为什么在薄层色谱中测定同一物质的Rf值会不同呢?

为什么在薄层色谱中测定同一物质的Rf值会不同呢?,第1张

我觉得你应该注意一下展开时的温、湿度。在相对湿度恒定的条件下,一般在较高温度展开时,Rf值高,反之Rf会降低,但是如果温度如果相差±5℃时Rf值变动一般不会差太大因为温度不同而使得各有机溶剂的理化性质不同导致其蒸汽比例也会发生变化,湿度不同会导致水的比例不同而不同程度的改变展开剂极性,影响到色谱的分离度。

在做纸色谱实验中,出现的四个点没有的Rf值没有两两相等的原因如下:

1、层析液放入过多或过少,应该适量,标准是保持层析过程既不挥发完(因此层析过程最好盖住),也不没刻线。

2、层析时间太长。不宜太长,否则使一种液体爬到最高处就不能测其Rf,最好实验前做一小测试判断液体爬到最高处的时间。

3、层析完后未能尽快用铅笔画出区域(为圆形),用铅笔画出区域是防止颜色褪掉。

通过Rf与分配系数公式我们知道。Rf与分配系数、流动相与固定相的体积有关,由于体积比在同一实验条件下是常数,所以Rf只与分配系数有关。而分配系数取决于氨基酸的极性基团,而碳链的影响则对Rf影响甚微。

由于氨基酸

侧链基团极性不同,自然Rf不同。

氨基酸极性越大Rf越小。


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