一、细针抽吸(fine-needle aspiration, FNA)
细针抽吸主要运用在怀疑有肿瘤疾病的小动物身上。尤其是对多发的肿块和淋巴性疾病。细针抽吸的主要过程:用长度合适的细针(23至25号针头)抽取肿块内的单一细胞悬液。针头可与10或者是20毫升的注射器相连,注射器要求干燥无菌。通过细针抽吸可采取通过FNA可采集多部位的组织样本,包括皮肤和皮下组织、深部或浅表淋巴结、脾、肝、肾、肺、甲状腺、前列腺以及腹腔内来源不明的肿块(如纵隔肿块)。如果抽取浅表部位,抽取部位无需消毒,如果抽取内部的器官,抽取部位需要经过剪毛消毒。
细针抽吸图示
将带针头的注射器刺入肿物内,连续抽吸3-4次,恢复到原位。拔出注射器,一般情况下,注射器内看不见所采的组织样品,仅针头内的就可以满足需要,可以涂抹3-4张质量优良的片子。将采取的组织制作好以后,进行染色,一般为diff-quick染色。细针抽吸可以诊断个别的肿瘤性疾病如肥大细胞瘤。但不能了解肿块的病理特点,如乳腺肿瘤,不能用细针抽吸的方法代替病理学检查。
A液作用为固定载玻片上面的样品,B液为红色染嗜酸性细胞,C液为蓝色,使嗜碱性细胞着色。A液染色时间为10-20秒,B液为5-10秒,C液也为5-10秒。染色时间根据染色效果可以适当增加或者是减少。染色后将瓶盖旋紧,防止挥发。该染色可运用于血涂片、细胞学涂片,粪便和尿液沉淀图片。
二、皮肤组织活检
皮肤病变诊断的具有说服意义的方法。分为打孔组织活检和切除活检。组织活检应结合病史,动物种类,临床症状,活检取出样品的位置,用药史等信息结合起来才具有重要意义。
1.打孔活检
图一打孔活检示意图
图二为组织活检打孔器
组织活检打孔器分为3mm,4mm和6mm,8mm。3mm和4mm孔径用于鼻镜和脚垫的活检。6mm和8mm孔径可用于皮肤和其他组织的活检。
组织活检具体过程:将活检针放置到活检部位上,在按压作用力下顺时针旋转活检针切入皮肤。切头全层皮肤后用镊子轻轻夹住活检皮肤组织,提起后使用手术刀或者是手术剪剪短皮下组织。迅速将切下的皮肤组织样本放入福尔马林保存液中,采样后皮肤为一椭圆型空洞,可以让其自己愈合或者缝合一针。在皮肤病变和正常部位交界处采取样品。如果病变大面积,需要在多个部位采取样品。如果是在动物敏感部位采样,可进行全身镇静或者局部麻醉。
2.切除活检
就是肿物切除后采取组织进行病理检查。
三、微生物的培养
真菌的培养
DTM/ESA廯菌培养基
该培养基分为两部分,为不同的培养基。
DTM廯菌快速培养基。颜色较浅,偏橙色。透明,其中含有抗生素成分,可最大程度的抑制霉菌和污染菌的生长。廯菌生长后培养基变红。ESA促分生孢子培养基,颜色较深,偏土黄色,不透明。可最大限度抑制霉菌和污染菌的细菌生长,并可更容易让廯菌产生大分生孢子用于鉴别。廯菌生长后培养基变为蓝绿色。可能会出现假阳性的结果。出现阳性结果后,需要注意廯菌菌落的生长类型,判断可能的感染来源。结合染色(可只使用diff-quick染液的c液)在显微镜下观察判断大分生孢子类型。
显微镜下的大小孢子菌
当进行深层皮肤刮擦时,重要的是要避免疤痕,纤维化和溃疡的区域。建议在有黑头的区域刮擦皮肤。在这个过程中,应沿着毛发生长的方向挤压皮肤直到毛细血管出血。对于一些无法通过皮肤刮擦法来诊断的狗狗来说,拔毛可能是一种适合的替代方法。
皮肤活检。在大多数情况下,如果处理得当,可以在皮肤刮擦处发现螨虫。可能还会观察到沙眼、利克肉芽肿和伴有深层脓皮的严重足皮炎。在这些情况下,皮肤活检可能是必要的,以作出更准确的诊断。
组织病理学分析。这项测试可用来发现毛囊炎、毛囊周炎和化脓性肉芽肿浸润。
犬蠕形螨病的深入治疗
目前对蠕形螨病的治疗形式有三种。它们是:双甲脒浸泡、美倍霉素疗法和伊维菌素疗法。
Mitaban(一种国外药物,又叫做双甲脒)是美国FDA批准的治疗蠕形螨病的唯一药物。批准的方案是:每两周使用一次,直到连续三次每两周的皮肤刮擦测试结果呈现阴性。然而,根据以前的研究结果,大多数兽医会每周都给狗狗使用一次Mitaban,而不是每两周使用一次。增加的频率显著提高了这种疗法的效果。
这种混合物(1瓶/兑7.5升的水)应该每周都定时配置,不应该储存和重复使用。治疗应在通风良好的地方完成,治疗时必须戴手套。
中/长毛发的狗应剪短毛发。狗狗在下水前应该先洗澡。建议使用滤泡冲洗剂(过氧化苯甲酰洗发水)来提高Mitaban的功效。
大多数狗需要6-9次浸渍才能有呈阴性的皮肤刮擦测试结果。但不要在首次出现阴性后就停止治疗,应该在直到获得连续三次阴性结果后才可停止。此外,狗狗不应在用药之前被弄湿,也不应该在用药的当天服用镇静剂。
Mitaban会让25%-50%的玩具品种受到副作用的影响。不良反应包括:抑郁、厌食、呕吐、瘙痒、体温过低、蹒跚、心率过慢、镇静、高血糖和死亡。壮阳碱可用作Mitaban毒性的逆转剂。
每天1.5-2.5mg/kg的美倍霉素是蠕形螨病的另一种治疗方法。一般的狗需要90天的治疗时间。美倍霉素具有与伊维菌素相同的潜在不良反应,因此在伊维菌素敏感的犬种中应慎用。
伊维菌素每天的服量是:200-600微克/公斤,一直用到皮肤刮擦测试连续3次呈阴性。该药的疗效依赖于剂量。建议在使用期间逐步增加剂量,记住要“逐步”,以尽量减少严重不良反应的发生。它不应该用于对伊维菌素敏感的品种身上,如牧羊犬、喜乐蒂犬、澳大利亚牧羊犬和其他品种。监测治疗包括从5个有代表性的部位下手,包括:口鼻和脚趾之间的2个部位,并进行定期刮擦测试。这是许多兽医选择的治疗方法。他们刚开始会每天给狗狗用药,并直到症状消退,然后逐渐在2至3个月里断药。
莫西克丁也被推荐使用,并也有较好的疗效。
维生素E已被用作免疫调节剂,以作为上述标准疗法的辅助治疗。
建议使用抗生素,以治疗继发性皮肤感染和脓皮病。
记录螨数,每30天在相同部位及新的病发区域内重新进行刮擦测试。治疗应持续至少30天,并直到有连续3次的阴性结果,才可停止治疗。
重要的是要记住,除了消灭螨虫,还要解决继发性皮肤细菌感染,并确保没有并发疾病,因为某些并发疾病会降低狗狗接受治疗的反应能力。
狗螨虫病的后续护理
幼年发病型蠕形螨病通常是遗传的,因此受影响的狗不应用于育种。而对于成年发病形式蠕形螨病,暂无预防它的措施。
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