如何培养厌氧菌

有几种密封方法：

厌氧菌在有氧的情况下不能生长。要培养厌氧菌，必须创造一个无氧的环境。通常用培养基中加入还原剂，或用物理、化学方法去除环境中的游离氧，以降低氧化还原电势。如疱肉培养基、硫基乙酸钠培养基，牛心脑浸液培养基等。常用的厌氧培养方法有许多，可根据实际情况选用。

1．厌氧缸法接种好标本的平板或液体培养基试管，可放入厌氧缸内培养，厌氧缸是普通的干燥缸，用物理化学的方法使缸内造成厌氧环境，从而将厌氧菌培养出来。

2．厌氧袋（Bio-bag）即在塑料袋内造成厌氧环境来培养厌氧菌。塑料袋透明而不透气，内装气体发生管（有硼氢化钠的碳酸氢钠固体以及5%柠檬酸安瓿）、美兰指示剂管、钯催化剂管、干燥剂。放入已接种好的平板后，尽量挤出袋内空气，然后密封袋口。先折断气体发生管，后折断美兰指示剂管，命名袋内在半小时内造成无气环境。如不突变表示袋内已达厌氧状态，可以孵育。

3．厌氧手套箱（Anaerobie glove box）是迄今为止国际上公认的培养厌氧菌最佳仪器之一。它是一个密闭的大型金属箱，箱的前面有一个有机玻璃做的透明面板，板上装有两个手套，可通过手套在箱内进行操作，故名。箱侧有一交换室，具有内外二门，内门通箱内先关着。欲放物入箱，先打开外门，放入交换室，关上外门进行抽气和换气（H2，CO2，N2）达到厌氧状态，然后手伸入手套把交换室内门打开，将物品移入箱内，关上内门。箱内保持厌氧状态，也是利用充气中的氢在钯的催化下和箱中钱残余氧化合成水的原理。该箱可调节温度，本身是孵箱或孵箱即附在其内，还可放入解剖显微镜便于观察厌氧菌菌落，这种厌氧箱适于作厌氧细菌的大量培养研究，大量培养基可放入作预还原和厌氧性无菌试验。金属硬壁型厌氧箱的抽气、充气、厌氧环境和温度等均系自动调节。

4.厌氧盒：原理同厌氧袋，有成品销售。

5.生物耗氧法：在一密闭的容器内放以生物（多是植物），消耗氧气，同时产生二氧化碳，供细菌生长用。我没见过。

6.焦性末食子酸法：在一洁净的玻片上铺上纱布或滤纸，均匀撒上焦性末食子酸，然后再混入NaHCO3粉末或NaOH溶液，迅速将已接种细菌的平板倒扣在上面，用融化的白蜡封边，造成一个封闭空间。焦性末食子酸与碱反应后耗氧。该法用于厌氧不严格的厌氧菌的培养，简单。如有梭状芽孢杆菌。

7.疱肉培养基：本身就是一个不需特殊设备的厌氧培养法。疱肉和肉汤装入大试管，液面封凡士林，造成无氧环境。

至于厌氧培养基怎么配我就不太清楚了，不过就是按一般要的各种营养，灭菌即可，个人看法

有规定的。许多检验项目在正式检验前需进行预处理，及时而适当的标本处理是每一个检验者必须熟知和遵循的。 标本采集后应由专人、及时送检。输送过程中应防止标本容器的破碎和标本的丢失，运送过程中要注意容器的密闭、避光（如阳光直射下血中胆红素会分解），同时应注意生物安全，防止意外发生。常见检验项目标本转送要求：

1、采样后须立即送检的常规项目 血氨、血沉、血气分析、酸性磷酸酶、乳酸以及各种细菌培养，特别是厌氧菌培养。

2、采样后0.5小时内送检的常规项目 血糖、电解质、血液细胞学、凝血试验、体液细胞学、涂片找细菌、真菌等。

3、采样后1~2小时内送检的常规项目 各种蛋白质类、色素类、激素类、脂类、酶类、抗原、抗体测定等。

4、采集后立即冰冻的检测项目 需要对标本冰冻的检测物质有促肾上腺皮质激素（ACTH）、乙酰胆碱酯酶（ACE）、丙酮、血氨、游离脂肪酸、乳酸、丙酮酸盐和肾素。

5、需避光的检测项目 感光物质需避光以保持稳定性，如胆红素、β-胡罗卜素和红细胞原卟啉等，可以用铝制盖子罩在试管外壁光。

主要有两大类。一类是隔绝氧气的方法。比如液体培养时在液面滴加矿物油或者石蜡油达到液封的作用。在琼脂中穿刺培养，也可以隔离空气。还有厌氧培养箱，可以直接在其中培养厌氧菌。

另一类是加入还原剂的方法，中和分子氧。比如用庖丁肉培养基直接培养厌氧菌。

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