1945年,英国免疫学家Coombs等人发明了能检测红细胞表面抗体的一种新试验,故称之为“Coombs试验”,亦即抗人球蛋白试验。
这是诊断免疫溶血性贫血的主要方法。
最早和现在常用的抗人球蛋白试剂是广谱抗血清,即抗IgG+抗补体。国外研究发现,如采用特异的抗IgG、IgM或抗补体的试剂,红细胞表面的抗体是IgG和补体约占40%,单纯IgG占35%,单纯补体占10%,极少数病例是IgA或IgM。补体几乎都是C3b,即未激活的C3。
Coombs直接试验:将洗涤过的红细胞2%混悬液加入Coombs试剂,混合后离心一分钟促进凝集。如果肉眼或显微镜下能见到红细胞凝集,即为阳性,说明红细胞表面有不完全抗体或补体。阳性结果可见于自体免疫溶血性贫血、输血反应、某些药物或疾病引起的免疫溶血性贫血。
Coombs间接试验:先将受试的血清加入等量5%适当的正常红细胞(Rh阳性的O型红细胞),在37℃温育30~60分钟,以促使血清中的半抗体结合于红细胞上(致敏),将红细胞充分洗涤,以后同直接试验。如果红细胞发生凝集而正常对照(未经与受检血清温育的正常红细胞)不凝集,即为阳性,表明受试的血清中存在不完全抗体。
[方法]
(1)直接coombs试验 用于检测已粘附在红细胞表面的不完全抗体。即将受检红细胞充分洗涤后,将抗球蛋白试剂加入已结合有抗体的受检红细胞悬液中,即可见细胞凝集。可用玻片法做定性试验,也可用试管法或微量法做半定量测定。用于检测新生儿溶血症、自身免疫性贫血和医源性溶血性疾病等。
(2)间接coombs试验用于检测游离在血清中的不完全抗体。即将待测血清标本加入具有特异抗原的红细胞悬液中,如果抗原抗体相应则发生结合,再加入抗球蛋白抗体,则出现红细胞凝集。本法多用于检测母体Rh(D)抗体以及因红细胞不相容的输血而产生的血型抗体。此外也可用专一特异性的抗球蛋白血清,如抗IgG、抗IgM、抗IgA、抗补体血清等,分析与红细胞表面结合的不完全抗体的Ig亚类。
[参考值]直接和间接Coombs’试验均为阴性
Coombs试验即抗人球蛋白试验,是检测血液中温反应性抗体的一种方法,也是诊断自身免疫性溶血性贫血的重要指标。温抗体中50%以上由IgG介导,其次为IgM,IgA和C3d等,因此本试验应分选各种单克隆抗体同时测定。Coombs试验分为直接试验(直接反应)和间接试验(间接反应):直接试验的目的是检查红细胞表面的不完全抗体;间接试验的目的是检查血清中存在游离的不完全抗体。
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