检验技师士《专业知识》模拟题及答案

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检验技师/士《专业知识》模拟题及答案

一、以下每一道考题下面有A、B、C、D、E五个备选答案。请从中选择一个最佳答案。并的答题卡上将相应题号的相应字母所属的方框涂黑。

1.肝糖原能分解为葡萄糖是因为肝内存在有()

A.6—磷酸葡萄糖脱氢酶

B.葡萄糖激酶

C.糖原磷酸化酶

D.葡萄糖—6—磷酸酶

E.磷酸果糖激酶

2.脑组织主要以什么作为能源供给物()

A.葡萄糖

B.脂肪

C.蛋白质

D.氨基酸

E.核酸

3.C—肽存在于()

A.人内源性胰岛素中

B.商品动物源胰岛素中

C.人工合成胰岛素中

D.胰岛素中

E.胰高血糖素中

4.运输内源性胆固醇的脂蛋白主要是下列哪一种()

A.HDL

B.VLDL

C.LDL

D.CM

E.Lp(a)

5.脂肪消化的主要部位是()

A.胃

B.食管

C.小肠

D.结肠

E.直肠

6.载脂蛋白AI是下列哪种脂蛋白的主要结构蛋白()

A.LD(a)

B.LDL

C.VLDL

D.CM

E.HDL

7.运输内源性甘油三酯的脂蛋白主要是下列哪一种()

A.CM

B.VLDL

C.LDL

D.HDL

E.Lp(a)

8.人体内贮存铁的蛋白质是()

A.铁蛋白

B.转铁蛋白

C.细胞色素类

D.血红蛋白

E.肌红蛋白

9.根据有无哪一种元素可将蛋白质与碳水化物及脂类区别开()

A.硫

B.氮

C.磷

D.氢

E.氧

10.细胞外的主要阳离子是()

A.钾离子

B.钠离子

C.钙离子

D.镁离子

E.铁离子

11.血液中最重要的缓冲系统是()

A.血红蛋白缓冲系统

B.碳酸氢盐—碳酸缓冲系统

C.磷酸氢二钠—磷酸二氢钠缓冲系统

D.血浆蛋白缓冲系统

E.H+作为底物被利用

12.细胞内外钾离子浓度梯度的维持是依靠()

A.膜的渗透性

B.膜上钠钾泵的主动转运

C.离子间的交换

D.电荷交换

E.离子的浓度差异

13.肝中参与胆红素生物转化的主要物质是()

A.硫酸根

B.乙酰基

C.葡萄糖醛酸

D.甲基

E.甘氨酰基

14.正常人体生物转化过程最重要的作用是()

A.使药物失效

B.使生物活性物质灭活

.使毒物毒性降低

D.使非极性化合物变为极性化合物,利于排出体夕}

E.使某些药物药性更强或毒性增加

15.正常成人每l3通过肾小球滤过的原尿约为()

A.1.5L

B.3L

C.50L

D.100L

E.180L

16.正常情况下,能被肾小管几乎完全重吸收的物质是()

A.尿素

B.肌 酐

C.尿酸

D.白蛋白

E.葡萄糖

17.正常人血浆渗透压一般多在下列哪项范围内()

A.275~3050sm/kgH2O

B.280~3200sm/kgH2O

C.200~4000sm/kgH2O

D.300~5000sm/kgH2O

E.600~10000sm/kgH2O

18.CK—MM主要存在于()

A.脑组织

B.肝脏

C.心肌

D.骨骼肌

E.红细胞

19.人体内的淀粉酶是()

A.α淀粉酶

B.β淀粉酶

C.γ淀粉酶

D.A和B

E.A和C

20.血浆中含量最多的甲状腺激素是()

A.游离T3

B.结合型T3

C.游离T4

D.结合型T4

E.总T3

21.根据国际生化学会委员会的规定,酶的一个国际单位是指()

A.最适合条件下,每小时催化生成1mmol产物的酶量

B.37℃下,每分钟催化生成1μmol产物的.酶量

C.25℃下,其他为最适条件,每分钟催化生成1μmol产物的酶量

D.30℃下,每小时催化生成1mmol产物的酶量

E.最适条件下,每分钟催化1μmol底物反应所需的酶量

22.解放初期我国危害严重,流行广泛的五大寄生虫病是()

A.蛔虫病、钩虫病、丝虫病、鞭虫病、日本血吸虫病

B.日本血吸虫病,钩虫病,黑热病,丝虫病,蛔虫病

C.日本血吸虫病,钩虫病,黑热病,丝虫病,弓形虫病

D.日本血吸虫病,疟疾,黑热病,钩虫病,丝虫病

E.日本血吸虫病,疟疾,钩虫病,蛔虫病,黑热病

23.寄生虫病流行的三个特点是()

A.地方性,流行性,季节性

B.地方性,季节性,自然疫源性

C.地方性,季节性,连续性

D.地方性,季节性,阶段性

E.季节性,多样性,自然疫源性

24.在人体寄生的寄生虫卵中最大者为()

A.肝吸虫病

B.肺吸虫卵

C.姜片虫卵

D.日本血吸虫卵

E.钩虫卵

25.实验室所用的生理盐水和普通培养基常用什么方法灭菌()

A.巴氏消毒法

B.流通蒸汽灭菌法

C.间歇灭菌法

D.高压蒸汽灭菌法

E.煮沸法

26.细菌体内染色体外的双股环状DNA是()

A.核仁

B.质粒

C.核糖体

D.线粒体

E.转位因子

27.细菌L型是()

A.细胞膜与细胞壁缺损的细菌

B.细胞核缺陷和缺乏质粒的细菌

C.细胞壁缺陷的细菌

D.细胞膜和核质缺乏的细菌

E.细胞膜的外膜层缺陷的细菌

28.用革兰染色法染色,革兰阳性菌被染成()

