芦丁的提取分离原理

(一)

1、通过芦丁的制备，掌握黄酮类化合物提取分离的原理和操作。2、 掌握酸水解将芦丁生成槲皮素的方法。3、 掌握芦J与槲皮素鉴别方法，聚酰胺薄膜的操作方法，电子天平的使用方法

(二)实验原理，1、芦丁提取原理：芦丁中含有多个酚羟基，具有酸性，故用碱提酸沉法。2、芦丁的分离原理:芦在沸水中溶解，在冷水中析出。3、芦丁的鉴定原理:芦丁与槲皮素分别为黄酮类化合物的苷与苷元，用M o l i s h反应可以进行鉴别，也可以利用聚酰胺的氢键吸附性质进行定性分析，R f值也应不同。

(三)实验药材、…

碱提取

在500mL烧杯中加入水250mL，硼砂1g在加热至沸腾时，投入槐花米，继续煮沸2~3分钟，在搅拌下小心加入石灰乳，调至8.5-9保持微沸30分钟，趁热用尼龙布挤过虑。得到滤液。

酸沉淀

在60~70℃下用浓盐酸调pH至4。静置6小时 以上析出沉淀。抽滤，用蒸馏水洗沉淀1~2次 中性。弃去滤液，得到的沉淀即为芦丁粗品。

粗称重后按芦丁在热水中1:200的溶解度加蒸馏水进行重结晶。将沉淀悬浮于蒸馏水中，加热煮沸15分钟，趁热过滤。滤渣弃去，得到滤液。

充分静置，过滤，60~70℃干燥，称重。得到芦丁（精制品）。

芦丁（Rutin）广泛存在于植物界中，现已发现含芦丁的植物至少在70种以上，如烟叶、槐花、荞麦和蒲公英中均含有。尤以槐花米（为植物Sophorajaponica的未开放的花蕾）和荞麦中含量最高，可作为大量提取芦丁的原料。芦丁是由斛皮素（Quercetin）3位上的羟基与芸香糖（Rutinose）〔为葡萄糖（Glucose）与鼠李糖（Rhamnose）组成的双糖〕脱水合成的苷。

芦丁为浅黄色粉末或极细的针状结晶，含有三分子的结晶水，熔点为174~178℃，无水物188~190℃。溶解度：冷水中为1:10000；热水中1:200；冷乙醇1:650；热乙醇1:60；冷吡啶1:12。微溶于丙酮、乙酸乙酯，不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚，溶于碱而呈黄色。

芦丁具有维生素P样作用。有助于保持及恢复毛细血管的正常弹性，主要用作防治高血压病的辅助治疗剂，亦可用于防治因缺乏芦丁所致的其他出血症。

实验目的和要求

1． 实验目的

①通过芦丁的提取与精制掌握碱-酸法提取黄酮类化合物的原理及操作。

②通过芦丁结构的检识，了解苷类结构研究的一般程序和方法。

③了解UV及NMR在黄酮类化合物结构鉴定中的应用。

2． 要求

①要拿到以下三个化合物：芦丁、槲皮素、芦丁的全乙酰化合物。

②能够拿根据化学试验及UV、NMR数据初步推断出芦丁的结构。并对黄酮类化合物的结构测定有一般性的了解。

试验方法

1． 芦丁的提取与分离

2． 芦丁的鉴定

1）芦丁的定性反应

取芦丁3~4mg，加乙醇5~6ml使其溶解，分成三份作下述试验：

A.取上述溶液1~2ml，加2滴浓盐酸，在酌加少许镁粉，注意观察颜色变化情况。

B.取上述溶液1~2ml，然后滴加2%柠檬酸的甲醇溶液，注意观察颜色变化情况，在继续向试管中加入2%ZrOCl2的甲醇溶液，并详细记录颜色变化情况。

C.取上述溶液1~2ml，然后再加入10%α-等体积的萘酚乙醇溶液，摇匀，沿管壁滴加浓硫酸，注意观察两液面产生的颜色变化。

2）芦丁的紫外光谱解析

取芦丁溶于色谱纯甲醇中，加入规定的试剂，测定其UV光谱，试解析光谱并初步判断其结构。

3） 芦丁的NMR波谱解析

A.芦丁的三甲基硅醚NMR谱的解析

B.十乙酰化芦丁的NMR光谱解析

4）芦丁水解后糖与苷元的鉴定

A.水解方法：精密称取芦丁1g（±0.01g），加1%硫酸100ml，加热40min，放冷静置，过滤。所得沉淀用少许水洗除酸，干燥称重，计算苷元与糖的重量比。然后用乙醇（95%大约10ml）进行重结晶，即得苷元。

B.苷元的鉴定：用纸色谱法与对照品对照。

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