葡萄球菌的检查项目有哪些呢?

葡萄球菌的检查项目有哪些呢?,第1张

(1)血浆凝固酶试验:血浆凝固酶是金黄色葡萄球菌所产生的,与其致病力有关的一种侵袭性酶,其作用是使血浆中的纤维蛋白在菌体表面沉积和凝固以阻碍吞噬细胞的吞噬。血浆凝固酶分为结合型和游离型。前者结合在细菌的细胞壁上,能直接作用于血浆中的纤维蛋白原,使之转化为纤维蛋白,环绕菌体而形成凝块。而游离型血浆凝固酶则在产生后被分泌到菌体外,不能直接作用于纤维蛋白原,但可以激活血浆凝血酶原,使之转化成凝血酶,后者再作用于纤维蛋白原使其转化为纤维蛋白。具体的测量方法也因此分为玻片法和试管法两种。

玻片法将待试菌落乳化于玻片上的盐水中,经10~20S证实无自凝后,用接种环取人或兔血浆一环,与乳化菌液混合,出现凝集者为阳性,另设生理盐水为阴性对照。

试管法吸取0.5mL兔血浆与0.5mL金黄色葡萄球菌肉浸液肉汤24小时培养物充分混匀,置37℃培养,每隔半小时观察一次,连续观察6小时,出现凝固,即将小试管倾斜或倒置时,内容物不流动,判为阳性。

(2)耐热核酸酶试验:将24小时肉汤培养物沸水浴处理15min,用接种环划线刺种于甲苯胺兰-DNA平板,35℃培养24小时,在刺种线周围出现淡粉色者为阳性。本试验金黄色葡萄球菌为阳性。

(3)甘露醇发酵实验金黄色葡萄球菌可发酵甘露醇。

(4)Staphaurex 胶乳凝集实验是鉴定金黄色葡萄球菌的一种快速、简便的商品化直接凝集试验。其基本原理是在纸片上滴加包被有纤维蛋白原和IgG抗体的聚苯乙烯胶乳,然后用接种环挑取待鉴定菌株的新鲜培养物加入混匀,若出现凝集块现象即为阳性。

