HIV抗体检测怎么做?HIV抗体检验一般有两种方法,一种是酶联法,第二种是快速法,测定结果仅凭特制的检测试纸在短时间内即可获得。
如何检测HIV
1、酶联法 :即“酶联免疫法”,简称ELISA。它的中心就是让抗体与酶复合物结合,然后通过显色来检测。步骤很简单:ELISA用血清来检测,首先血液要经过至少半个小时的凝集,然后取血清。将酶复合物用稀释液稀释后,加血清及阴性、阳性对照,还有质控品。经过一个小时的孵育,然后洗板,加底物,半个小时避光反应后加终止液即完成反应部分,然后读数。由数值来判断结果的阴性或阳性。
严格的讲,如果第一次检测为阳性的话,无论是哪个实验室,必须按照CDC的HIV操作规程来进行第二次检测,第二次的方法必须与第一次的不同,如还是阳性,将送艾滋病确认实验室确认。
2、快速法 :即“金标法”,又叫“胶体金法”,金标法是国际上较为先进的灵敏,特异,快速,简便,准确率高的体外诊断方法。测定结果仅凭特制的检测试纸在短时间内即可获得。金标法(艾滋病检测试纸),取血后滴在试纸上,用15分钟的时间观察该试纸有无颜色变化。
艾滋病快速检测法可以在家里自己检测,操作简单方便,不需要特殊的仪器,在艾滋病试纸上先滴两滴血,再滴一滴稀释液,然后等待15分钟读取结果。结果判读也很简单,如果试纸上出现一条红色的直线,说明是阴性,如果是两条红线,就是阳性。如果检测出现阳性,按照HIV检测流程,需要进行复测。
使用快速法(艾滋病试纸)进行艾滋病自我检测应该在专业人员指导下进行,以确保整个自测操作过程规范正确,结果准确可靠。
3、蛋白免疫印迹法(WB)
艾滋病确诊实验室常用的方法,主要用于确认试验,当初筛出现阳性时,需采用此方法进行确认实验。基本原理是HIV全病毒抗原经过SDS-PAGE电泳,将分子量大小不等的蛋白带分离开来,然后再把这些已经分离的不同蛋白带电转移到硝酸纤维素膜上。将此膜切割成条状,每一条硝酸纤维素膜上均含有经电泳分离过的HIV病毒抗原。将待检血清样品用稀释液稀释成1/100,再把它直接加到硝酸纤维素膜上,恒温震荡,使其充分接触反应。血清中若含有抗HIV抗体,就会与膜条上的抗原带相结合。加入抗人IgG酶结合物和底物后,即可使有反应的抗原抗体结合带呈现紫褐色,根据出现条带情况判定结果。
医院检测检测方法:
1、酶联法检查抗体(血清检测)
2、病毒直接检测(要有实验条件的大型医院才能做,一般的综合医院目前大都还不能做艾滋病病毒抗体的检测。费用昂贵。)
检测时间:一般检测出结果的时间需一周。
自我检测:
自测是快速法(国家征兵体检用的是快速法)
操作简单,检测试纸可以在家中进行自测。
准确效果一般在99.7%和99.8%。
检测试纸推荐:
美国AWARE(唾液检测试纸)
检测时间:一般10-20分钟就可以得出检测结果。
夏季购买时一定要选择冷链运输。因为夏季温度过高,经常会超过了HIV唾液自检产品的储存温度2℃-30℃。高温会影响生物试剂的产品性能,让产品发生变质,测试结果容易出现假阳性。
常用的艾滋病检测有:
抗体检测:HIV-1/HIV-2抗体检测是HIV 检测的金标准。经筛查试验(初筛和复检)确证试验两步。初筛实验室主要是采用酶联免疫试验、化学发光法或免疫荧光法试验。确认实验室进行复检主要是检测血清gp24及gp120抗体,灵敏度达99%,抗体初筛检测结果还要用免疫蛋白印迹法检测确认即确认试验。
抗原检测:抗HIVp24抗原单克隆抗体制备试剂,用酶联免疫法测血清HIVp24抗原。有助于抗体产生窗口期和新生儿早期感染的诊断。
病毒载量测定:病毒载量的测定可了解疾病进展,提供病毒治疗依据、评估治疗效果、指导治疗方案调整以及为早期诊断提供参考。可用荧光定量PCR扩增技术。
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