A.红色

B.绿色

C.灰色

D.紫色

E.黄色

29.长期使用广谱抗生素可引起()

A.菌血症

B.败血症

C.菌群失调症

D.脓毒血症

E.毒血症

30.关于医院感染错误的是()

A.医院感染是患者在住院期间获得的感染

B.患者出院后发生的感染也可能是医院感染

C.医院感染的致病菌多为条件致病菌

D.医院感染发生的基本条件是感染源的存在、适当的传播途径和易感人群

E.医院感染大多以暴发形式流行

31.革兰阳性菌和革兰阴性菌细胞壁的共同成分是()

A.磷壁酸

B.脂多糖

C.脂蛋白

D.脂质

E.肽聚糖

32.目前实验室保存菌种的最好方法是()

A.冷冻保存法

B.半固体保存法

C.冷冻真空干燥法

D.普通琼脂斜面保存法

E.干燥保存法

33.霍乱弧菌增菌培养用的碱性蛋白 胨 水的pH为()

A.6.5~6.8

B.7.2~7.6

C.7.8~8.2

D.8.4~8.6

E.5.5—6.5

34.内毒素是革兰阴性菌的()

A.磷壁酸

B.脂质

C.糖类

D.蛋白质

E.脂多糖

35.免疫系统包括()

A.中枢淋巴器官

B.外周淋巴器官

C.免疫活性细胞

D.以上均是

E.肝脏

36.一种免疫佐剂必须能()

A.增进某些物质的抗原性,这些物质原有抗原性属于较差或可疑者

B.降低循环抗体的水平

C.有利于迟发型超敏反应的产生

D.防止实验室性变态反应性脑脊髓炎的发生

E.减少过敏反应

37.中枢免疫器官主要包括()

A.胸腺和淋巴结

B.骨髓和胸腺

C.脾脏和胸腺

D.淋巴结和脾脏

E.脾脏和肝脏

38.肿瘤是否发生与机体的免疫状态密切相关,尤其是()

A.细胞免疫

B.体液免疫

C.特异性免疫

D.非特异性免疫

E.自身免疫

39.人类ABO血型属于()

A.异种抗原

B.异嗜性抗原

C.同种异型抗原

D.自身抗原

E.半抗原

40.在抗体形成时()

A.只有T细胞有免疫记忆

B.T细胞通过其细胞表面的个体型作为抗原受体

C.巨噬细胞在异常情况下,才作为辅助细胞

D.B细胞比T细胞增殖更多

E.NK细胞活跃

41.T细胞表面具有如下哪些受体()

A.EA花环,EAC花环,丝裂原受体及EB病毒受体

B.Fc受体,丝裂原受体,SmIg及EB病毒受体

C.SRBC受体,丝裂原受体,EB病毒受体,丝裂原受体

D.SRBC受体,丝裂原受体,抗原受体及白细胞介素受体

E.仅有各种白细胞介素受体

42.NK细胞对肿瘤细胞的杀伤作用()

A.必须受MHC分子的约束

B.不受MHC分子的约束

C.必须依赖于TCR识别靶细胞上的抗原

D.必须有事先的抗原致敏

E.杀伤有特异性

43.半抗原()

A.有免疫原性和免疫反应性

B.有免疫反应性,但无免疫原性

C.有免疫原性,但无免疫反应性

D.无免疫原性,也无免疫反应性

E.只能是同种抗原

44.人体的IgA分子主要特征()

A.能通过胎盘

B.通常在分泌液中是双聚体

C.通过经典途径活化补体

D.是血清中含量最多的免疫球蛋白

E.在分泌液中是五聚体

45.能通过胎盘屏障传递的抗体类型包括()

A.IgG

B.IgA

C.IgM

D.IgE

E.IgD

46.补体活化替代途径开始于()

A.C4的活化

B.C2的活化

C.C3的活化

D.C4的活化

E.C1+C2的活化

47.存在于人和脊椎动物血清及组织液中的一组具有酶样活性的球蛋白称为()

A.补体

B.抗体

C.免疫球蛋白

D.细胞因乎

E.白介素

48.人类补体系统由几种球蛋白组成()

A.3

B.9

C.11

D.13

E.15

49.关于血管壁的止血功能,下列哪一项是错误的()

A.血管收缩反应

B.促凝物质释放

C.激活血小板

D.激活凝血途径

E.局部血液黏度下降,

50.血小板α颗粒内较特异产物是()

A.B—TG和纤维蛋白原

B.B—TG和vWF

C.B—TG和PDGF

D.B—TG和PF4

E.13—TG和ADP

51.染色体如下图所示,哪项符合编号部位1、2、3的相应名称()

A.短臂次缢痕长臂

B.短臂着丝粒长臂

C.短臂端粒长臂

D.长臂端粒短臂

E.长臂次缢痕短臂

52.关于细胞外铁,下述哪一项是错误的()

A.反映骨髓贮存铁量

B.它是铁蛋白的聚合体

C.以普鲁士蓝反应显示其存在

D.正常人为阴性反应

E.缺铁性贫血时,骨髓细胞外铁明显降低甚至消失

53.血小板膜糖蛋白Ⅱb~Ⅲa的作用是()

A.参与血块收缩

B.参与黏附反应

C.参与释放反应

D.参与聚集反应

E.参与凝血

54.关于纤维蛋白的降解产物,下述哪项是错误的()

A.X′片段,Y′片段

B.D′片段,A、B及附属物

C.D—二聚体,DD—ER复合物

D.F1+2,FPA

E.E′片段

55.下列对血细胞发育过程中形态演变规律的描述哪项是错误的()