5. 生化鉴定如上述,注意与其他凝固酶阳性的葡萄球菌的鉴别要点:PYR(吡咯烷酮-β-萘基酰胺试验阴性;VP试验阳性;鸟氨酸脱羧酶试验阴性。

6. 免疫学方法用酶联免疫吸附试验和对流免疫电泳方法可检测金葡菌的磷壁酸抗体。

7. 分子生物学方法包括PFGE脉冲场凝胶电泳以及酶切图谱分析等。

用加有高浓度食盐的培养基就能鉴别金黄色葡萄球菌

因为青霉菌可以产生青霉素,可以在培养基中接种细菌或放线菌,若接种的无法生长,即为青霉菌。

向培养基中加入伊红-美蓝试剂,若出现深紫色且带有金属光泽的菌落,即有大肠杆菌

采用无氮的培养基,就能筛选出圆褐固氮菌

在形态及表征上直接鉴定:该菌是革兰氏阳性球菌,细胞排列呈葡萄状,无芽孢,无荚膜。进一步:首先把挑取菌落于甘露醇生化管,37度,过夜,观察结果,变色为阳性,进一步做凝固酶试验,可以分为两种方法,一个是玻璃片法,一个是试管法该菌是兼性厌氧.鉴定很简单,随便一本微生物检验的书都有.下面是参考。金黄色葡萄球菌在形态及表征上直接鉴定就可以了,有一些材料,希望对楼主有帮助,首先,该菌是革兰氏阳性球菌,细胞排列呈葡萄状,无芽孢,无荚膜。其次,在肉汤培养基中金黄色葡萄球菌呈混浊生长,在胰酪胨大豆肉汤培养基中有时液体澄清,当菌量多时则呈混浊生长。在血平板菌落上生长时呈金黄色,也有时呈白色,菌落大而突起、圆形、不透明、表面光滑,周围有溶血圈。再次,该菌在Baird-Parker平板上生长时菌落为圆形、光滑凸起、湿润、直径2-3mm,颜色呈灰色到黑色,边缘为淡色,周围为一混浊带,在其外层有一透明圈。用接种针接触菌落似有奶油树胶的硬度。偶然会遇到非脂肪溶解的类似菌落;但无混浊带及透明圈。长期保存的冷冻或干燥食品中所分离的菌落比典型菌落所产生的黑色较淡些,外观可能粗糙并干燥。(这一点希望能对楼主的鉴定工作有帮助)Baird-Parker氏培养基.doc (24.0k)还有一些生理生化的指标840比如血浆凝固酶试验。挑取菌落接种于肉浸液肉汤,在37度温箱培养24小时后进行血浆凝固酶试验。 该实验的大致步骤是:吸取新鲜兔血浆(1:4),放入小试管中,再加入培养24小时的金黄色葡萄球菌菌液,振荡摇匀,放在36度水浴内,每半小时观察一次,观察6小时,如呈现凝固(即将试管倾斜或倒置时,呈现凝块者)被认为是阳性结果,结合上面的形态等特征,即可以初步断定你的菌是不是金黄色葡萄球菌。更为详细的实验步骤请楼主查阅有关书籍628比如实验时样品和试剂的加量等细节06如果你做的是微生物限度方面的参考《中华人民共和国药典》2005年版二部附录XI?28省=鸹粕咸亚蚓喝」┦砸海保埃恚欤ㄏ嗟庇诠┦云罚保纭ⅲ保恚臁ⅲ保埃悖恚玻苯踊虼砗蠼又种潦柿浚ú簧儆冢保埃埃恚欤┑难琼谒崮疲兀┤馓溃ɑ蛴馓溃┡嘌校嘌保浮玻葱∈保匾笨裳映ぶ粒矗感∈薄H∩鲜雠嘌铮呓又钟诼鸦坡然魄碇嘌蚋事洞悸然魄碇嘌桨迳希嘌玻础罚残∈薄H羝桨迳衔蘧渖せ蛏さ木洳煌诒恚邓刑卣鳎泄┦云肺醇斐鼋鸹粕咸亚蚓!∪羝桨迳仙さ木溆氡恚邓械木涮卣飨喾蛞伤疲μ粞cg病掣鼍洌直鸾又钟谟碇嘌泵嫔希嘌保浮玻葱∈薄H∮碇嘌呐嘌锝懈锢既旧⒔又钟谟馓琅嘌校嘌保浮玻葱∈保餮堂甘匝椤1恚怠〗鸹粕咸亚蚓嘌【湫翁事洞悸然魄碇〗鸹粕残瓮蛊穑咴嫡耄馕в谢粕罚渲本叮埃贰保恚砺鸦坡然魄碇〗鸹粕残瓮蛊穑咴嫡耄馕в新蚜字纸獾娜樽侨Γ渲本叮薄玻恚硌堂甘匝椋喝∶鹁∈怨埽持В骷尤胙臀蘧旌弦海ǎ保海保埃担恚欤俜直鸺尤肟梢删甑挠馓琅嘌铮ɑ蛴捎碇嘌泵媾嘌镏票傅呐ň海埃担恚臁⒔鸹粕咸亚蚓馓琅嘌铮ɑ蛴捎碇嘌泵媾嘌镏票傅呐ň海埃担恚欤次匝楣堋⒀粜远哉展芎鸵跣远哉展堋=彻芡迸嘌承∈焙罂脊鄄熘敝粒玻葱∈薄R跣远哉展艿难α鞫匀纾粜远哉展苎δ蹋羰匝楣苎陶呶堂甘匝檠粜裕裨蛭跣浴H缪粜远哉展芑蛞跣远哉展懿环瞎娑ㄊ保又票秆匦率匝椤#嘞氯模荆


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