1ng = 10负九次方g
1pg=10负十二次方g
1fg = 10负十五次方g
这个要看引物片段的大小。不同片段长度的引物分子量不一样,等摩尔量的引物质量也就不一样。按照20bp来估算的,分子量大概是6600。所以质量=(10E-6)*10*(10E-6)*6600=6.6*10E-8 g=6.6*10E-2 μg=0.066μg。1OD大约是33ug,用来做实时荧光PCR的吧,量不多买2OD就足够了。
上海吉玛公司文档里有这么个公式对于一个21 bp的siRNA oligo,有如下简单关系:1 OD duplex=3.0 nmols=40 ug
1. 如何确定需要合成多少nmol值的引物?
根据实验目的确定。以20个碱基左右引物为例:常规PCR扩增,可选择5nmol(约合1OD),可做200次50μl标准PCR反应;基因拼接或退火后做连接,可选择5nmol(约合1OD)。
2. 如何测定引物的OD值?
合成引物的OD值是这样测定的:用紫外分光光度计,波长260nm,石英比色杯,光程为1厘米,测定溶液的光密度。测定时溶液的光密度尽量稀释到0.2-0.8之间。DNA干粉用一定体积的水充分振荡溶解以后,用1ml水稀释测OD值。需要根据稀释倍数换算出母液的OD值。例如,验证2OD引物量是否准确,简单的做法是:加入1ml水,彻底溶解混匀后,取100μl, 加入900μl水,用光径为1cm的石英比色杯,波长260nm,此时光吸收的读数为0.2。
欢迎分享,转载请注明来源:优选云