A.胞浆量由少到多(淋巴细胞例外)

B.核染色质由紧密到疏松

C.核仁显著可见到无

D.核染色质着色淡紫色变深紫色

E.核浆比例由大变小

56.人体最早的造血器官是()

A.肝脏

B.脾脏

C.胸腺

D.骨髓

E.卵黄囊

57.α—NAE染色呈强阳性的细胞是()

A.原粒细胞

B.早幼粒细胞

C.中幼粒细胞

D.幼单核细胞

E.幼淋巴细胞

58.关于血型天然抗体哪项是错误的()

A.以IgG为主

B.以IgM为主

C.可被相应抗原中和

D.无可查觉的抗原刺激

E.不能通过胎盘

59.红细胞从骨髓释放后其寿命约为()

A.50天

B.100天

C.120天

D.150天

E.180天

60.成人“少尿”指24小时尿量少于()

A.0.1L

B.0.2L

C.0.3L

D.0.4L

E.1L

61.班氏法尿糖定性,其试剂与尿的比例为()

A.1:9

B.9:1

C.1:10

D.10:1

E.4:1

62.在尿比密测定时,如尿液温度低于指定温度3℃,则其结果应()

A.增加0.001

B.减去0.001

C.增加0.003

D.减去0.003

E.增加0.004

63.尿中蛋白质含量超过多少时称为“蛋白尿”()

A.50mg/24h

B.100mg/24h

C.150mg/24h

D.200mg/24h

E.250mg/24h

64.CSF氯化物含量参考值为()

A.98~106mmol/L

B.78~98mmol/L

C.58~78mmol/L

D.53~69mmol/L

E.123~130mmol/L

65.CSF中葡萄糖含量()

A.与血糖含量相同

B.比血糖含量高1/3

C.比血糖含量高1/2

D.相当于血糖含量的20%~40%

E.相当于血糖含量的50%~80%

66.下列哪项不符合渗出液的特点()

A.多由炎症所致

B.比密为1.025

C.细胞计数为6×109/L

D.李凡他试验呈阳性

E.葡萄糖含量与血糖一致

67.正常精液刚液化时,pH值为()

A.5.5~6.0

B.6.2~6.6

C.6.8~7.2

D.7.2~7.8

E.8.O~8.3

68.胶乳凝集抑制试验检测尿液HCG,一般在妊娠多少天后呈阳性结果()

A.5~7天

B.10~20天

C.20~30天

D.35~40天

E.60~80天

69.正常粪便镜检,无()

A.大肠杆菌

B.脂肪滴

C.肠黏膜上皮细胞

D.肌肉纤维

E.淀粉颗粒

70.下列均是粪标本正确取材方法,但除外()

A.多部位采集标本

B.随意取标本

C.取脓液和血液交界处的粪便

D.取脓液,血液和黏液交界处粪便

E.取采便管采集的粪便

二、以下提供若干组考题,每组考题共同使用在考题前列出的A、B、C、D、E五个备选答案。请从中选择一个与问题关系密切的答案,并在答题卡上将相应题号的相应字母所属的方框涂黑。每个备选答案可能被选择一次、多次或不被选择。

A.近曲小管

B.远曲小管

C.髓 襻

D.集合管

E.肾小球

71.肾单位不包括()

72.肾脏重吸收物质最重要的部位是()

A.参与止血过程

B.参与凝集过程

C.参与纤溶激活过程

D.参与纤溶抑制过程

E.参与抗凝过程

73.高分子激肽原()

74.组织因子途径抑制因子()

75.血栓收缩蛋白()

76.纤溶酶原激活物抑制因子()

77.组织型纤溶酶原激活物()

A.中幼红细胞

B.原始红细胞

C.浆细胞

D.原始单核细胞

E.中性中幼粒细胞

78.胞体大且有伪足,染色质纤维网状,并见一个大而清晰核仁,核形不规则,有扭曲,胞浆呈毛 玻 璃样,灰蓝色,未见颗粒()

79.核偏位,胞浆有混浊泡沫感,可见核旁淡染区,核染色质呈车轮状()

80.核圆形居中,染色质呈块状,核仁消失,胞浆呈多色性()

81.核染色质聚集,有核仁或消失,胞浆较多,呈淡红色,浆内有嗜苯胺蓝颗粒,核浆比约为1:1()

82.核染色质粗粒状,不均匀,着色深,核仁较大,界限不清,胞浆深蓝色,浓稠,不均匀,核周有淡染区,可见伪足突出()

A.(4.0~5.0)×1012/L

B.(3.5~5.0)×1012/L

C.(3.0~5.0)×1012/L

D.120~160g/L

E.110~150g/L

成人女性的参考值分别是

83.红细胞()

84.血红蛋白()

A.0.1%

B.3%~8%

C.0.5%~5%

D.20%~40%

E.50%~70%

85.白细胞分类计数中淋巴细胞占()

86.白细胞分类计数中单核细胞占()

A.RBC

B.WBC

C.RDW

D.Hct

E.ESR

87.红细胞名称相应的缩写是()

88.血沉名称相应的缩写是()

89.血细胞比容名称相应的缩写是()

A.RBC

B.MCH

C.HGB

D.Hct

E.MCV

90.平均红细胞相对应的缩写是()

91.平均红细胞血红蛋白含量相对应的缩写是()

92.血红蛋白相对应的缩写是()

三、以下每一道考题下面有A、B、C、D、E五个备选答案。请从中选择备选答案中所有正确答案,并在答题卡上将相应题号的相应字母所属的方框涂黑。

93.肾脏的生理功能包括()

A.调节体液的电解质、渗透压和酸碱平衡

B.排泄体内代谢产物

C.分泌前列腺素,促红细胞生成素

D.对外来物质和体内一些生物活性物质进行生物转化

E.保留体内所需的氨基酸、葡萄糖等

94.血浆蛋白中自蛋白的主要生理功能是()

