但是检查的目的不是你想象的。如果你是艾滋病患者,在手术过程中对于医生、患者要采取特殊的防护措施,以免由于小的伤口导致病毒的传染。只是一种常规的手术前检查,不用担心。
一、抗核抗体测定
(Antinuclear antibody ,ANA) ANA是抗细胞核多种成分的自身抗体,无种属及器官特异性。ANA可分为抗DNA抗体、抗组蛋白抗体、抗非组蛋白抗体、抗核仁抗体及其他细胞成分抗体。这些抗体共同组成ANA谱。
抗核抗体(ANA)的检查最常用于筛查全身性风湿病和自身免疫病。ANA的检查可观察到能与细胞核内的核酸和蛋白抗原起反应的自身抗体。细胞内可能存在对多种抗原起反应的抗体。只有某种抗体的效价很高时,IFA才能加以鉴别。
1、homogenous(均质型)
又称弥散型,相应的抗原是双链DNA和组蛋白复合物。常见于SLE,特别是肾脏受累病人。也可见于其它结缔组织病,如:风湿性关节炎,MCTD,干燥综合征,硬皮病,慢性活动性肝炎及原发性胆汁性肝硬变。
2、Peripheral(周边型)
相应的抗原为双链DNA,多见于活动性SLE病人。
3、Speckle(斑点型)
主要是针对ENA的抗体,包括Sm,RNP,SSA,SSB,Scl-70。一般认为低效价的斑点型ANA不是结缔组织病特有的,实际上不代表临床异常。高效价的抗Sm抗体多与SLE有关。高效价的抗RNP自身抗体见于MCTD,但也见于SLE。抗SSA和抗SSB抗体,见于S.S,也可见于SLE。当病人有抗SSA抗体时,通常以皮肤表现和光过敏为主。,也存在于ANA阴性狼疮和新生儿狼疮。Scl-70抗体与硬皮病有关。
4、Nucleoli(核仁型)
其靶抗原是与RNA分子相关的核蛋白。多见于硬皮病。
5、Centromere(着丝点型)
抗着丝点抗体(ACA),多见于全身性硬皮病的CREST综合征。
常用检测方法为IFA、ELISA、免疫印迹法、RIA、免疫斑点法、胶体金标斑点免疫渗滤法等。其中IFA是应用较广的一种方法。一般采用鼠肝切片或Hep-2细胞为底物抗原片,当加入病人血清时,病人血清中的ANA可与细胞中相应抗原成分结合。再加入荧光标记抗人IgG,在荧光显微镜下可见细胞核内亮绿色荧光。
〖参考值〗 <1:10或阴性
〖临床意义〗
ANA阳性见于多种疾病,常用于风湿病及自身免疫病的诊断。SLE患者阳性率在95%以上,且效价常在1:80以上。在其他风湿病如RA、系统性硬化症、皮肌炎、干燥综合征 (SS)、混合结缔组织病(MCTD)等也可阳性。其他如肝病,病毒感染等也可呈低效价阳性。
〖注意事项〗
在大约1%的正常人的体内可测到低效价的非特异性抗核抗体,80岁以上老人的检出率可高达50%。高效价的ANA一般与活动期SLE密切相关。采用Hep-2细胞检测ANA,可见到不同的染色模型。
此外,口服避孕药的妇女也可检测到ANA。
二、可提取性核抗原(Extractable nuclear antigen ENA)抗体
ENA是细胞内许多小分子的RNA和多肽组成的非组蛋白的酸性核蛋白颗粒。分布在细胞质中的称为小细胞浆核糖核蛋白(scRNPs)分布在细胞核内的称为小细胞核核糖核蛋白(snRNPs)。目前已发现的有20余种,其中常用的抗ENA抗体有如下几种。
(一)抗Sm抗体
Sm是病人Smith的缩写。Sm抗原属于SnRNP,由5个RNA和多肽组成,抗原表位在29KD、28KD和13.5KD多肽上,抗Sm抗体是酸性糖蛋白,是SLE的标记抗体。
(二) 抗nRNP(u1RNP)抗体
u1RNP是u1RNA和蛋白质组成的,抗原表位在73KD、32KD和17.5KD多肽上,是混合结缔组织病(MCTD)的重要血清标志。
