种感染性和免疫介导性疾病，以及中枢神经系统的脱髓鞘疾病，欧美国家将视神
经炎用于特指脱髓鞘性视神经病变。越来越多的研究发现：原发性或特发性脱髓
鞘性视神经炎（idiopathic demyelinating optic neuritis，IDON）是临床最为常见的北京301医院眼科魏世辉
类型[1]，50％～70％的视神经炎患者经核磁共振检查发现脑内存在无症状性脱髓
鞘病灶[2]，视神经炎患者尸检中发现有脱髓鞘斑块的存在和视神经增粗的特征[8]；
而最近国内有关视神经炎的病因学研究也发现在符合视神经炎诊断标准的患者
中，IDON最为常见，占73.5％[3]。目前众多学者致力于寻找脱髓鞘性疾病的病因，
可能的病因归为内因与外因两大类。内因中备受瞩目的是遗传因素[4]，遗传易患
因素导致对髓鞘攻击的自身免疫反应可能是视神经髓鞘损伤及脱失的原因之一，
但有关的组织损伤及细胞凋亡机制尚不十分清楚。因为白介素受体基因介导体内
白介素的信号传导，在机体免疫过程中起重要作用，近年来越来越受到重视。白
介素-2受体（interleukin-2receptor，IL-2R）和白介素-7受体(interleukin-7receptor,
IL-7R)基因目前被认为对自身免疫疾病的遗传易患性起重要作用，我们选择
IL-2R基因及IL-7R基因作为候选基因进行与IDON遗传易患性的研究。同时我们
根据国外的相关研究[5-7]选择IL-2R基因rs2104286位点和IL-7R基因rs6897932位
点进行单核苷酸多态性分析。
对象和方法
一、研究对象
患者组：连续入选2007 年9月至2009 年3月解放军总医院眼科、神经内科
门诊及住院确诊的初诊患者72 例（入组标准参考美国ONTT 研究及Leonard 提
出的IDON诊断标准[8-9]）；患者同意参加本研究并签署知情同意书。对照组：收
集同时期、同地区健康查体者81例，男48例，女33例，平均年龄34岁，均与
患者无血缘关系，近期无感染，未应用免疫抑制剂，无视神经炎、І 型糖尿病、
多发性硬化症、Grave病病史及家族史，同意参加本研究并签署知情同意书。
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二、研究方法：
1．提取基因组DNA：用真空采血管抽取患者静脉血5 ml，分离出白细胞，
离心柱法提DNA，紫外分光光度计测定浓度。
2．设计合成IL-2R 及IL-7R目的基因特异性引物（引物序列见表1）。
表1 IL－2R 及IL-7R目的基因特异性引物序列
基因名称目的基因
片断长度（bp）
特异引物序列
IL-2R 457
上游引物：5′- AAGTTGGTGAGGAGGAGAAAGGC-3′
下游引物：5′- CAGGAGCTGAAGGTTGCAGTGAG -3′
IL-7R 373
上游引物：5′-CAAAGCACCCTGAGACCCTACC-3′
下游引物：5′-CAGCGTTTGCCTAATGTCCAGT-3′
3．IL-2R目的基因聚合酶链反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）反应：15
μl体系，PCR反应条件为94℃预变性2 min，94℃变性30s、67℃退火30s、72℃
延伸30 s，共30个循环,最后72℃延伸5 min，4℃保存；IL-7R目的基因PCR反
应：30 μl 体系，PCR 反应条件为95℃预变性5 min，95℃变性30s、62℃退火
30s、72℃延伸30s，共30个循环，最后72℃延伸7 min，4℃保存。
4．限制性酶切反应：20 μl酶切体系：10×缓冲液2 μl，NDeI 0.5 μl，去离
子水7.5 μl，IL-2R目的基因PCR产物10 μl，37℃水浴4 h充分消化酶切。限制
性酶切产物经2.5%琼脂糖凝胶电泳分离后，在紫外透射仪下观察结果。
5．基因测序：IL-7R目的基因PCR 扩增产物送北京奥科生物技术有限公司
测序，Chromas 软件阅读测序图进行基因型分析。
三、统计分析
IL-2R 与IL-7R 基因型频率及等位基因频率用直接计数法，对照组与IDON
组间比较采用χ2检验，Woolf公式计算OR值的可信区间，显著检验的标准为P
＜0.05。所有数据统计均由SPSS11.5统计软件完成。
结 果
一、一般情况
IDON 组共72 例，其中男性37 例（52％），女性35 例（48％）。平均年龄
29岁（6~74岁）。10～49岁年龄段发病人数较多，以30～39岁年龄段发病人数
最多。
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二、IDON组眼部病变特点
双眼受累多见，占53％，单侧受累以左眼受累多见，占28％。49例（68％）
