链球菌(Streptococcus)是一种广泛分布于自然界的革兰氏阳性菌,是人类的重要病原之一,也是其他多种脊椎动物包括猪、牛、鱼等的重要病原菌。目前,已有多个国家发现了鱼类链球菌病的暴发与流行,受感染的鱼类包括多种海水和淡水鱼类,以温水性鱼类最为严重(图22)。近几年,中国罗非鱼链球菌感染呈现蔓延趋势,尤其在2009年,广东、海南、福建和广西地区养殖罗非鱼的链球病发病率为20%~50%,发病鱼死亡率为50%~70%甚至更高。链球菌病已严重地危害着中国罗非鱼养殖业的健康发展。
图22 罗非鱼链球菌病
【病原】无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)或海豚链球菌(S.iniae)。链球菌是一种革兰氏阳性球菌。
【诊断方法】(1)现场诊断
病鱼游动异常、停食;部分病鱼眼球突出及出血,单眼或双眼角膜混浊发白,水晶体及玻璃体也混浊,甚至眼球脱落;皮肤出血,腹水及脏器病变;在急性感染时,出现内脏的广泛出血和肝、脾、肾、心、脑、眼和肠道的大面积出血的败血症;胆汁稀薄,胆囊肿大;肠腔充满淡黄色液体,肝脏增大。(2)实验室诊断
在实验室进行病原菌的分离和细菌学鉴定,可以确定链球菌种类。
【预防方法】(1)放苗前用生石灰、漂白粉等严格清塘。
(2)放养健康、优质的苗种。
(3)保持合理的放养密度。
(4)增加开增氧机的时间,保持池水充足的溶氧量。
(5)使用微生物制剂及底质改良剂,改善水质,保持池水良好的环境条件。
(6)减少投饲量,或可适当停饲;在饲料中可添加维生素C、维生素E或免疫多糖、酵素等免疫增强剂,提高鱼体体质及非特异性免疫机能。
(7)适当使用含氯消毒剂消毒池水,控制环境的病原数量。
【治疗方法】(1)首先停止投料或减少投料。
(2)池水消毒:用含氯消毒剂全池消毒。二氧化氯0.3克/米3和强氯精0.3克/米3混合,或三氯异氰脲酸(强氯精)0.3克/米3或二氯异氰脲酸钠0.5克/米3全池泼洒。
(3)池水消毒后第二天,使用聚维酮碘(PVP-I,有效碘1%)0.3~0.5克/米3全池泼洒。
(4)停饲4天后恢复投饲,投饲量为正常投料量的1/2(注意以后根据实际情况逐步加料投喂),而且必须将饲料与内服药搅拌均匀晾干方可投喂。
【口服药物】(1)每千克饲料用10%的氟苯尼考10克或强力霉素5~10克拌饲投喂,连续1周。
(2)每千克饲料用10%的氟苯尼考10克+强力霉素5~10克拌饲投喂,连续1周。
(3)每千克饲料用阿莫西林5~10克拌饲投喂,连续1周。
链球菌疫苗能刺激鱼类产生抗体,从而介导鱼类获得免疫力。相对于药物治疗,利用疫苗防制鱼类链球菌病是一种理想途径。国外高效的无乳链球菌和海豚链球菌及其细胞外蛋白产物(ECP)疫苗已经研制成功,并获得专利A17,204,993和US6379677(B1)。鱼类链球菌疫苗主要有全细胞灭活疫苗和胞外产物浓缩疫苗,可以通过腹腔注射和体表浸泡等免疫途径进行免疫。美国于1999年开始着手研制海豚链球菌灭活疫苗,在罗非鱼免疫保护试验中运用,产生了很好的保护效果,腹腔注射接种疫苗,相对保护率高达93.2%。关于疫苗的给予方式,腹腔注射疫苗的保护效果远好于肌内注射和体表浸泡的保护效果,体表刺点后浸泡疫苗获得的保护力与腹腔注射获得的保护率相当。联合疫苗比单价疫苗效果佳。此外,国外也进行了鱼链球菌口服疫苗的探索研究,海豚链球菌口服疫苗投喂罗非鱼后对链球菌病有明显的保护作用,平均保护率为63.1%。目前,先灵葆雅公司(Schering-Plough)推出了世界上第一个商业化生产的罗非鱼海豚链球菌和格式乳球菌联合疫苗,通过浸泡或者口服免疫。英特威(Intervet)公司在印度尼西亚推出了海豚链球菌单价灭活疫苗,通过浸泡或者注射免疫。但在我国都尚未批准引入。
国内多家研究机构如中山大学、广西水产研究所、珠江水产研究所等都在积极研制链球菌疫苗,但大多是全细胞灭活疫苗,效果显著的均为注射免疫,免疫保护率能达到90%以上,疫苗发生的免疫保护力可持续2~3个月。但由于注射免疫时罗非鱼堆在一起注射时很容易相互刺伤,产生应激反应,养殖户的接受程度还不是很高,应用于生产实践的操作性不强。而浸泡或口服的疫苗产品效果还不好。虽然鱼链球菌灭活疫苗在很多国家已经进行了广泛的探索和研究,并且试验验证取得了良好的免疫效果。但无乳链球菌血清型较多,并且在疫苗选择的压力下还会变异。由于疫苗产品在进入市场之前,需要向管理部门申请进行中试,而目前罗非鱼链球菌病疫苗还未正式进入中试阶段,疫苗从研制到中试再到通过审批正式应用于生产还需要数年的时间,所以现在罗非鱼链球菌病疫苗还只是处于小规模生产试验阶段。
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