(三)抗SSA抗体
SS为干燥综合征的缩写。此抗体又称抗RO抗体。SSA抗原是RNA和蛋白质复合物,抗原表位在52KD多肽上,主要见于原发性干燥综合征患者及SLE。
(四)抗SSB抗体
SSB抗体常伴随SSA抗体同时出现,又称抗La抗体,SSB抗原属于SnRNP,是含有RNA和50KD蛋白质的复合物。抗原表位在45KD、47KD和48KD多肽上。与SSA抗体并存对诊断SS有特异性。
(五)抗Scl-70抗体
Scl-70抗原表位在86KD、70KD的片段上,是DNA拓扑异构酶I的降解产物,抗Scl-70抗体几乎仅见于硬皮病,阳性率30%左右。
(六)抗Jo-1抗体
Jo-1抗体是组氨酰tRNA合成酶,抗原表位在55KD多肽,抗Jo-1抗体是多发性肌炎和皮肌炎的标记抗体,阳性率25-40%。
(七)抗核糖体抗体
核糖体在核仁合成,然后转入胞浆,抗原表位在大亚基上的38KD、16KD和15KD多肽上。抗核糖体抗体阳性主要见于SLE,阳性率20-30%。
检测以上抗体的方法主要有:对流免疫电泳法(CIE)、双相免疫扩散法,免疫印迹试验(IBT),免疫斑点技术和ELISA法等。一般采用兔胸腺或牛胸腺提取物或细胞提取物作为抗原。近年来,应用分子重组抗原制备的试剂盒已投入市场。
〖参考值〗阴性
〖临床意义〗
1. 抗n RNP抗体:见于35-40%的SLE病人,在MCTD病人中阳性率可达95-100%,也可见于其他风湿性疾病。
2. 抗Sm抗体:主要见于SLE及重叠综合征,急性期病人75%为阳性。一般SLE患者30-40%阳性率。但Sm抗体阳性者90%以上为SLE,故称之为SLE的标记抗体。
3. 抗SSA和抗SSB抗体:见于40-45%的SS病人。抗SSA抗体也可见于25%的SLE病人及其他风湿性疾病抗SSA抗体与新生儿狼疮和先天性传导阻滞有关。抗SSA抗体也可见于病毒感染等非风湿性疾病。抗SSB抗体对原发性干燥综合征较特异,但阳性率仅27%左右。
4. 抗Scl-70抗体:一般仅见于系统性硬化症病人,阳性率20-60%。
5.抗Jol-1抗体见于30%的多发性肌炎病人及10%的皮肌炎病人。抗Jol-1抗体与多发性肌炎病人间质性肺炎的发生率增加有关。
6.抗rRNP 抗体:主要见于SLE患者,阳性率20%左右,与中枢神经系统病变有关,多在疾病活动期出现。
〖注意事项〗
判断试验结果时要结合临床表现作出评价,也应根据试验方法来作出解释。对流免疫电泳法和双相扩散法敏感性低,但特异性较高免疫印迹法、斑点免疫法及ELISA方法敏感性提高,但特异性相对减少。
三.抗双链DNA抗体(Antidouble-stranded DNA , A-dsDNA,)
A-dsDNA 对SLE有高度特异性,是针对细胞核脱氧核糖核酸的自身抗体。临床上常用的检测方法有:①Farr¡®s法:125I-DNA与待检标本中的A-dsDNA形成免疫复合物,加饱和硫酸铵使复合物沉淀,以γ计数器分别测定上清中游离及沉淀物中已结合的125I-DNA含量,可计算出血清中A-dsDNA的结合活性。
②ELISA法:将小牛胸腺DNA包被在微孔板中,加入病人血清,如有A-dsDNA则结合到微孔板上,加入酶标抗人IgG,加入底物显色后经酶标仪比色可知血清中A-dsDNA抗体的量。
③免疫荧光法:采用马疫锥虫或短膜虫作为基质,加入病人血清。血清中的A-dsDNA与膜上的天然DNA结合,加入荧光标记抗人IgG。马疫锥虫和短膜虫的动基体会发出绿色荧光。
④金标斑点法:双链DNA包被于硝酸纤维膜上,加入病人血清,加入金标记抗人IgG,如有A-dsDNA存在,会显示红色斑点。
