将中药的提取液经浓缩(或不浓缩)后,较长时间放置,就可析出沉淀,再经重结晶可得单体成分,这是个别现象,如从槐米中提取芦丁。如果要得到更多的成分,或者要系统地研究一味中药中的化学成分,则需经过比较复杂的过程,一般是经过初步分离纯化,得到某一类型的总成分(混合物),或者得到极性相近的一混合物,再经过进一步分离得到单体成分。分离方法有很多种。
┌系统溶剂分离法
│
├两相溶剂萃取法
├沉淀法
│
·分离纯化方法┼盐析法
├分馏法
├结晶法
│
└色谱法
中药分析学中纯化样品时采用的柱色谱法与中药化学中的经典柱色谱法异同:经典液相(柱)色谱法使用粗粒多孔固定相,装填在大口径、长玻璃柱管内,流动相仅靠重力流经色谱柱,溶质在固定相的传质、扩散速度缓慢,柱入口压力低,仅有低柱效,分析时间冗长。
气相色谱和液相色谱都是靠停留时间定性的。由于样品中各组分的沸点、极性或吸附性能不同,每种组分都倾向于在流动相和固定相之间形成分配或吸附平衡。
由于载气/流动相的流动,使样品组分在运动中进行反复多次的分配或吸附/解吸附,结果是在载气/流动相中浓度大的组分先流出色谱柱,而在固定相中分配浓度大的组分后流出。
吸附剂的填装
干法将吸附剂一次加入色谱柱,振动管壁使其均匀下沉,然后沿管壁缓缓加入洗脱剂;或在色谱柱下端出口处连接活塞,加入适量的洗脱剂,旋开活塞使洗脱剂缓缓滴出,然后自管顶缓缓加入吸附剂,使其均匀地润湿下沉,在管内形成松紧适度的吸附层。操作过程中应保持有充分的洗脱剂留在吸附层的上面。
黄柏原料(1)破碎一称重一(2)提取一过滤一(3)滤液经不同方式分离纯化一成
品。工艺步骤说明:(1)黄柏原料由桂林三金药业集
团科研所提供,破碎成3o目左右的样品粉末。(2)
在提取过程中所采用的3种提取溶剂,分别是水、
7O% 乙醇、0.3 H SO 溶液,提取2次,每次l h。
(3)在黄柏的提取纯化工艺中,最关键的是分离纯化
这个工序,我们采用盐析、大孑L树脂吸附、乙醇沉淀
3种纯化方法。在盐析工艺中,首先加入2 滑石
灰,用饱和石灰水调pH 至l0,静置,过滤后滤液用
25 HC1调pH 至2,加入NaC1,放置24 h,抽滤,
干燥得成品。在大孔树脂吸附纯化工艺中,首先对
树脂型号从吸附量大小、洗脱难易程度、树脂再生处
理难易程度等方面做了选择,最后采用河北沧州产
的A 型大孑L树脂,该树脂黄柏中总生物碱吸附性
好、洗脱也很容易,上样流速控制在柱的最大流速的
1/4,先用低醇预洗,再用7o 的乙醇洗脱,减压回
收乙醇,干燥得成品。在醇沉过程中,先将提取液浓
缩至膏状,加入95 乙醇沉淀,过滤,滤液减压回收
乙醇,干燥得成品。
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