2,沸点升高和冰点降低。这是利用稀溶液的依数性测定溶质分子量的方法,是经典的物理化学方法。溶剂中加入不挥发性的溶质后,溶液的蒸气压下降,导致溶液的沸点比纯溶剂的高,溶液的冰点比溶剂的低。这种方法没用过,对温差的测量精度要求很高。
3,膜渗透压。用半透膜通过渗透压测定的方法,也应该是一种物理化学方法。
4,气相渗透法(VPO)。利用纯溶剂与加入溶质的溶液饱和蒸气压不同来测定分子量。测出的是数均分子量。
5,光散射/小角激光光散射(LALLS)。这两个方法只是仪器,数据处理和所用光源等方面有差异,原理差不多的。这种方法比较常用,而且仪器现在也发展到了一定水平,是测试高分子绝对分子量最有效的方法。
6,超速离心沉降。很复杂,最先用于蛋白质分子的测量。是一种相对方法。
7,凝胶色谱法(GPC)。很常用,根据不同大小的分子在介质中的停留时间不同来测量分子量。是一种相对方法,须结合其它方法的配合。
8,粘度法。利用玻璃粘度计(乌式粘度计,奥式粘度计)增比粘度,然后外推特性粘数,根据Mark-Houwink方程算出分子量,是最经济的方法吧,而且重新度很好。水溶性高分子一般都用这种方法测量分子量,也是一种相对方法。
生物分子的相互作用可通过多种检测手段进行检测,如荧光能量共振转移(FRET),荧光偏振(FP),时间分辨荧光(TRF)均相时间分辨荧光(HTRF),Western-Blot等, 而这些检测技术均可在酶标仪中实现。从分子水平上检测有DNA分子杂交技术,分子杂交技术和抗原-抗体杂交技术。1.DNA分子杂交技术检测的是转基因生物的DNA是否插入了目的基因。将转基因生物的基因组DNA提取出来,在含有目的基因的DNA片段上用放射性同位素等作标记,以此作为探针,使探针与基因组DNA杂交,如果显出杂交带,就表明目的基因已插入染色体DNA中。
2.分子杂交技术检测目的基因是否转入出了mRNA。从转基因生物中提取出mRNA,用标记的目的基因作为探针,与mRNA杂交,如果显出杂交带,则表明目的基因转入出了mRNA。
3.抗原-抗体杂交检测目的基因是否翻译成蛋白质。从转基因生物中提取蛋白质,用相应的抗体进行抗原-抗体杂交,若有杂交带出现,表明目的基因已形成蛋白质产物。
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