如何将DNA进行绝对定量？

首先想确定一下楼主说的DNA绝对定量指的是？定量PCR，是分析某个样本中特定序列的数量。比如cDNA中某个片段的拷贝数。核算蛋白标定仪，如果这个指的是Biophotometer，测A260,A230,A280的话测的是DNA浓度，也就是说不管什么片段，不管什么长度，测出来的是总的DNA含量。如果说第二个，我现在想不到更好的方法，市场上有精度更高的NanoDrop仪器，也就是精度更高，原理是同样的，基于DNA在260nm和280nm波长吸收的峰值比来算的，至于楼主说的杂质，更多的是从DNA提纯的技术来解决的。你测的浓度准不准，在于你提纯做的怎么样。如果说的是第一个，那么目前技术已经有了，也就是Nanostring。测得的是样本中特定序列的拷贝数。注意是直接的测量而不是像定量PCR那样通过Ct值来推算。（声明：以下答案来源均来自NanoString Technologies, Inc. 如果有版权问题请联系我删答案，本人和NanoString Technologies, Inc.没有任何利益关系。）这个技术和基因芯片的概念类似，是通过芯片上的一个捕捉探针(capture probe)来捕捉你想测量的序列，（捕捉是通过碱基互补配对）。捕捉以后，会加入一个标记探针(reporter probe)，这个标记探针也会互补结合你的目标序列。

Reporter Probe后面连了一个条形码(Barcode)目前这个条形码是六位，每个位置上有四种荧光标记物的选择，为了保证仪器能够更好的识别这个条形码，这个公司目前的广告是说一次可以同时测800个序列的拷贝数，实际还有更大的扩展空间。那么都结合上了以后接下来怎么办呢，因为DNA带负电，加上一个电场以后，因为捕捉探针是连在芯片上的，这些序列就会朝正极躺好，然后扫描一下，机器自己读一下有多少条形码就知道样本里实际的拷贝数有多少了。

小三阳患者的情况并不比大三阳简单；应根据具体情况进行综合分析。乙肝小三阳应检查HBV-DAN及肝功能，如果HBV-DAN（+）且肝功能异常，说明病毒复制，传染性强，应该采取以抗病毒为主的综合治疗。目前治疗乙肝比较有效的药物有α-干扰素、日达仙、拉米夫定、泛昔洛维、胸腺-5肽等，但这种治疗结果大都限于HBVDNA阴转及减少纤维化，而对其它抗原（包括抗体HBcIgG,IgM）的进一步阴转影响不大。少数抗-HBe阳性的慢活肝，没有病毒复制证据，可能病毒已清除，但自身免疫反应持续发展。本类病人对抗病毒治疗及免疫抑制治疗均可能无效。

如果乙肝两对半为小三阳，HBV-DAN（应采用PCR及斑点法同时检测；最好经肝活检证实））为（-）且肝功能、B超及AFP等均长期正常，则说明病毒已清除，无传染性，只所以乙肝三系仍表现为小三阳状态，可能是因为机体免疫系统的记忆性延续（有如愈合后的伤口留下的疤痕一样），这种延续甚至会持续终生。所以已无需隔离与治疗；因为目前尚无可在此类小三阳基础上进一步治疗乙肝的公认的而有效的药物；一味追求转阴而服用大量治疗性中西药物只会增加肝脏负担甚或招致不良后果。这类乙肝小三阳患者是可以结婚、生育与健康人一样生活、工作和学习的，所谓减少寿命一说是毫无科学根据的。鉴于此类型小三阳患者病毒虽已清除但体内可能存在着乙肝病毒易感基因，故若配偶乙肝三系均为阴性则应尽早注射乙肝疫苗，以期产生抗体后再结婚、生育为妥。此前性生活男方应使用避孕套为上。生育后婴儿应在医生指导下注射乙肝疫苗、乙肝免疫球蛋白。

患者需继续注意自我保护及定期复查，以期病毒不能复制，争取完全康复。乙型肝炎病人“三分治七分养”，要有良好的生活习惯，起居有规律，适当的身心锻练，保持乐观的情绪，不吃霉变食物，饮食应清淡，并应富有维生素及蛋白质等，这样可以增强体质，提高机体的免疫力，防止肝硬化及肝癌的发生。

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