A.营养作用

B.免疫作用

C.运输作用

D.维持胶体渗透作用

E.缓冲作用

95.常用的消毒剂有()

A.高锰酸钾

B.碘酒

C.石炭酸

D.环氧乙烷

E.甲醇

96.临床标本细菌分离培养方法主要包括()

A.需氧培养法

B.微需氧培养法

C.二氧化碳培养法

D.厌氧培养法

E.组织培养法

97.免疫系统的三大功能表现在()

A.免疫防御

B.免疫自稳

C.免疫监视

D.免疫效应

E.免疫耐受

98.铁的功能包括()

A.贮存铁

B.合成含铁酶

C.参与重要代谢

D.合成血红蛋白

E.合成肌红蛋白

99.尿中酮体包括()

A.乙酰乙酸

B.丙酮

C.β—羟丁酸

D.丙二酮

E.乙酰丁酸

100.易被误认为管型的物质有()

A.类圆柱体

B.草酸钙结晶

C.肾小管上皮细胞

D.黏液丝

E.非晶形尿酸盐

参考答案:

1.D2.A3.D4.C5.C6.E7.B8.A9.Bl0.B

11.Bl2.B13.C14.Dl5.E16.El7.A18.D19.A20.D

21.E22.D23.B24.C25.D26.B27.C28.D29.C30.E

31.E32.C33.D34.E35.D36.A37.B38.A39.C40.D

41.D42.B43.B44.B45.A46.C47.A48.A49.E50.D

51.B52.D53.D54.D55.B56.E57.D58.A59.C60.D

61.D62.B63.C64.E65.E66.E67.D68.D69.C70.B

71.D72.A73.B74.E75.A76.D77.C78.D79.C80.A

81.E82.B83.B84.E85.D86.B87.A88.E89.D90.E

91.B92.C93.ABCE94.ACDE95.ABCD

96.ABCD97.ABC98.ABCDE99.ABC100.ADE

抗体(antibody)是指机体由于抗原的 *** 而产生的具有保护作用的蛋白质。它(免疫球蛋白不仅仅只是抗体)是一种由浆细胞(效应B细胞)分泌,被免疫系统用来鉴别与中和外来物质如细菌、病毒等的大型Y形蛋白质,仅被发现存在于脊椎动物的血液等体液中,及其B细胞的细胞膜表面。抗体能识别特定外来物的一个独特特征,该外来目标被称为抗原。

