在2020年的12月,除了在世界范围内引起广泛传播的新冠肺炎病毒外,在非洲的一个小镇上,一名女性患者出现了呕吐、腹泻、高烧等出血热症状。开始医护工作人员以为这名患者是埃博拉病毒的感染者,对其进行了严密的隔离和治疗,但在患者的多次病毒检测中,却没有发现埃博拉病毒抗原呈阳性的检测结果,目前该患者的致病原因仍不清楚,因而暂时将其命名为X疾病。
患上X疾病的患者,会出现于埃博拉病毒感染者类似的症状,如高烧、腹泻,组织出血等症状,同时该疾病的致死率也十分高,患者死亡概率在50%-90%之间。目前最大的问题,还是医学工作者对于X疾病的病原体并不了解,无法定位患者的致病原因,也就无法采取针对性的治疗措施,对于病原体的传播和预防也就无法开展,这些都是X疾病更加令人担忧的事情。
尽管目前医学工作者对于X疾病的致病原因还在筛查中,但相信通过分子医学技术的支持,对致病因子的调查也将很快水落石出。非洲地区国家普遍处于经济落后地区,国家和社会的医疗保障水平远远不够,而受制于各种传统习惯的原因,人类的生存环境与野生自然环境并没有严格的分界点,许多乡镇地区甚至就处在野生的自然环境当中,人类与野生动物的交流也十分密切,这给一些细菌和病毒由动物传播到人体提供了十分有利的条件。
十年前在中国肆虐的SARS病毒经调查,是从野生果子狸传到人类当中的。2020年初在中国爆发的新冠病毒,在野生的蝙蝠个体上也能找到基因序列十分相似的样本。这表明,对于野生动物个体上存在的细菌和病毒,对于人类也许是十分致命的,如果条件允许,我们不但应该保护野生动物的生存环境,同时也应与野生动物保持一定的距离。也许某个能与野生动物和平共存的细菌和病毒,来到人类社会,就会成为十分致命的致病原。
病毒名称:马铃薯X病毒Potato virusX(PVX)。
分类地位:马铃薯X病毒属Potexvirus。在国际病毒分类委员会(ICTV)中的编码为00.056.0.01.018。
病毒异名:Potato latent virus,Potato mild mosaic virus,Potato simple mosaic virus,Potato virus 16,Solnum virus 1
病毒提纯:病叶加0.01mol/L(pH.7.0)冷柠檬酸盐缓冲液(含0.2%硫代乙醇酸thioglycolic acid),在高速打碎机中,研磨3min,纱布过滤,加30%氯仿搅拌3min,3000r/min离心15min,上清液加6%PEG(6000),低温下搅拌1h,4℃孵育1h,6000r/min,离心15min,沉淀溶于 30ml0.01mol/L柠檬酸盐缓冲液,高速离心(29000r/min离心90min),沉淀再溶于2ml0.01mol/L柠檬酸盐缓冲液,8000r/min离心15min,去除不溶物,得乳白色上清液,进一步经10%~40%(用0.01mol/L柠檬酸盐缓冲液配制)蔗糖密度梯度离心(23000r/min离心150min),离心前,梯度液放4℃过夜,取出病毒带,再29000r/min离心120min,得提纯液,提纯产量为0.59mg/ml。
病毒理化特性:
①病毒粒子:线状,530nm*11nm,沉降系数117.7S,等电点pH4.4,分子质量35*106u,A260/A280为1.2。
②核酸:含量6%,单链RNA,分子质量2.1*106u(Artyukova et al.,1985),G∶A∶C∶U=22∶32∶24∶22。
③蛋白:含量94%,3组成,分子质量29*103u、27*103u和23*103u(Artyukova,1985),氨基酸组成:Ala13.4,Arg6.3,Asp11.3,Glu9.4,His1.2,Ileu5.5,Leu5.1,Lys6.4,Met4.2,Phe7.3,Pro7.2,Ser6.4,Thy13.8,Tyr1.4,Val6.2。
株系:可分为3类株系:弱致病性株系、中等致病性株系和强致病性株系。弱致病性株系侵染,马铃薯无明显症状,鉴别寄主不系统发病;中等致病性株系侵染,马铃薯表现不同的鲜艳的花叶;强致病性株系侵染,出现坏死花叶,病株矮化。以上株系,接种鉴别寄主(曼陀罗和烟草等),接种叶先产生局部浅色同心环,随后上部叶坏死,畸形,芽坏死和脱落,病株矮化,最后病死。马铃薯通常由多种株系复合侵染。有些品种只被一类株系侵染,如Kobbler品种仅为强毒株系,而Oraby品种只为中致病性株系侵染。弱致病性株系分布在原苏联的北部地区(如Khabarovsk,Magadan和Kamchatka的北部以及Sachalin北部)而强致病性株系常分布在滨海边疆区和伯力以南(Romanova,Reifman,1981)。
其他:马铃薯X病毒是Potexvirus属的典型成员。马铃薯X病毒和马铃薯Y病毒复合侵染大田的马铃薯,表现粗缩花叶、条纹花叶、叶皱而小、坏死、病株矮化。人工复合接种烟比马铃薯X病毒单独侵染的花叶更严重(Hamelink et al.,1985Kumthong,1987)。
病毒名称:仙人掌X病毒Cactus.virusX(CVX)。病毒提纯:在昆诺藜病株汁液中,加入抗坏血酸(达2%)和亚硫酸钠(达2%),根据所用的毒株调节汁液pH至6.5、7.0或8.0,与等体积的乙醚混合,摇匀,低速离心,除去乙醚相。水相和等体积四氯化碳混合,摇动5min,低速离心,倾去四氯化碳相,在水相中加入正丁醇(达8%,V/V),在4℃下静置混合液16h,用四氯化碳重复处理,通过两次差速离心沉淀和澄清,用0.05mol/L(pH7.5)柠檬酸钠重新悬浮沉淀。病毒理化特性:①病毒粒子。略弯线状,480~520nm×13nm(王树琴等,1986)。②核酸。单链RNA,分子质量2.1×10^6u.(Koenig,1971)。③蛋白。分子质量2.0×10^4u(Koenie,1971)。株系:已发表3个株系,它们的血清学不同,有些不同的分离物,在枯斑寄主上的反应也不同。
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