革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,1884年由丹麦医师Gram创立。细菌先经碱性染料结晶染色,而经碘液媒染后,用酒精脱色,在一定条件下有的细菌不脱色,有的可被脱去,因此可把细菌分为两大类,前者叫作革兰氏阳性菌(G+),后者为革兰氏阴性菌(G-)。为方便观察,脱色后再用一种红色染料如碱性蕃红等进行复染。阳性菌仍带紫色,阴性菌则被染上红色。芽孢杆菌和绝大多数球菌,以及所有的放线菌和真菌都呈革兰氏阳性反应;弧菌、螺旋体和大多数致病性的无芽孢杆菌都呈革兰氏阴性反应。
两者的区别:①细胞壁组成成分不同。革兰氏阳性菌细胞壁含大量的肽聚糖,含磷壁酸,不含脂多糖;革兰氏阴性菌含极少肽聚糖,含脂多糖,不含磷壁酸。两者的不同还表现在各种成分的含量不同,尤其是脂肪含量明显不同,革兰氏阳性菌脂肪含量为1%~4%,革兰氏阴性菌脂肪含量为11%~22%。
②细胞壁结构不同。革兰氏阳性菌细胞壁较厚,为20~80纳米,结构较简单。革兰氏阴性菌细胞壁较薄,为10纳米,其结构较复杂,分为外壁层和内壁层;外壁层又分3层,最外层是脂多糖,中间是磷脂层,内层为脂蛋白,内壁层含肽聚糖,不含磷壁酸。
凡被染成紫色的细菌称为革兰氏阳性菌(G_菌)染成红色的称为革兰氏阴性菌(Gˉ菌)。革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的细胞壁结构显著不同,导致这两类细菌在染色性、抗原性、毒性、对某些药物的敏感性等方面的很大差异。
1.革兰阳性菌细胞壁特殊组分胞壁较厚(20~80nm),由内向外有
肽聚糖含量丰富(15~50层),多层聚糖骨架通过四肽侧链、五肽交联桥,组成坚韧的三维立体框架,结构致密。
磷壁酸革兰阳性菌的特殊组分。大量磷壁酸以长链形式穿插于肽聚糖中,一端结合在细胞壁上的称壁磷壁酸,结合在细胞膜上的称膜磷壁酸或脂磷壁酸(LTA),另一端游离于肽聚糖层外。磷壁酸抗原性强,是革兰阳性菌重要的表面抗原;有类似菌毛样的粘附特性,与致病性有关。溶菌酶可破坏肽聚糖的聚糖骨架,引起菌体裂解。青霉素能干扰五肽交联桥与四肽侧链D-丙氨酸之间的连结,导致细菌死亡。
表面蛋白某些细菌表面存在有特殊蛋白质,例如:A族链球菌--M蛋白,金黄色葡萄球菌--A蛋白。
2.革兰阴性菌细胞壁特殊组分胞壁较薄(10~15nm),结构较复杂,由内向外有肽聚糖含量少(1~2层),无五肽交联桥,由不同聚糖骨架上的四肽侧链进行交联,呈疏松的二维结构。外膜8~10nm,为革兰阴性菌特有,包括脂蛋白、脂质双层、脂多糖三部分。脂多糖(LPS)是革兰阴性菌的内毒素,又由三种成分构成:脂质A(LipidA)为一种糖磷脂,是内毒素的毒性部分,与其致病性有关。核心多糖是属特异性抗原。寡糖重复单位革兰阴性菌菌体抗原(O抗原),具有种特异性。
革兰阳性菌和阴性菌细胞壁结构显著不同,导致这两类细菌在染色性、抗原性、致病性、对药物敏感性等方面差异很大。
革兰阳性菌与革兰阴性菌细胞壁的比较
结构 革兰阳性菌 革兰阴性菌
细胞壁厚度及强度 较厚、较坚韧 较薄、较疏松
肽聚糖含量 丰富(占胞壁干重50%~80%) 较少(占10%左右)
磷壁酸 有 无
外膜 无 有
对溶菌酶、青霉素敏感性 敏感 不敏感
欢迎分享,转载请注明来源:优选云