促生长剂(或加混合抗生素)、一次性塑料瓶皿。血液培养基:用途:作血,骨髓培养用.巧克力培养基:培养细菌用,具体培养啥细菌,不清楚
SS培养基:用于粪便标本中肠道杆菌的分离培养,特别是沙门氏菌和志贺氏菌属的分离培养.
麦康铠培养基:麦康凯培养基是一种选择性培养基,LB培养基是一种用来预培养菌种的培养基.
进行沙门氏菌培养,首先用麦康凯培养基判断培养的菌种是否是沙门氏菌,将其疑似菌种接种到LB培养基上进行成倍扩增,以便进行下一步的鉴定.
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