举例我国新五大寄生虫中的血吸虫和疟原虫
血吸虫:
1 .病原学诊断
(1)粪检 直接涂片法(对急性期病人)、尼龙筛集卵法、加藤厚涂片透明法(Kato’s thick smear)、集卵毛蚴孵化法+沉渣镜检
(2)肠镜活组织检查虫卵 慢性和晚期病人肠壁增 厚、虫卵排出受阻,粪便中不易查获虫卵。
2.免疫学诊断:免疫学方法诊断血吸虫病,具有重要的辅助诊断价值
⑴皮内试验(intradermal test,idt):一般皮内试验与粪检虫卵阳性的符合率为90%左右,易出现假阳性或假阴性反应,与其他吸虫病可产生较高的交叉反应;并且病人治愈后多年仍可为阳性反应。此法简便、快速、通常用于现场筛选可疑病例
⑵检测抗体 (迄今为止,防治现场和临床常以查特异性抗体为主。)方法有:
1)特有的方法:环卵沉淀试验、尾蚴膜反应
2)最常用的方法:快速ELISA法,常规ELISA的改良,快速、敏感。已广泛应用于临床、现场多年
3)最简便方法:快速简便的试纸条法(Dip-stick),可用于家庭自我检测。
在国外,已广泛用于S.m诊断。国内对血吸虫病诊断研制成功。
⑶检测循环抗原:
抗体检测不能区分现症感染和既往感染,也不易于评价疗效。循环抗原是生活虫体排放至宿体内的大分子微粒,主要是虫体排泄、分泌或表皮脱落物中具有抗原特性,又可为血清免疫学试验所检出。cag的检测有其自身的优越性,能反映活动性感染,可以评价疗效和估计虫荷。
3类游离循环抗原,即肠相关抗原(gaa)、膜相关抗原(maa)和可溶性虫卵抗原(sea)。在检测方法上,采用检测不同靶cag的探针,包括抗血吸虫抗原不同表位──单克隆抗体、组合单克隆抗体以及多克隆抗体等。方法:斑点ELISA(dot-elisa),双抗体夹心ELISA
疟原虫:
1. 病原检查
(1)血膜染色镜检:取外周血制作厚、薄血膜-姬氏或瑞氏染剂染色-镜检
(2) 选择适宜的采血时间:恶性疟在发作前半小时至发作时;间日疟在发作后数小时至10余小时
2.免疫学诊断
(1)循环抗体检测:主要用于疟疾的流行病学调查、防治效果 评估及输血对象的筛选。
方法: 间接荧光抗体试验 、间接血凝试验、酶联免疫吸附试验(ELISA)
(2)循环抗原检测:是否有活动感染。方法: 放射免疫试验、抑制法ELISA、夹心法ELISA
3.分子生物学技术:
(1)聚合酶链反应(PCR)具有敏感性高、操作简便、套式PCR系统
(2)核酸探针:用于恶性疟原虫的检测,具有敏感性高(0.0001%的原虫密度)
(3)环介导等温扩增(LAMP)
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