基本介绍中文名 :抗体 外文名 :antibody 性质 :免疫球蛋白 分布 :脊椎动物的血清等体液中 产生细胞 :浆细胞(效应B细胞) 构成 :以免疫球蛋白为主介绍,命名,抗体的结构,主要功能,特性和功能,多克隆单克隆,多克隆抗体,单克隆抗体,抗体的多样性,抗体规律, 介绍 抗体是一类能与抗原特异性结合的免疫球蛋白。抗体按其反应形式分为凝集素、沉降素、抗毒素、溶解素、调理素、中和抗体、补体结合抗体等。按抗体产生的来源分为正常抗体(天然抗体),如血型ABO型中的抗A和抗B的抗体,和免疫抗体如抗微生物的抗体。按反应抗原的来源分为异种抗体,异嗜性抗体,同种抗体和自身抗体。按抗原反应的凝集状态分为完全抗体IgM和不完全抗体IgG等。抗体在医疗实践中套用甚为广泛。如用于疾病的预防、诊断和治疗方面都有一定的作用。临床上用丙种球蛋白预防病毒性肝炎、麻疹、风疹等,国际上用抗Rh免疫球蛋白预防因Rh血型不合引起的溶血症。诊断上如类风湿因子用于类风湿性关节炎,抗核抗体(ANA)、抗DNA抗体用于系统性红斑狼疮,抗 *** 抗体用于原发性不孕症的诊断等治疗上如毒素中毒用抗毒治疗以及免疫缺陷性疾病的治疗等。 命名 19世纪后期,V on Behring及其同事Kitasato研究发现,用白喉或破伤风毒素免疫动物后可产生具有中和毒素作用的物质,称之为抗毒素(antitoxin),随后引入“抗体”一词来泛指抗毒素类物质。抗体(antibody,Ab)是B细胞接受抗原 *** 后增殖分化为浆细胞所产生的糖蛋白,主要存在于血清等体液中,是介导体液免疫的重要效应分子,能与相应抗原特异性结合,发挥免疫功能。1937年,Tiselius和Kabat用电泳方法将血清蛋白分为白蛋白、α1、α2、β及γ球蛋白等组分,并发现抗体主要存在于γ区,因此抗体又被称为γ球蛋白。随后,经1968年和1972年的世界卫生组织和圈际免疫学会联合会讨论决定,将具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白统一命名为免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。Ig可分为分泌型Ig(secreted Ig,SIg)和膜型Ig(membrane Ig,mlg)。Slg主要存在于血液和组织液中,行使抗体的各种功能;mlg主要构成B细胞膜表面的抗原受体。 抗体的结构 一、抗体的基本结构 经x线晶体衍射结构分析发现,Ig由四条多肽链组成,各肽链之间南数量不等的链间二硫键连线。Ig可形成“Y”字型结构,称为Ig单体,是构成抗体的基本单位。 (一)重链和轻链 天然Ig分子含有四条异源性多肽链,其中,分子鼍较大的两条链称为重链(heavy chain,H),而分子量较小的两条链称为轻链(Light chain,L)。同一Ig分子中的两条H链和两条L链的胺基酸组成完全相同。 1.重链分子量为50 000~75 000,由450~550个胺基酸残基组成。重链恒定区的胺基酸组成和排列顺序不同,其抗原性也不同。据此,可将12分为5类(class),即IgM、IgD、IgG、IgA和IgE,其相应的重链分别为μ链、δ链、γ链、α链和ε链。不同类的Ig具有不同的特征,如链内和链间二硫键的数量和位置、结构域的数量及铰链区的长度等均不完全相同。即使是同一类的Ig,其铰链区胺基酸组成和重链二硫键的数量、位置也不同,据此又可将同类Ig分为不同的亚类(subclass)。例如,人lgG可分为四个亚类,包括IgGl、IgG2、IgG3和IgG4;人IgA可分为IgAl和lgA2两个亚类。 2.轻链分子量约为25 000,由214个胺基酸残基构成。轻链可分为两种,分别为kappa(κ)链和lambda(λ)链。据此,可将lg分为两型(type),即κ型和λ型。一个Ig分子上两条轻链的型别总是相同的。不同类Ig既存在κ型,也存在λ型。同一个体内可同时存在κ型和λ型的Ig分子,不同种属生物体内两型轻链的比例不同。正常人血清Ig的κ:λ约为2:1,而在小鼠则为20:1。lg的κ与λ的比例异常可以反映免疫系统的异常。根据λ链恒定区个别胺基酸的差异,又可将λ链分为λl、λ2、λ3和λ4四个亚型(subtype)。 (二)可变区和恒定区 通过分析不同Ig重链和轻链的胺基酸序列发现,重链和轻链靠近N端的约1 10个胺基酸序列变化很大,其他部分胺基酸序列相对恒定。因此,将Ig轻链和重链中靠近N端胺基酸序列变化较大的区域称为可变区(variable region,V),分别占重链和轻链的1/4和1/2;将靠近C端的胺基酸序列相对稳定的区域,称为恒定区(constant region,C),分别占重链和轻链的3/4和1/2。 1.可变区 重链和轻链的V区分别称为VH和VL。VH和VL中各含有3个胺基酸组成和排列顺序高度可变的区域,称为高变区(hypervariable region,HVR)或互补决定区(complementarity determining region,CDR), 包括HVRl(CDRl)、HVR2(CDR2) 和HVR3(CDR3),其中,HVR3(CDR3)变化程度更高。VH的3个高变区分别位于29~31、49~58和95~102位胺基酸,而VL的3个高变区分别位于28~35、49~56和91~98位胺基酸。VH和VL的3个CDR共同组成Ig的抗原结合部位(antigen-binding site),决定抗体的特异性,是抗体识别及结合抗原的部位。在V区中,CDR之外区域的胺基酸组成和排列顺序相对保守,称为骨架区(framework region,FR)。VH或VL各有四个骨架区,分别用 FR1、FR2、FR3和FR4表示。 2.恒定区 重链和轻链的C区分别称为CH和CL。