做ELISA的关键步骤是什么?

做ELISA的关键步骤是什么?,第1张

ELISA关键是订一个可靠的试剂盒。

如果盒子已经订了,剩下的就是自己操作了。

一个,尽量用八道或者十二道移液器加样。对于相同的试剂,经如二抗,酶,显色液,终止液等。

另一个,自己的样品,因为每一孔的样品不一样,用排枪加有些麻烦,如果一次的样品比较少,而自己加样又比较快,可以一个孔一个孔的加,但如果想一次把96或者48T的做完,可以先摆好一些PCR管或者准备一个96孔细胞培养板。将自己的样品先加到PCR管或者培养板中(此板间距与酶板板相同)。记得加一定的余量,如一次加样是50ul,可以先加70ul。加完后再用排枪加样,这样可以缩短加样时间,减小每个孔间的时间误差。

另一个,如果有多余的孔,标准品孔可以做复孔,在自己的样品前加一次标准品,加完样品后再加一次标准品。

如果孔不够,那么可以将标准品放在样品中间加(比如先加四十个孔,加完标准品再加五十孔)

1、用OVA(卵清蛋白)做一些哮喘,过敏性肠炎的模型,后来会检测粘膜特异性的sIgA以及血清里面IgG,IgE等指标。

2、对于一些小分子的检测,比如前列腺素、糖皮质激素的检测,我的理解是要用竞争法ELISA去检测,也要采用这个方法的盒子。一般细胞因子的检测,都是采用常规的夹心法ELISA检测,因为因子分子量比较大,一般10几个KD左右,很容易找到两个或者多个抗原表位。而小分子很难找到两个不同的表位,也就决定了包被抗体和检测抗体无法同时结合小分子并固相化。解决方案就是酶标板上包被二抗,每个孔加入一定量的酶标的小分子,然后加样品,再加不带标记的检测抗体,显色底物。样品的目的小分子的含量越高,吸光度越低。

3、对于胰岛素的检测。

4、做实验面向的ELISA试剂盒种属主要是人,大鼠和小鼠,现在市面上鸡、牛、马、羊、兔各种指标的盒子都有售,真不知道这些抗体是怎么来的。这些炎症指标还是有很大种属特异性的。

5、好多人有个误区,拿来一个指标就想当然地尝试用ELISA去检测,其实应该多动脑,该检测活性的检测活性,该做western的做western。ELISA试剂盒检测方法简单,灵敏度高。


欢迎分享,转载请注明来源:优选云

原文地址:https://54852.com/hy/842794.html

(0)
打赏 微信扫一扫微信扫一扫 支付宝扫一扫支付宝扫一扫
上一篇 2023-06-27
下一篇2023-06-27

随机推荐

  • 莱珀妮气垫好用吗 史上最贵气垫油皮慎入

    气垫这股风潮可谓是越刮越大,众多欧美大牌纷纷效仿接二连三的推出气垫产品,就连贵妇中的贵妇莱伯妮也坐不住了,推出了这款史上最贵气垫!这么贵的价钱当然得做足功课才能买,下面我带大家来看一下莱珀妮气垫好用吗?莱珀妮气垫好用吗油皮慎入哦。这

    2023-12-14
    100400
  • 十大最好粉底液推荐

    我是一个小仙女,对于粉底液用过许多。很多人想要提亮肤色,出门有气质,都会化一些淡妆来修饰自己的肌肤,其中粉底液来打底是少不了的,而选择适合自己的一款粉底液是很重要的,市场上有很多的粉底液品牌比较出名,大家可以根据自己的肤色来选择。下面我推荐

    2023-12-14
    19700
  • 迪奥最新贵妃包没有四个脚钉

    尊敬的客人,关于您提到的迪奥最新贵妃包没有四个脚钉的问题,我们可以从以下几个方面进行解答。首先,迪奥最新贵妃包确实存在没有四个脚钉的情况。这是因为迪奥品牌在设计贵妃包时,会根据不同的材质、风格和款式来进行设计,因此有些款式的贵妃包可能不会采

    2023-12-14
    25700
  • ahc在韩国什么档次AHC哪款产品好用

    AHC属于偏高端的化妆品。AHC是隶属韩国CARVER KOREA化妆品集团,为韩国美容专业线高端品牌,也是功效性化妆品牌。AHC的品牌理念是,让所有人在家也能享受到专业美容沙龙的尊贵体验。美容店是经常使用的,不是一个很受欢迎的品牌,本地产

    2023-12-14
    15600
  • 化妆品研发工程师的工作内容_化妆品研发技术员工作内容

    化妆品是人们生活中的日常用品,能够有效应对人们皮肤起到有益的一面,例如去皱精华可以有效有效抹平细纹,粉底可以遮住瑕疵。因此化妆品受到了人们的广泛的使用,但化妆品还会给人们的皮肤带来副作用,影响到人们的身体健康。针对化妆品给人们带来的困扰和问

    2023-12-13
    22900
  • 美白效果好的护肤品有什么副作用

    美白效果好的护肤品是每个人都渴望拥有的,但是很多人都不知道这些护肤品有哪些副作用。事实上,大多数美白产品都含有一些化学成分,如果使用不当,会对皮肤造成不良影响。所以,在购买美白产品之前,一定要了解清楚这些产品的成分和使用方法。首先,我们需要

    2023-12-13
    16100
  • 宝宝用弱酸性的面霜可以吗,含尿囊素的面霜婴儿可以用吗

    爸爸妈妈在给自己宝宝购买一些护肤品时是比较谨慎的,因为宝宝的肌肤是很娇嫩的,若是用了对宝宝肌肤有刺激的护肤品,那么对宝宝的皮肤伤害是比较大的。所以爸爸妈妈在购买护肤品时,一般情况下是购买那种无香味、防腐剂的护肤品。那么,宝宝用弱酸性的面霜可

    2023-12-13
    23100
  • 足贴是不是遇36度以上的温度都会出油

    不一定,足贴发黑发油虽然是物理现象,但真假其实有别。1、真的足贴成份一般是紫红色,遇水后自然会变色,就像平时烹饪,放到锅里的料包一样,料包里有花椒和大料等,都是深色的,所以遇到水,自然料包会变黑色。2、好的足贴遇水会变黑,但并不会发油,而假

    2023-12-13
    16600
  • 如何做好化妆品销售

    如何做好化妆品销售如何做好化妆品销售,化妆品销售人员要有自然自信、亲切真诚、认真负责、轻松融洽的销售态度才能使顾客信任并购买产品。以下分享如何做好化妆品销售,希望能够对大家有所帮助。如何做好化妆

    2023-12-13
    15700

发表评论

登录后才能评论
保存