精液的保存按保存温度可分为常温(10~14℃)保存、低温(0~5℃)保存、冷冻(-79~-196℃)保存。
(1)常温保存
用于常温保存的精液,可用含有明胶的稀释液进行稀释。将稀释好的精液盛于无菌、干燥的试管中,然后加塞盖严,封蜡隔绝空气即可。该法保存48小时,活力为原精液的70%。
RH明胶液配方:柠檬酸钠3克,磺胺甲基嘧啶钠0.15克,后莫氨磺酰0.1克,明胶10克,蒸馏水100毫升。
(2)低温保存
低温保存时要注意缓慢降温。可以将盛精液的试管外边包上棉花,再装入塑料袋内,然后放入冰箱中。一般此法可保存1~2天。
(3)冷冻保存
将精液用乳糖、卵黄、甘油稀释液按1∶1~3稀释后,放入冰箱(3~5℃)平衡2~4小时。然后,在装满液氮的广口保温瓶上,放一铜纱网(距液氮1~2厘米)。几分钟后待温度降至恒温时,将精液用滴管或细管逐滴滴在纱网上,滴完后经3~5分钟,用小勺刮取颗粒,收集好,立即放入液氮中保存,作好标签进行标记。冷冻精粒在超低温条件下,可长年保存而不变质。
精液冷冻保存是利用液氮(-196℃)或其他制冷设备作为冷源,将精液经过特殊处理后,保存在超低温的环境中以达到长期保存的目的。是动物品种遗传物质长期保存的一种方式。目前普遍使用液氮作为精液冷冻保存的冷源。液氮是氮气在降温压缩条件下形成的一种无色、无味、无毒的液体、沸点为-195.8℃;液氮性不活泼,渗透性很弱;无彻底杀伤生物细胞的能力,故精子、细菌、微生物等均能在其中生存;液氮还具有温度低、体积小、便于运输的特点。
冷冻精液目前通用的剂型有塑料细管和颗粒两种剂型。
塑料细管型
优点是可大批生产、产品质量均匀、可避免液氮对精液的污染。每个细管上都应印有种畜的品种、名号、批号及出厂日期。现比较流行的有0.25毫升和0.5毫升两种型号。
颗粒型
所需设备简单、体积小、便于贮存。但缺点是容易污染、产品不规格、不易标记。
精液冷冻工艺流程为:采精—精液品质检查—稀释分装—平衡—检查冻前活力—液氮冻结—抽样解冻并检查活力—置液氮内保存。
精液的解冻:细管型冻精解冻时可直接置于35~40℃温水中,待冻精溶化一半时取出备用。颗粒型冻精解冻有干解冻和湿解冻两种:干解冻是先将灭菌细管置于35~40℃水中恒温后,投入冻精颗粒,摇动至完全溶化,同时加入1毫升20~30℃的解冻液;湿解冻是先将盛有1毫升解冻液的安瓿置于35~40℃的水中恒温,再投入颗粒冻精,摇动至溶化取出备用。
欢迎分享,转载请注明来源:优选云