不同型(κ或λ)Ig的CL长度基本一致,但是不同类Ig的CH长度不同,例如IgG、IgA和IgD包括CH1、CH2和CH3,而IgM和IgE则包括CHl、CH2、CH3和CH4。 (三)铰链区 铰链区(hinge region)位于CH1与CH2之间,富含脯氨酸,易伸展弯曲,从而改变抗原结合部位之间的距离,有利于抗体结合位于不同位置的抗原表位。铰链区易被木瓜蛋白酶、胃蛋白酶等水解,产生不同的水解片段。不同类Ig的铰链区不尽相同,例如人IgGl、IgG2、IgG4和IgA的铰链区较短,IgG3和IgD的铰链区较长,而IgM和IgE无铰链区。 二、抗体的结构域 Ig分子的两条重链和两条轻链都可摺叠成数个球形结构域(domain),每个结构域行使其相应的功能。轻链有VL和CL两个结构域;IgG、IgA和IgD的重链有VH、CH1、CH2和CH3四个结构域;IgM和IgE的重链有五个结构域,即多一个CH4结构域。每个结构域由约110个胺基酸组成,胺基酸序列具有相似性,其二级结构是由几条多肽链摺叠形成的两个反向平行的β片层(anti—parallel β sheet)构成的,两个β片层中心的两个半胱氨酸残基由一个链内二硫键垂直连线,形成一个“β桶状(βbarrel)”或“β-三明治 (β sandwich)”结构,这种折式称为免疫球蛋白摺叠(immunoglobulin folding)。许多膜型和分泌型的蛋白质分子也含有这类独特摺叠的二级结构,因此,这类分子被统称为免疫球蛋白超家族(immunoglobulinsuperfamily,IgSF)。 三、J链和分泌片 Ig轻链和重链除上述基本结构外,某些类别的Ig还含有其他辅助成分,如J链和分泌片。 (一) J链 J链(joining chain)是一条富含半胱氨酸的多肽链,由浆细胞合成,其主要功能是将多个Ig单体连线为多聚体。2个IgA单体由J链相互连线形成二聚体,5个IgM单体由二硫键相互连线,并通过二硫键与J链连线形成五聚体。IgG、IgD和IgE常为单体,无J链。 (二) 分泌片 分泌片(secretory piece,SP)又称为分泌成分(secretory component,SC),是分泌型IgA分子上的一个辅助成分,为一种含糖的肽链,由黏膜上皮细胞合成和分泌,以非共价形式结合于IgA二聚体上,使其成为分泌型IgA(SIgA),并一起被分泌到黏膜表面。分泌片能保护SIgA的铰链区不被蛋白水解酶降解。 四、抗体分子的水解片段 在一定条件下,Ig分子肽链的某些部分易被蛋白酶水解为不同片段。木瓜蛋白酶(papain)和胃蛋白酶(pepsin)是最常用的两种Ig蛋白水解酶,并可籍此研究Ig的结构和功能,分离和纯化特定的12多肽片段。 (一) 木瓜蛋白酶水解片段 木瓜蛋白酶水解Ig的部位是在铰链区二硫键连线的两条重链的近N端,可将Ig裂解为两个完全相同的Fab段和一个Fc段。Fab段即抗原结合片段(fragment antigenbinding,Fab),由一条完整的轻链与重链的VH和CHl结构域组成。一个Fab片段为单价,可与抗原结合但不产生凝集反应或沉淀反应;Fc段即可结晶片段(fragment crystallizable,Fc),由Ig的CH2和CH3结构域组成。Fc段无抗原结合活性,是Ig与效应分子或细胞相互作用的部位。 (二)胃蛋白酶水解片段 胃蛋白酶作用于铰链区二硫键所连线的两条重链的近c端,水解Ig后可获得一个F(ab’ )2 片段和一些小片段pFc ’。F(ab’ )2 是由两个Fab段及铰链区组成,由于Ig分子的两个臂仍由二硫键连线,因此F(ab’ )2 片段为双价,可同时结合两个抗原表位,与抗原结合可发生凝集反应和沉淀反应。由于F(ab’ )2 片段既保留了结合相应抗原的生物学活性,又避免了Fc段免疫原性可能引起的副作用,因而被广泛用于制备生物制品,如白喉抗毒素、破伤风抗毒素均是经胃蛋白酶消化后精制提纯的生物制品。胃蛋白酶水解Ig后所产生的pFc 7最终被降解,无生物学作用。 右图是抗体的结构示意图。 主要功能 抗体的功能与其结构密切相关。同一抗体的V区和c区的胺基酸组成和顺序的不同,决定了其功能上的差异。不同抗体的V区和C区在结构变化上具有一定的规律,又使得其在功能上存在共性。V区和C区的组成和结构,决定了抗体的生物学功能。 一、中和毒素和阻止病原体入侵 识别并特异性结合抗原是抗体的主要功能,执行该功能的结构是抗体的V区,其中CDR部位在识别和结合特异性抗原中起决定性作用。抗体有单体、二聚体和五聚体,因此结合抗原表位的数日也不相同。抗体结合抗原表位的个数称为抗原结合价。Ig单体可结合2个抗原表位,为双价。SIgA是二聚体,可结合4个抗原表位,为4价。IgM是五聚体,理论上可以结合10个抗原,应该是10价,但由于立体构象的空间位阻,使lgM一般只能结合5个抗原表位,故为5价。 抗体的V区与抗原结合后,借助于c区的作用,在体外可发生各种抗原抗体结合反应,有利于抗原或抗体的检测和功能的判断;在体内可中和毒素、阻断病原体入侵、清除病原微生物;B细胞膜表面的IgM和IgD构成B细胞的抗原识别受体,能辅助B细胞特异性识别抗原分子。 二、激活补体产生攻膜复合物使细胞溶解破坏 人IgG1~3和IgM与相应抗原结合后,可因构象改变而使其CH2和CH3结构域内的补体结合点暴露,从而通过经典途径激活补体系统,产生多种效应功能,其中IgM、IgG1和IgG3激活补体系统的能力较强,IgG2较弱。IgA、IgE和IgG4本身难以激活补体,但在形成聚合物后可通过旁路途径激活补体系统。通常情况下,lgD不能激活补体。 三、调理吞噬和ADCC IgG可通过其Fc段与表面具有相应受体的细胞结合,产生不同的生物学作用。 1.调理作用(opsonization) 指IgG抗体(特别是IgG1和IgG3)的Fc段与中性粒细胞、巨噬细胞表面相应的Fc受体结合,从而增强吞噬细胞的吞噬作用。