如何利用麦氏常数选择固定液,什么是固定液的最高使用温度,在实际操作中如何

如何利用麦氏常数选择固定液,什么是固定液的最高使用温度,在实际操作中如何,第1张

均匀的薄膜,柱效高。但颗粒不宜过小,以免使传质阻力过大。

三、固定液性质:

固定液的选择一般根据相似相溶原则。固定液和被测组分的性质有某些相容性时,其溶解度才大,样品组分在固定液中有一定的溶解度,才能实现分离。

四、固定液用量:

载体表面积越大,固定液用量越大,允许的进样量就越大。但为了改善液相传质,应使固定液膜薄一些。

五、进样速度:

进样速度必须很快,否则样品峰宽大,甚至使峰变形。

六、进样量:

进样量一般较少,气体样品一般为0.1~10mL,液体样品一般为0.1~5uL。最大的进样量应控制在峰面积或峰高与进样量呈线性关系的范围内。

七、气化温度:

进样后要有足够的气化温度,使液体样品迅速气化后被载气带入色谱柱中。在保证样品不分解的前提下,适当提高气化温度,对分离和检测有利。 一般气化温度比柱温高30~70℃为宜。

八、柱温:

柱温不能高于固定液的最高使用温度,以免引起固定液的挥发流失。在使最难分离组分能尽可能好的分离的前提下,尽可能采用较低的温度,以保留时间适宜,峰形不拖尾为度。

1、在实验中使用两种混和的固定液。由于Carnoy首先使用的甲醇冰乙酸混合液而称的卡诺氏固定液是效果良好的固定液。

Carnoy固定液(甲醇:冰乙酸=3:l)每次使用前需临时配制,长时间放置影响固定效果,固定时间15分钟至24小时,冰箱、室温均可。

必要时可改变甲醇和冰乙酸的比例,冰乙酸比例增加,利于细胞膨胀、染色体铺展,但易导致细胞破裂、染色体散失。

2、甲醇与冰醋酸(乙酸)能反应生成乙酸甲酯,所以要现配现用

扩展资料:

1、卡诺氏固定液(Carnoy's Fluid/carnoys fixative)适用于一般植物组织和细胞的固定,常用于根尖、花药压片及子房石蜡切片等,有极快的渗透力。

有极快的渗透力,根尖材料固定15—20min即可,花药则需1h左右,此液固定最多不超过24h,固定后用95%酒精冲洗至不含冰醋酸为止;

2、如果材料不马上用,需转入70%酒精中保存。固定液的重要特性是能迅速穿透细胞,将其固定并维持染色体结构的完整性,还要能够增强染色体的嗜碱性,达到优良染色效果。

3、乙酸可用作酸度调节剂、酸化剂、腌渍剂、增味剂、香料等。它也是很好的抗微生物剂,这主要归因于其可使pH降低至低于微生物最适生长所需的pH。

4、甲醇可用作分析试剂,如作溶剂、甲基化试剂、色谱分析试剂。还用于有机合成。

参考资料来源:百度百科-卡诺氏固定液

参考资料来源:百度百科-乙酸

参考资料来源:百度百科-甲醇

相似相溶的原理实际上是根据极性相似的原理进行,在弱极性或非极性里,柱极性的影响因素较小出峰顺序大致是按沸点高低出峰的(低沸点先出),通常只有极性柱里,走出的峰才会主要按照极性强弱顺序出峰(弱极性先出),极性与固定液相似的被吸附在固定液上,极性越强吸附力越强,保留时间就越长,出峰越晚,弱极性的吸附力差很快就从柱子末端出来了,一般的出峰顺序是:弱极性的低沸点化合物-弱极性的高沸点化合物-强极性的低沸点化合物-强极性的高沸点化合物。


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