高中生物单克隆抗体基础知识点
一、区别单克隆抗体和多克隆抗体
多克隆抗体:抗原刺激机体,产生免疫学反应,由机体的浆细胞合成并分泌的与抗原有特异性结合能力的一组球蛋白,这就是免疫球蛋白,这种与抗原有特异性结合能力的免疫球蛋白就是抗体。
当病原体入侵人体,能够刺激机体免疫系统产生大量的多种抗体,那么这一堆抗体就是多克隆的。
单克隆抗体(MAb):是针专一的抗原决定簇产生的抗体,单克隆技术又名杂交瘤技术,起源于1975年,由G.KÖhler和Milstein创立。主要原理是利用产生抗体的B细胞与肿瘤细胞杂交融合成杂交瘤细胞,生产抗体。
此类抗体是专一的,或者说是同一种蛋白质,因此是单克隆的。
二、杂交瘤技术制备单克隆抗体的主要步骤
(1)抗原制备
(2)免疫动物
(3)免疫脾细胞和骨髓瘤细胞的制备
(4)细胞融合
(5)杂交瘤细胞的选择培养
(6)杂交瘤细胞的筛选
(7)杂交瘤细胞的克隆化
(8)单克隆抗体的检定
(9)分泌单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立
(10)单克隆抗体的大量制备。
三、杂交瘤技术制备单克隆抗体的具体过程
1、免疫动物 免疫动物是用目的抗原免疫小鼠,使小鼠产生致敏B淋巴细胞的 过程。 一般选用6-8周龄雌性Balb/c小鼠,按照预先制定的免疫方案进行免疫注射。 抗原通过血液循环或淋巴循环进入外周免疫器官,刺激相应B淋巴细胞克隆,使其活化、增殖,并分化成为致敏B淋巴细胞。
2、细胞融合 采用眼球摘除放血法处死小鼠,无菌操作取出脾脏,在平皿内挤压研磨,制备脾细胞悬液。 将准备好的同系骨髓瘤细胞与小鼠脾细胞按一定比例混合,并加入促融合剂聚乙二醇。在聚乙二醇作用下,各种淋巴细胞可与骨髓瘤细胞发生融合,形成杂交瘤细胞。
3、选择性培养 选择性培养的目的是筛选融合的杂交瘤细胞,一般采用HAT选择性培养基。在HAT培养基中,未融合的骨髓瘤细胞因缺乏次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶,不能利用补救途径合成DNA而死亡。 未融合的淋巴细胞虽具有次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶,但其本身不能在体外长期存活也逐渐死亡。 只有融合的杂交瘤细胞由于从脾细胞获得了次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶,并具有骨髓瘤细胞能无限增殖的特性,因此能在HAT培养基中存活和增殖。
高中生物易错知识点
●使能量持续高效的流向对人类最有意义的部分
●能量在2个营养级上传递效率在10%—20%
●单向流动逐级递减
●真菌PH5.0—6.0细菌PH6.5—7.5放线菌PH7.5—8.5
●物质作为能量的载体使能量沿食物链食物网流动
●物质可以循环,能量不可以循环
●河流受污染后,能够通过物理沉降化学分解 微生物分解,很快消除污染
●生态系统的结构:生态系统的成分+食物链食物网
●淋巴因子的成分是糖蛋白、病毒衣壳的是1—6多肽分子个、原核细胞的细胞壁:肽聚糖
●过敏:抗体吸附在皮肤,黏膜,血液中的某些细胞表面,再次进入人体后使细胞释放组织胺等物质.
