制备的质粒DNA样品琼脂糖凝胶电泳后会出现2至3条带,为什么?可采取什么措施减少该情况出现??

制备的质粒DNA样品琼脂糖凝胶电泳后会出现2至3条带,为什么?可采取什么措施减少该情况出现??,第1张

质粒有三种状态:超螺旋开环、线性。开环是超螺旋结构中1条链的断裂,线性就是2条链都断了。要想提高质粒的超螺旋比例,提取的时候各个尽量轻柔,一般在TE溶液中,DNA酶的作用基本上都被封闭了,质粒的断裂大部分来自与溶液的剪切力。所以各步骤操作的轻柔很重要。不过这种开环对质粒的转化转染影响不大。

你好!

可以酶切,没什么很大的影响。三条带是质粒的三种构像,超螺旋,线性和开环的质粒,跑的最快的是超螺旋的。提质粒时,操作剧烈一点就可能出现多种构想的质粒。

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