例如,细菌特异性的IgG抗体可通过其Fab段与相应的细菌抗原结合后,以其Fc段与巨噬细胞或中性粒细胞表面相应的Fc受体结合,通过IgG的Fab段和Fc段的“桥联”作用,促进吞噬细胞对细菌的吞噬。 2.抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用(antibody-dependent cell—mediated cytotoxicity,ADCC) 指具E有杀伤活性的细胞(如NK细胞)通过其表面的Fc受体识别包被于靶细胞表面抗原(如病毒感染细胞或肿瘤细胞)上的抗体的Fc段,直接杀伤靶细胞。 NK细胞是介导ADCC的主要细胞。抗体与靶细胞上的抗原结合是特异性的,而表达Fc受体细胞的杀伤作用是非特异性的。 四、介导 I 型超敏反应 IgE为亲细胞抗体,可通过其Fc段与肥大细胞和嗜碱性粒细胞表面的IgE高亲和力Fc受体结合,使其致敏。当相同的变应原再次进入机体时,可以直接与致敏靶细胞表面的特异性IgE结合,促使这些细胞合成和释放生物活性物质,引起I型超敏反应。 五、穿过胎盘屏障和黏膜 在人类,lgG是唯一能够通过胎盘的抗体。胎盘母体一侧的滋养层细胞可表达一种特异性的IgG输送蛋白,称为FcRn。IgG可选择性地与FcRn结合,从而转移到滋养层细胞内,并主动进入胎儿的血循环中。IgG穿过胎盘的作用在于这是一种重要的自然被动免疫机制,对于新生儿抗感染具有重要意义。另外,sigA可通过呼吸道和消化道的黏膜,在黏膜局部免疫中发挥重要的免疫防御作用。 特性和功能 一、IgG IgG于出生后3个月开始合成,3~5岁接近成人水平。IgG是血清和体液中含量最高的抗体,占血清总Ig的75%~80%。人lgG有4个亚类,根据其在血清中浓度的高低排序,分别为IgG1、IgG2、IgG3、IgG4。IgG的半衰期为20~23天,是再次免疫应答产生的主要抗体,其亲和力高,在体内分布广泛,具有重要的免疫效应,是机体抗感染的“主力军”。IgG1、IgG2和IgG3可以穿过胎盘屏障,在新生儿抗感染免疫中起重要作用。IgG1、lgG2和IgG3能通过经典途径活化补体,并可与巨噬细胞、NK细胞表面Fc受体结合,发挥调理作用、ADCC作用等;人IgGl、IgG2和IgG4可通过其Fc段与葡萄球菌蛋白A(SPA)结合,借此可纯化抗体,并用于免疫诊断。某些自身抗体如抗甲状腺球蛋白抗体、抗核抗体,以及引起Ⅱ、Ⅲ型超敏反应的抗体也属于IgG。 二、IgM IgM占血清Ig总量的5%~10%,血清浓度约为1mg/ml。单体IgM以膜结合型表达于B细胞表面,构成B细胞抗原受体,只表达mlgM是未成熟B细胞的标志。分泌型IgM为五聚体,是分子量最大的Ig,沉降系数为19S,称为巨球蛋白(macroglobulin),一般不能通过血管壁,主要存在于血液中。五聚体IgM含有10个Fab段,具有很强的抗原结合能力;含有5个Fc段,比IgG更易激活补体。天然血型抗体为IgM,血型不匹配的输血,可导致严重的溶血反应。IgM是个体发育过程中最早合成和分泌的抗体,在胚胎发育晚期的胎儿即能产生IgM,故脐带血lgM升高提示胎儿有宫内感染(如风疹病毒或巨细胞病毒等感染)。IgM也是初次体液免疫应答中最早出现的抗体,是机体抗感染免疫的“先头部队”;血清中IgM升高,提示新近发生感染,可用于感染的早期诊断。 三、IgA IgA分为两型:血清型为单体,主要存在于血清中,仅占血清Ig总量的10%~15%;分泌型IgA(secretory IgA,SIgA)为二聚体,由J链连线,含内皮细胞合成的分泌片,经分泌性上皮细胞分泌至外分泌液中。SIgA合成和分泌的部位在肠道、呼吸道、乳腺、唾液腺和泪腺,因此主要存在于胃肠道和支气管分泌液、初乳、唾液和泪液。SIgA是外分泌液中主要的抗体类别,参与黏膜局部免疫,通过与相应病原微生物结合,阻止病原体黏附到细胞表面,在局部抗感染中发挥重要作用。SIgA在黏膜表面也有中和毒素的作用。新生儿易患呼吸道、胃肠道感染可能与IgA合成不足有关。婴儿可从母亲初乳中获得SIgA,这是一种重要的自然被动免疫过程。 四、IgD 正常人血清lgD浓度很低,仪占血清Ig总量的0.2%。IgD可在个体发育的任何时间产生。5类lg中,IgD的铰链区最长,易被蛋白酶水解,故其半衰期很短(仅3天)。lgD分为两型:血清型IgD的生物学功能尚不清楚;膜结合型IgD(mlgD)构成BCR,是B细胞分化发育成熟的标志,未成熟B细胞仅表达mlgM,成熟B细胞可同时表达mlgM和mIgD,称为初始B细胞(naive B cell)。活化的B细胞或记忆性B细胞表面的mlgD会逐渐消失。 五、IgE IgE是正常人血清中含量最少的Ig,血清浓度极低,约为5×10 - 5 mg/ml。IgE主要由黏膜下淋巴组织中的浆细胞分泌。其重要特征为糖含量较高。IgE为亲细胞抗体,其CH2和CH3结构域可与肥大细胞和嗜碱性粒细胞上的IgE高亲和力Fc受体结合,引起I型超敏反应。此外,IgE与机体的抗寄生虫免疫相关。 多克隆单克隆 抗体独特的生物学活性使其在疾病的诊断、免疫防治及基础研究中发挥作重要作用。早在19世纪后期,人们就开始使用特异性抗原免疫动物制备相应的抗血清。1975年,Kohler和Milstein建立了单克隆抗体(monoclonai antibody,mAb)技术,使规模化制备高特异性、均质性抗体成为可能。然而,鼠源性mAb在人体反复免疫后出现的人抗鼠抗体(human anti—mouseantibody,HAMA)很大程度上限制了mAb的临床套用。近年来,随着分子生物学的发展,人们已经可以通过抗体丁:程技术制备人一鼠嵌合抗体、人源化抗体或人源抗体。 多克隆抗体 天然的抗原分子中常含有多种不同的抗原表位,以该抗原 *** 机体的免疫系统可同时激活多种B细胞克隆,产生的抗体中会含有多种针对不同抗原表位的抗体,因此称之为多克隆抗体。