求助小鼠骨髓移植问题

求助小鼠骨髓移植问题,第1张

骨髓移植:将供体小鼠颈椎脱位法处死后依次在2%碘酒和75%的乙醇中浸泡3-5min,无菌条件下剥离股骨及胫骨,剪去两端,用RPMI-1640培养液冲出骨髓,制成细胞悬液,洗涤并计数。调整好细胞浓度后再经尾静脉注射入受体小鼠中。即完成骨髓移植过程。

顾名思义,是指免疫上有缺陷的小鼠。说的专业一些是指因免疫系统中任何一个环节或其组分因先天发育不全或后天因各种因素所致损害而使免疫活性细胞的发生发展、分化增值和代谢异常并引起免疫功能不全的小鼠。

免疫缺陷小鼠按照获得方式不同可以分为两种:先天的和获得性(或继发)免疫缺陷小鼠。

获得(或继发)性免疫缺陷小鼠通俗一点说是本来基因是没有问题的,但是因为后天的某些原因(营养不良、恶性肿瘤、药物、病毒等)免疫方面有缺陷的小鼠。

这个后天获得的范围太广了,对这些有兴趣的朋友可以先自己研究下,等我了解一下了再跟大家分享。至于先天性免疫缺陷小鼠,我综合看到的一些材料先跟大家介绍一下。

根据缺失免疫细胞种类的不同,也可以分为以下5类:

a)T淋巴细胞功能缺陷小鼠(例:裸小鼠)

裸小鼠先天无胸腺。其裸基因是隐形突变基因,位于11号染色体。通过遗传育种的方法将裸基因回交到不同的小鼠品系中,即导入不同的遗传背景。

b)B淋巴细胞功能缺陷小鼠(例:性连锁免疫缺陷小鼠CBA/N小鼠)

CBA/N小鼠:B细胞功能缺陷,基因符号xid,位于X性染色体上。CBA/N小鼠可以进行骨髓移植修复,所以这个小鼠是研究B淋巴细胞的产生、功能和异质性理想的动物,其病理与人类Bruton氏丙种球蛋白缺乏症和Wiskott-Aidsch 综合症的理想模型。

c)NK细胞功能缺陷小鼠(例:Beige小鼠)

Beige小鼠:Beige小鼠为NK细胞活性缺陷的突变系小鼠,在第13号染色体上的隐性遗传基因bg发生突变引起,纯合小鼠(bg/bg)被毛完整,毛色浅。

d)联合免疫缺陷小鼠

T、B细胞联合免疫缺陷小鼠(SCID小鼠);

SCID小鼠:SCID小鼠被毛白色,体重发育正常。但胸腺、脾、淋巴结的重量不及正常的30%,组织学上表现为淋巴细胞显著缺陷。

e)其他免疫缺陷小鼠—显性半脂畸形小鼠

显性突变基因Dh,是显性突变基因,位于第1号染色体上,纯合子由于泌尿生殖系统和骨骼系统的严重畸形,出生后很快死亡;

Beige小鼠小鼠的免疫缺陷最高:

Beige小鼠(美国Jackson)和NOG小鼠(日本)都是通过ES细胞法制备出B6-IL2Rnull后通过与NOD/SCID回交8代以上的方法制备的, Beige小鼠是利用CRISPR/Cas9系统直接在NOD鼠上进行Prkdc和IL2rg双基因敲除的小鼠,理论上Beige小鼠没有任何背景残留,背景更纯。

寿命长:一般免疫缺陷小鼠因为高度的缺陷,寿命都比较短,而Beige小鼠寿命平均时间长达1.5年。更利于实验使观察。

其他优势: Beige小鼠没有成熟T细胞、B细胞和功能性NK细胞,细胞因子信号传递能力缺失,更适合人造血干细胞及外周血单核细胞的移植和生长。


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