粗多糖的提取中,用了6次的EDAE凝胶层析柱流速过慢,怎样去活化?

粗多糖的提取中,用了6次的EDAE凝胶层析柱流速过慢,怎样去活化?,第1张

EDAE是哪种凝胶柱?

是不是弱阴离子交换柱DEAE?

如果是DEAE的话给你一点清洗的参考

一,在位清洗

1, 用2M的NaCl至少清洗2个柱体积。

2, 用1M的NaOH 至少清洗4个柱体积。

3, 用2M的NaCl至少清洗2个柱体积。

4, 用至少2个柱体积的蒸馏水润洗层析柱。

二,去除沉淀的蛋白质:

1, 注入一个柱体积的胃蛋白酶(1mg/ml in 0.5M NaCl,0.1M acetic acid)。室温过夜或37°作用1小时。

2, 用至少2个柱体积的蒸馏水润洗层析柱。

3, 用至少4个柱体积的储存缓冲液冲洗。

也可以选用如下操作

1, 用6M盐酸胍冲洗2个柱体积。

2, 立即用pH7-8的缓冲液冲洗至少5个柱体积。

3, 用至少2个柱体积的蒸馏水润洗分离柱。

4, 用至少4个柱体积的储存缓冲液冲洗。

三,去除脂类,疏水结合蛋白质或脂蛋白:

1, 如需彻底除去此类污染物,可使用有机溶剂或去污剂。

2, 在使用有机溶剂前,用蒸馏水冲洗填料至少4个柱体积以避免盐类沉淀于层析柱中。

3, 在使用有机溶剂或溶液时,需要减小流速以避免分离柱超压。

4, 清洗溶液最大浓度如下,100%的异丙醇,100%的甲醇,100%的乙腈,2M的氢氧化钠,75%的乙酸,100%的乙醇,离子性或非离子型去污剂。

5, 避免使用阴离子去污剂。

"EDTA用途很广,可用作彩色感光材料冲洗加工的漂白定影液,染色助剂,纤维处理助剂,化妆品添加剂,血液抗凝剂,洗涤剂,稳定剂,合成橡胶聚合引发剂,EDTA是螯合剂的代表性物质。能和碱金属、稀土元素和过渡金属等形成稳定的水溶性络合物。此外EDTA也可用来使有害放射性金属从人体中迅速排泄起到解毒作用。也是水的处理剂。"

摘自http://zhidao.baidu.com/question/10967617.html?si=5

按上面所说,EDTA无明显毒副作用,不用处理。

加入水是为了稀释溶液到需要的比例浓度,以满足实验配制要求。一、实验目的

(1)、掌握EDTA标准溶液的配制与标定方法。

(2)、掌握铬黑T指示剂的应用条件和终点颜色变化。

二、实验原理

EDTA(Na2H2Y)标准溶液可用直接法配制,也可以先配制粗略浓度,再用金属Zn、ZnO、CaCO3或MgSO4· 7H2O等标准物质来标定。当用金属锌标定时,用铬黑T(H3In)做指示剂,在pH=10的款冲溶液中进行,滴定到溶液呈蓝色时为止。滴定反应式:

指示剂反应 Hln2- + Zn2+ = Znln- + H+

滴定反应 H2Y2- + Zn2+ = ZnY2- + 2H+

终点反应 Znln- + H2Y2- ↔ ZnY2- + Hln2- + H+

二、实验注意事项

(1)、称取EDTA和金属时,保留四位有效数;

(2)、控制好滴定速度;

(3)、加热锌溶解时,用表面皿盖住以免蒸发掉。

三、主要仪器与药品

仪器:酸式滴定管、25ml移液管、250ml容量瓶、250ml锥形瓶、250ml烧杯、表面皿。

药品:EDTA二钠盐、金属锌、1:1的氨水、1:1的HCl 、铬黑T指示剂、氨水—NH4Cl缓冲液(PH=10)

四、实验过程及原始数据记录

(1)、称取分析纯EDTA二钠盐1.9g左右,配制成500ml溶液。

(2)、称取0.15~0.2g金属Zn,加入1:1 HCl 5ml,盖好表面皿,使锌完全溶解,用水冲洗表面皿及烧杯内壁,然后将溶液移入250ml容量瓶中,再加水至刻度摇均,用25ml移液管吸此溶液置于250ml锥形瓶中,滴加1:1 氨水至开始出现Zn(OH)2白色沉淀,再加PH=10的缓冲溶液10ml ,加水稀释至100ml ,加入少许(约0.1g)铬黑T指示剂,用待标定的EDTA溶液滴定至溶液由酒红色变为纯蓝色,即为滴定终点。

EDTA的标定[ m(Zn) = 0.1815g ]


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