多克隆抗体主要从动物免疫血清、恢复期患者血清或免疫接种人群的血清中获得。多克隆抗体的优势是:作用全面,具有中和抗原、免疫调理、补体依赖的细胞毒作用(CDC)、ADCC等重要作用,而且来源广泛、制备简单。其缺点是:特异性不高、易发生交叉反应,不易大量制备,因而限制了其套用的范围。 单克隆抗体 解决多克隆抗体特异性不高的理想方法是制备识别单一表位特异性的抗体。如果能获得仅针对单一表位的浆细胞克隆,并使其在体外扩增分泌抗体,就有可能获得单一表位特异性的抗体。然而,浆细胞在体外的寿命较短,难以培养。为克服这一缺点,Kohler和Milstein将可产生特异性抗体但短寿的B细胞与不产生抗体但长寿的骨髓瘤细胞融合,获得了可以产生单克隆抗体的杂交瘤细胞,从而建立了单克隆抗体制备技术。通过该技术融合形成的杂交瘤(hybridoma),既具有骨髓瘤细胞大量扩增和永生的特性,又具有免疫B细胞合成和分泌特异性抗体的能力。每个杂交瘤细胞由一个B细胞融合而成,而每个B细胞克隆仅识别一种抗原表位,因此经筛选和克隆化的杂交瘤细胞仅能合成和分泌识别单一抗原表位的特异性抗体,称为单克隆抗体。其优点是结构均一、纯度高、特异性强、效价高、血清交叉反应少、制备成本低;缺点是鼠源性mAb对人具有较强的免疫原性,反复免疫人体后可诱导产生人抗鼠抗体,从而削弱了其作用,甚至导致机体组织细胞的免疫病理损伤,因此需要进一步通过抗体工程技术制备人一鼠嵌合抗体、人源化抗体或人源抗体。 单克隆抗体(monoclonal antibody,Mab)技术是20世纪免疫学技术的一项里程碑式突破.该技术将免疫小鼠的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合生成杂交瘤细胞,这种杂交瘤细胞核内含有双亲细胞的染色体,继承了亲代细胞的特征.它既具有瘤细胞在体外培养中迅速增殖的能力.又具备免疫脾细胞合成和分泌特异性抗体的特性。随后用适当方法把杂交瘤细胞分离出来,进行单个细胞培养,使之大量繁殖,在培养液中形成单个杂交瘤细胞的克隆(也称细胞系)。由于每个B淋巴细胞只有合成一种抗体的遗传基因,所以单个杂交腐细胞的克隆也只能产生一种专一性抗体,即单克隆抗体。这种制备产生单克隆抗体的技术被称为单克隆抗体技术。 由杂交瘤单细胞克隆所产生的单克隆抗体只能特异性地与抗原分子上的一个抗原决定簇结合,抗体成分均一,抗体的结构、胺基酸顺序、特异性等都是一致的,且在培养过程中只要不发生变异,不同时间内分泌的抗体都能保持同样的结构和功能。用这种技术可按需要生产大量很纯的单一抗体,这些是用普通血清学方法所不能达到的。 单克隆抗体的发展经历了鼠源性单克隆抗体、嵌合性单克隆抗体、人源化单克隆抗体和全人源单克隆抗体四个阶段。特别是全人源单克隆抗体,其可变区和恒定区都是人源的,这类抗体药物具有高亲和力、高特异性、几乎没有毒副作用等优点,克服了动物源抗体及嵌合抗体的各种缺点,成为治疗性抗体药物发展的必然趋势。 单克隆抗体技术在临床套用中为疾病的诊断、治疗提供了新手段,作为治疗用药物,单克隆抗体主要套用于肿瘤、自身免疫疾病、器官移植排斥及病毒感染等领域。单克隆抗体也可用于肿瘤的导向治疗,将针对某一肿瘤抗原的单克隆抗体与化疗或放疗药物连线,利用单克隆抗体的专一性识别结合特点,将药物携带至靶细胞并直接将其杀伤。由于单克隆抗体具有特异性强、纯度高、均一性好等优点,大大促进了单克隆抗体检测试剂盒的发展,在病原微生物、肿瘤、免疫细胞、激素及细胞因子的检测诊断中广泛套用。若将放射性标记物与单克隆抗体连线,注入患者体内后可进行放射免疫显像,协助肿瘤的诊断。在亲和色谱中单克隆抗体是重要的配体,若将单克隆抗体固定到一个惰性的固相基质上,则可用于特异性抗原分子的高度纯化。 抗体的多样性 人血清中的抗体多种多样,B淋巴细胞可产生的抗体种类在10 8 以上,可与众多不同抗原发生特异性结合。抗体多样性的原因主要有两方面: 1.外源性因素环境中抗原种类甚多,每种大分子抗原又有多种抗原表位,每种抗原表位均可选择激活体内一个B细胞克隆,产生一种特异性抗体。 2.内源性因素抗体多样性的另一个原因是由基因的结构及功能特征所决定的。编码人Ig重链及κ、λ型轻链的基因分别位于第14、2、22号染色体上。其中编码Ig重链的基因包括编码可变区的V、D、J及编码恒定区的C基因;编码Ig轻链的基因包括编码可变区的V、J及编码恒定区的C基因。每种基因片段是以多拷贝的形式存在,其中编码重链V区的VH、DH和JH的基因片段数分别为50、23和6个;编码K轻链V区的Vx和JK基因片段数分别为60和5个,编码入轻链V区的VX和J入基因片段数分别为30和7个。这些基因在胚系阶段以分隔的形式存在。在B细胞的分化发育过程中,这些基因片段发生重排和组合,从而产生数量巨大、能识别特异性抗原的BCR。每种具有特异性BCR的B细胞克隆可识别相应的抗原,产生一种特异性抗体。Ig基因重组是B细胞合成无数特异性抗体的主要原因。 抗体规律 凡能产生抗体的高等动物(包括人类),当注入胸腺依赖性抗原(TD抗原)进行免疫时都有着相同产生抗体的规律,即存在初次免疫应答(primary immune response)和再次免疫应答(secondary immune response)。初次免疫应答是指机体第一次接触某种抗原物质引起特异性抗体产生的过程。其特点是潜伏期长(一周以上),产生的抗体滴度(效价)低、维持的时间短,产生的抗体以IgM为主;再次免疫应答是指机体以后再次接触同样的抗原后所产生的抗体应答过程。其特点是产生抗体的潜伏期短、抗体滴度高,维持的时问长,产生的抗体以IgG为主。 非胸腺依赖性抗原(TI抗原)引起的体液免疫由于不产生记忆细胞,因此只有初次免疫应答,没有再次免疫应答。


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