●生产者所固定的太阳能总量为流入该食物链的总能量
●效应B细胞没有识别功能
●萌发时吸水多少看蛋白质多少、大豆油根瘤菌不用氮肥、脱氨基主要在肝脏但也可以在其他细胞内进行
●水肿:组织液浓度高于血液
●尿素是有机物,氨基酸完全氧化分解时产生有机物
●是否需要转氨基是看身体需不需要
●蓝藻:原核生物,无质粒、酵母菌:真核生物,有质粒、高尔基体合成纤维素等
●生物导弹是单克隆抗体是蛋白质
●淋巴因子:白细胞介素
●原肠胚的形成与囊胚的分裂和分化有关
●受精卵 (未分裂)——卵裂——囊胚(以分裂)——原肠胚
●高度分化的细胞一般不增殖。例如:肾细胞有分裂能力并不断增的: 干细胞、形成层细胞、生发层无分裂能力的:红细胞、筛管细胞(无细胞核)、神经细胞、骨细胞
高中 生物 学习 方法
①预习
预习是在老师讲课前,先浏览一遍讲课内容,在浏览时,应用笔将自己认为是重点的内容划出来,将自己看不懂的内容标出来,将浏览后产生的问题记下来,有能力、有条件的还可以自己做出预习笔记。通过这样的预习,为下一步听讲奠定基础,使自己的听讲更加有的放矢,听讲时就可以对自己已经弄懂的或重点知识重新加深印象,并比较一下老师的理解与自己的理解有什么差距,如果自己理解得不深,则可以进一步加深理解。对于自己预习时还不懂的问题,则是听讲的重要内容,一定要当堂弄清楚。对于在预习中产生的问题,如果老师讲到了,则要听懂,如果老师没有讲到,一定要向老师问清楚。预习也为将来的自学能力打下了良好的基础.
② 听讲
很多优秀学生的 经验 都说明了一个共同点,即学生的主要功夫应下在课堂上。我们的学习过程,实际上是解决一种矛盾,即已知与未知的矛盾,通过学习把未知转化为已知,然后又有新的未知的出现,我们再来完成这个转化过程。而由未知转化为已知的过程是在课堂上,在老师的指导下完成的,因此应该是很顺利的。有很多学生就是课上认真听讲,在45分钟的时间里完成学习任务。但是,总有些人,课堂上不认真完成由未知向已知的转化,白白浪费掉45分钟,反而在课下再花时间去完成转化,此时已没有老师的指导,只有课本上的内容,显然是不会有好效果的。如此花双倍或更多的时间,去完成效果不好的学习任务,就是常说的事倍功半。只要我们把主要功夫下在课上,那么,课下的负担也就会减轻,而且学习效果也会提高,时间上也会更加充裕,这就是常说的事半功倍。所以,听讲这一步骤是极为关键的。
③复习和作业
每节课上,一般老师都要留一定量的作业,这些作业的内容多是讲课的重点内容,是应该认真对待的。作业的过程就是复习巩固听学知识的过程,但是,很多同学把作业仅仅当成是一种任务,甚至当成是个负担。因此,急急忙忙赶完作业,就认为当天的任务完成了,殊不知,这种做法对学习的帮助是微小的。无论课上老师是否留有作业,课下都应该先进行复习,及时将当天老师所讲的知识复习一遍,这可以加强记忆,克服遗忘。心理学家对遗忘和记忆都进行过实验和研究,德国的心理学家艾宾浩斯的实验研究成果中,提出了一个著名的“遗忘曲线”表明了遗忘发展的一条规律,即遗忘的进程是先快后慢,先多后少。就是说,刚刚学习完知识后,遗忘很快就开始,而且一开始遗忘得较多,过一段时间间隔之后,遗忘的发展越来越慢,遗忘得也就慢了。根据这一遗忘规律,我们应该进行及时的复习,不要等到遗忘得差不多时,再进行复习,那样,学习效果是不会好的。由于遗忘进程是不均衡的,所以我们复习得越及时越好。
每天的复习一定要避免机械的重复,而应抓住老师讲课的重点、知识的联系和老师讲课的思路,将老师讲课内容按照自己的理解,用语言表述一番。
通过复习,加强了记忆,然后再来做作业,可以大大提高作业的效率,作业的困难、疑问、多可迎刃而解,而且通过作业又可进一步运用所学的知识,加深知识的理解和掌握。
1.从经过特异性免疫的实验动物体内提取b细胞
2.
用动物细胞融合的方法将b细胞与骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞
3.
用特定的选择性培养基筛选出能够无限增殖并产生特异性抗体的杂交瘤细胞
4.
进行体内或体外培养。体内培养就是将杂交瘤细胞注入实验动物腹腔,将来从腹水中提取。体外培养,就是利用动物细胞培养的方法,将来从培养液中提取
单克隆抗体的优点是:特异性强、灵敏度高,并可大量制备
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