患者最佳矫正视力下降严重（无光感～0.1），20 例患者（28％）最佳矫正视力
中等程度下降（0.1+1～0.5），另有3例（4％）患者最佳矫正视力轻度下降（≥
0.5+1）；20～49岁青中年患者视力多严重损害。年龄大于19岁的患者中75％视
力损害为严重性（表2）。伴有额部或眼眶深部钝痛或眼球活动痛者37 例占52
％；双眼受累者双侧瞳孔散大，对光反射消失，单眼受累者仔细检查均发现患眼
RAPD阳性。
表2 特发性脱髓鞘性视神经炎患者各年龄段最佳矫正视力分布
患者年龄最佳矫正视力分布（例） 合计
≥0.1 0.1+1~0.5 ≥0.5+1
<10 3 4 0 7
10~ 7 6 0 13
20~ 13 2 1 16
30~ 15 4 0 19
40~ 11 4 2 17
三、IDON组和对照组IL-2R基因rs2104286位点单核苷酸多态性
图1 IL-2R目的基因RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism，限制性片段
长度多态性)结果分析：GG基因型不能被NDeI酶切,即酶切后仍然只有1个457
bp的片段；AA基因型为2个片段,即50 bp 和407 bp；AG基因型为3个片段，
即50 bp,407 bp 及457 bp。
AA基因型频率分别为75％、70.4％，AG基因型频率分别为20.8％、24.7％，
GG基因型频率分别为4.2％、4.9％，统计学分析差异无显著性（Fisher's确切概率
法检验P＝0.914）；A等位基因频率分别为85.4％、82.7％，G等位基因频率分别
为14.6％、17.3％，统计学分析差异亦无显著性（χ2= 0.4134，P＝0.5202）（表3）。
表 3 IDON 组和对照组IL-2R基因型和等位基因型频率分布
组别基因型分布等位基因性分布
AA AG GG A G
例数百分数 例数 百分数 例数百分数 例数百分数 例数百分数
IDON 组54 75% 1520.8% 3 4.2% 123 85.4% 21 14.6%
对照组 5770.4%20 24.7%4 4.9% 134 82.7% 28 17.3%
四、IDON组IL-7R基因rs6897932单核苷酸多态性
图2 L-7R目的基因聚合酶链反应扩增产物测序结果分析：测序图显示箭头所
指处图a为蓝色单峰，即基因型为CC；图b为蓝色、红色套峰，峰值减半，即基
因型为CT；图c为红色单峰，即基因型为TT。
CC基因型频率分别为77.8％，对照组为64.2％，CT基因型频率分别为18.1％、
25.9％，TT基因型频率分别为4.2％、9.9％进行统计学分析两组间比较差异无显
著性（χ2= 3.787，P＝0.15）；C等位基因频率为86.8％，对照组为77.2％，T等位
基因频率分别为13.2％、22.8％，进行统计学分析两组间比较有显著性差异
（χ2=4.743，P＝0.0294），OR值1.95，95％的置信区间为1.07～3.55（表4）。
表 4 IL-7R 等位基因型和基因型频率比较
组别基因型分布等位基因性分布
CC CT TT C T
例数百分数例数百分数例数百分数例数百分数例数百分数
IDON 组56 77.8% 13 18.1% 3 4.2% 125 86.8% 19 13.2%
对照组 52 64.2% 21 25.9% 8 9.9% 125 77.2% 37 22.8%
讨 论
欧美国家将视神经炎用于特指脱髓鞘性视神经病变。IDON多见于青少年或中
年，常在几天内视力急剧下降，伴有眼球转动痛或眶周疼痛，色觉障碍及视野缺
损，其年发病率和患病率分别为5/10万和115/10万[10-11]。遗传因素在IDON的发病
中起着重要作用，但不是遵循简单的孟德尔遗传方式，而是由多个微效基因共同
决定的多基因遗传病。以往视神经炎遗传易感性的研究多集中在HLA基因，近年
来随着分子生物学技术和统计学方法的迅速发展，非HLA基因如TNF基因、APOE
基因、MBP基因多态性关联研究和基因连锁分析都取得了相当的进展。IL-2R和
IL-7R有重要的免疫学作用，并且近年来的研究发现其基因多态性与多种自身免
疫疾病的遗传易患性相关，因此受到越来越多的关注。
人IL-2R基因位于第10号染色体短臂上(10p14-15)，由8个外显子和7个内含子
构成，长度至少约为51Kb。IL-2R基因rs2104286 SNP（Simple Nucleotide
Polymorphism）位于1号内含子。IL-2的产生和IL-2R的出现在免疫应答的全面展
现中是至关重要的事件，IL-2R有促进T细胞有丝分裂，增强T细胞及NK细胞的
杀伤功能以及辅助抗体生成的作用[12]。Sharfe[13]等发现IL-2R基因缺陷的患者，4
个bp的缺失会引起蛋白翻译过程中的移码突变。Vella[14]等对1型糖尿病进行的大
