怎样分辨精子x与y染色体

男人产生的带X染色体和Y染色体的精子概率是相同的，是1：1的比例。

那么多的精子是没法分辨的。

Y染色体（Y chromosome）是决定生物个体性别的性染色体的一种。男性的一对性染色体是一条x染色体和一条较小的y染色体。在雄性是异质型的性决定的生物中，雄性所具有的而雌性所没有的那条性染色体叫Y染色体。对哺乳类来说，它含有SRY基因，能够触发睾丸的发生，因此决定了雄性性状。人类的Y染色体中包含约6千万个碱基对。Y染色体上的基因只能由亲代中的雄性传递给子代中的雄性（即由父亲传递给儿子），因此在Y染色体上留下了基因的族谱，Y-DNA分析现在已应用于家族历史的研究。

X染色体是XY型性别决定生物染色体组中的一种特殊的性染色体。雌体有相同的性染色体时，此性染色体称为X染色体。在性别决定上，XX为雌，XY为雄。

1、存活时间有差异。X精子的存活期2～3天（72小时内），Y精子存活时间24小时左右。如果XY两种精子都游到了输卵管壶腹等候卵子的到来，此时生女孩的可能性较大，因为X精子存活时间较长；如果卵子已经排出进入输卵管壶腹，Y精子总是率先到达，则生男孩的可能性较大。假若精子与卵子同时到达输卵管壶腹部，结果生男孩可能性较大。

2、x精子和y精子所含的染色体不同。X精子含有体大而长的X染色体和数量很多的脱氧核糖核酸（DNA），携带着丰富的遗传密码，头大而圆，体态肥胖，行动迟缓，但寿命较长。Y精子含有Y染色体，所含脱氧核糖核酸以及携带的遗传密码较少，头小而尖，体态小巧玲珑，行动敏捷，但寿命比X精子短。在适应环境能力方面，X精子比Y精子强得多。

分离X、Y精子的方法

（一）流式细胞分离仪分离法

利用X精子和Y精子中DNA含量的差异来分离精子，X精子和Y精子DNA含量的差异为3－5％，分离准确率可以达到90％（Johnson and Welch,1999）。

这种技术在（大不列颠）联合王国已经被商业化并且运用到牛的生产中，分离好精子的销售在2000年9月已经开始；在其他国家也逐渐开始形成商业化 。

流式细胞分离仪分离法的不足之处

1 流式细胞分离仪的价位昂贵，约为$300，000 ；

2 如果操作不当后代畸形的出现将无法控制；

3 每秒分离5000－6000个精子的速度已经相当快了，但是相对于牛人工授精所需要的最小精子剂量10^6个来说还是很慢的。

4 精子在分离过程中还经历了机械和化学应激对精子不利（Garner et al, 2001）

（1）精子与DNA结合染料Hoechst33342接触，肯定会把少量的染料带入到胚胎中；

（2）测定DNA含量时，精子暴露在激光的电磁能和发射的荧光下；

（3）精子以90km/h的速度离开分离仪管口，并且毫无缓冲；

（4）当精子进入收集管中时，在气体与液体的接触界面，突然从90km/h的速度转为0；

（5）当从液流中把精子转为一滴时，对精子产生拉伸作用；

（6）分离后的加工过程如离心和浓缩过程(Schenk et al，1999)。最近研究表明在流式细胞分离系统中把压力从50psi降低到40psi可以显著降低对精子的伤害（Suh and Schenk, 2003）。

（二）利用免疫学方法分离精子

Blecher等（1999）报道的免疫学方法。这种方法是在基础生物学研究中发现的 ，通过分离X、Y精子表面差异膜蛋白后，通过抗原抗体反应到达分离某一类精子的目的。然而，这种方法到现在也没有被广泛应用。

（三）干涉显微镜下 分离X、Y精子

Munster et al（1999）报道的。其原理是在干涉显微镜下可以看到单个精子的体积大小不一。他们十分肯定的说，牛携带X染色体的精子比携带Y染色体的精子大约大1％。这种技术已经完全自动化，因此可以大量分离精子。但是这种方法是否能够分离出大量的具有正常受精能力的精子仍不清楚。这种方法的优点是不用DNA结合染料，缺点是分离出的X精子和Y精子的准确率在80％以下，甚至有可能更低，因为生物学的差异远远大于1％（Van Munster et al ,1999）。因此，在生产中应用受到限制。

（四）the HSA separation method described by Ericsson et al. [Nature, 246, 421–424 (1973)]）

The method was based upon passage of spermatozoa through columns of human serum albumin (HSA), and was founded upon the idea that Y-bearing spermatozoa swim faster than X-bearing spermatozoa. however, have not been confirmed by others. The Ericsson method (Ericsson et al., 1973) involves no exposure to toxic chemicals, and has been in use for many years, is known to be free from risks However, the largest trial was published by the inventor of the method (Ericsson et al., 1973) and has therefore been considered as not fully independent (Flaherty et al., 1997).Furthermore, another study (Jaffe et al., 1991) found that although the method worked convincingly for female selection, it did not do so for male selection.

（五）free-flow电泳

这种方法是Engelmann et al (1988)年发明的

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