自行发光的原因同矿物成分中有“三价稀土元素进入晶格形成发光中心和电子捕获中心”有关光子从高能级落到低能级时发出荧光；荧光物质经某种光的照射后发出荧光的能力降低.荧光物质。
（一）荧光色素，许多物质都可产生荧光现象,但并非都可用作荧光色素.只有那些能产生明显的荧光并能作为染料使用的有机化合物才能称为免疫荧光色素或荧光染料.常用的荧光色素有：1.异硫氰酸荧光素（FITC）：为黄色或橙黄色结晶粉末,易溶于水或酒精等溶剂.分子量为389.4,最大吸收光波长为490～495nm,最大发射光波长520～530nm,呈现明亮的黄绿色荧光.其主要优点是：①人眼对黄绿色较为敏感；②通常切片标本中的绿色荧光少于红色.2.四乙基罗丹明（RB200）：为橘红色粉末,不溶于水,易溶于酒精和丙酮.性质稳定,可长期保存.最大吸收光波长为570nm,最大发射光波长为595～600nm,呈橘红色荧光.3.四甲基异硫氰酸罗丹明（TRITC）：最大吸引光波长为550nm,最大发射光波长为620nm,呈橙红色荧光.与FITC的翠绿色荧光对比鲜明,可配合用于双重标记或对比染色.其异硫氰基可与蛋白质结合,但荧光效率较低. 4.藻红蛋白（R-RE）：本品为无定形,褐红色粉末,不溶于水,易溶于酒精和丙酮,性质稳定,可长期保存.最大吸引光波长为565nm,最大发射光波长为578nm,呈明亮的橙色荧光.与FITC的翠绿色荧光对比鲜明,故被广泛用于对比染色或用于两种不同颜色的荧光抗体的双重染色.
（二）其他荧光物质，1.酶作用后产生荧光的物质：某些化合物本身无荧光效应,一旦经酶作用便形成具有强荧光的物质.甲基伞酮,后者可发出荧光,激发光波长为360nm,发射光波长为450nm.其他如碱性磷酸酶的底物4-甲基伞酮磷酸盐和辣根过氧化物酶的底物对羟基苯乙酸等.
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