RNA电泳条带中的 28s 18s 5s分别代表RNA电泳中核糖体RNA的大小。
Northern blot中最为常用的电泳胶是含有甲醛的琼脂糖凝胶,甲醛可以减少RNA的二级结构,电泳完成后的胶可经过EB染色后在紫外下检测RNA的质量。
对小分子的RNA 或者microRNA一般采用聚丙烯酰胺变性胶电泳。RNA电泳中可以依据核糖体RNA的大小大致判断条带的大小,28S RNA大小一般为5kb,18S RNA 大小一般为2kb。28S RNA 的亮度一般是18S 的两倍。
扩展资料
Northern blot 的优势在于它可检测目的片段的大小、是否具有可变剪切出现、可允许探针的部分不配对性,杂交过后的膜经过一定的处理除去探针后还可保存很长时间再次杂交使用。
Northern blot中探针的序列需要和检测目的基因序列互补配对,探针可以是DNA、RNA或者其它的寡聚核苷酸,但最小的长度必须大于25bp,体外合成的RNA探针可以采用更高的退火温度来减少背景中的噪音。
探针一般采用P或者地高辛来进行标记。杂交过后,可采用X胶片显色的方法来检测信号。
参考资料来源:百度百科-northern blot
希望大家帮忙解释一下。另外,假如要拿这种RNA做对照,最好是同一个种的,要不然就会有大小上的指示差异。跑的是DNA marker。使用都是相同物种的材料,这有没有可能与电泳条件有关,比如电泳时间、电压以及电泳缓冲液。严格做的话要用RNA Marker,跑变性胶。但现在都用DNA Marker,跑普通胶。这样的话,RNA的大小就无法通过Marker比较出来。欢迎分享,转载请注明来源:优选云