〖参考值〗依方法不同参考值也有不同。
Farr¡®s法:≤ 0.20 免疫荧光法:<1:10ELISA法:依试剂盒而定,一般<70u
金标法:阴性
〖临床意义〗
A-dsDNA 阳性对 SLE 有较高的特异性。大约60%的活动性 SLE 病人会出现 A-dsDNA。其他风湿性疾病也会出现,但阳性率非常低,如RA、S.S。
〖注意事项〗
假阳性结果非常少见,但阴性亦不能排除SLE的诊断。
四.抗中性粒细胞胞浆抗体( Antineutrophil cytoplasmic antibody,ANCA) 测定
ANCA是针对中性粒细胞胞浆多种成分的 自身抗体,主要有髓过氧化物酶(MPO)和蛋白酶3( Proteinase 3 ,PR3)的抗体 。主要用于诊断Wegener 肉芽肿和系统性血管炎,特别是伴有肾病、呼吸疾病或其他类型血管炎引起多器官损害的患者。检测方法有IFA、ELISA、 IBT等。
〖参考值〗 阴性。
〖临床意义〗
免疫荧光法检查ANCA阳性一般分为两种荧光类型,一种是胞浆型,称为cANCA,一种是核周型,称为pANCA。cANCA产生弥漫性细胞浆染色,是针对PR3的抗体 ,一般见于wegener肉芽肿病(WG),特别是肾和肺受累的病人。pANCA产生核周染色,是针对MPO的抗体 ,主要见于系统性血管炎病人。
在WG病人中,cANCA阳性率在活动期可达80%,且有较高的抗体效价。在缓解期抗体阳性率低,且效价下降,或完全消失。
〖注意事项〗
ANCA 阳性也可见于 Good-Pastare¡®s 综合征和SLE病人。WG的诊断不能单纯依赖ANCA的结果,还要结合其他临床表现,试验室检查和组织病理学检查才能确定。ANCA效价不能完全反应疾病的活动以及对治疗的反应。pANCA 阳性不是特异性的抗MPO抗体,也可以是抗粒细胞胞浆中其他酶的抗体,如弹性蛋白酶,组织蛋白酶G等。ANCA检测应注意排除其他自身抗体的交叉反应,如ANA。因其可产生假阳性应注意鉴别,并进行ANA检测。
五、抗线粒体抗体(Antimitochondrial antibody,AMA)
AMA是以细胞浆中的线粒体为抗原的一种自身抗体,无器官和种属特异性。一般采用大鼠肾及胃作为抗原基质,采用IFA检测,阳性可见大鼠肾和胃的细胞浆呈现细颗粒状荧光。
采用免疫印迹法可将与线粒体抗原的反应分为从M1到M9九种类型,高效价的M2和M9型自身抗原与原发性胆汁性肝硬变相关。目前已有检测M2的ELISA试剂盒供应。
〖参考值〗 阴性 >1:10 为阳性
〖临床意义〗
AMA是原发性胆汁性肝硬化的标记抗体,阳性率达90%,并且50%患者抗体效价达1:1280或更高。此外,也可见于慢性活动性肝炎、隐匿性肝硬化。肝外阻塞性黄疸患者AMA常阴性,因此可作为鉴别诊断的一个指标。正常人中阳性率<10%,且效价较低。
六.抗平滑肌抗体(Antismooth muscle antibody,ASMA )
ASMA是抗肝细胞膜上一种肌动球蛋白的自身抗体。这种肌动球蛋白与平滑肌有交叉抗原性,因此与平滑肌有反应。一般采用IFA法,以大鼠胃作为抗原基质,阳性可见胃壁平滑肌呈现亮绿色荧光。
〖参考值〗 阴性,>1:10为阳性
〖临床意义〗
主要见于明显活动期的自身免疫性肝炎患者,阳性率在80%以上,效价 在1:80以上。急性病毒性肝炎早期ASMA也可阳性,且早于 HBsAg出现。其他疾病如传染性单核细胞增多症、SS、RA、支原体肺炎、肿瘤和病毒感染者也有不同程度的.阳性率。正常人中仅有2%阳性。
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