规模的病例－对照研究发现IL-2R的基因多态性与І型糖尿易患性显著相关，随后
Lowe[15]进行了更深入的研究将与T1DM易患性相关的位点定位在1号内含子和
启动子区。Brand[16]的研究发现Grave病的遗传易患性与T1DM类似与IL-2R基因
多态性显著相关性,作者认为IL-2R基因可能是自身免疫类疾病的共同的易患基
因。Hafler 等[5]通过大规模的全基因组扫描研究发现：IL-2R基因1号内含子的两
个SNP与多发性硬化（multiple sclerosis，MS）的遗传易患性显著相关。
我们的结果显示IL-2R基因1号内含子内rs2104286存在单核苷酸多态性，
IDON组与对照组的IL-2R基因型和等位基因型存在差异但差异无显著性,我们考
虑有如下可能：（1）样本量较小；（2）rs2104286 A等位基因可能不是IDON的易
患性增加的危险等位基因。尽管国外关于MS、T1DM、Grave病的研究发现IL-2R
基因与这类自身免疫疾病的易患性显著相关，但IDON可能在发病机制上存在自
身特殊的机制；(3)MS、T1DM、Grave’s病的遗传易患性与IL-2R基因的多态性相
关，但相关的SNP位点不尽相同，我们此次检测的为与MS的易患性最为相关的
位点，可能存在其他与IDON易患性相关的SNP位点；（4）人种差异：国外相关
研究的研究对象为多高加索人种，而本研究的对象为蒙古人种。
IL-7R基因位于5P13,共含有8外显子7内含子，全长20kbp。位于6号外显子的
rs6897932位点SNP（C/T）为非同义编码SNP。有研究证实[6]rs6897932位点为等
位基因C者可比等位基因为T者使IL-7R基因转录时跳过6号外显子的几率增加2
倍，其原因可能为C等位基因减弱了外显子剪接增强子或增强了外显子剪接沉默
子，后者的可能性较大。将rs6897932位点替换成G或A都会降低6号外显子跳跃
剪切的可能性，而置换该位点旁的单核苷酸，则会终止此跳跃剪切。而蛋白翻译
过程中含有6号外显子形成膜表面型受体，而6号外显子缺失则会翻译成可溶性
IL-7R受体[17]，因此C等位基因者容易引起可溶性IL-7Ra的表达增高，并影响IL-7
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的信号传导，最终导致调节性T细胞在胸腺的成熟障碍。可溶性IL-7R水平2倍的
增加，会引起免疫活性的显著改变，膜结合型与可溶性IL-7R比例的改变会影响
IL-7R的信号传导，使抗原反应性T细胞对髓鞘蛋白的反应增强[18]。并且因为B及
T细胞的分化成熟障碍，携带危险等位基因C者更容易感染，而细菌或病毒感染
被认为是IDON患病的重要外因。
我们对IDON组和健康对照组IL-7R基因型频率及C/T等位基因频率进行分析
比较发现：CC基因型在IDON组和对照组含量最高，其次是CT基因型，TT基因
型含量最低；CC基因型在IDON组和对照组含量差异较大，达13.6％（IDON组77.8
％，正常对照组的64.2％），但进行统计学分析两组间比较差异无显著性；IDON
组C等位基因频率为86.8％，高于对照组C等位基因频率77.2％，进行统计学分析
两组间比较有显著性差异（χ2=4.743，P＝0.0294），OR值为1.95（95％CI:1.07～
3.55）。我们推测等位基因C可能是使IDON易患性增加的危险等位基因，C等位基
因者患IDON的风险较T等位基因者高；但IDON组与对照组的IL-7R基因型频率比
较差异无显著性，我们考虑与我们目前的样本量小有关。IL-7R基因多态性是目
前检测到与MS相关性最高的非HLA基因，我们对IL-7R 6号外显子内的rs6897932
基因多态性的研究结果与国外对MS遗传易患性的研究结果类似；而IDON与MS
关系密切：二者具有共同的病理改变，视神经炎目前是MS最常见的临床诊断依
据之一，有15％～25％的MS患者以视神经炎表现起病，另有35％～40％的MS
患者在病程中的某一阶段发生视神经炎[19]，因此我们考虑IDON与MS在免疫遗传
学机制上存在类似的机制。但我们的样本量较小，95％的致信区间明显大于国外
大规模的调查研究结果，在下一步的研究中，我们需进一步扩大样本量来进一步
验证我们的结果。
目前国内有关IDON遗传易患性的研究相对较少，与IL-2R及IL-7R基因多态
性的相关研究更少见报道。在今后的工作中，我们将进一步的扩大样本量来验证
我们目前的结果，同时也将进行白介素受体表达水平与IDON病程、视力下降程
度、临床症状体征及视野、电生理等辅助检查之间关系的研究，探讨不同基因型
及等位基因型与白介素受体功能的关系。
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