怎样用CSCD预测circRNA的下游miRNA

怎样用CSCD预测circRNA的下游miRNA,第1张

1、筛选PTC中潜在的circRNA,GEO数据中查找甲状腺乳头状癌相关的数据集,最终找到GSE93522。通过GEO2R在线差异分析工具进行差异分析,此处组别的设置为:(正常vs良性);(正常vs恶性)。在挑选候选circRNA分子时,只挑选在(正常vs恶性)中的差异分子,排除在(正常vs良性)中上调或者下调的circRNA。最终找到13个上调和1个下调的PTC发生和进展相关的circRNA分子。随后,我们通过circBase数据库找到这14个circRNA分子的亲本基因以及在基因组中的座位。为了绘制circRNA圈图,我们在CSCD数据库中查找这14个circRNA,最终找到11个circRNA,并用其中的数据绘制圈图。

2、预测和分析PTC中与潜在circRNA分子结合的miRNA,circRNA分子发挥作用存在三种比较常见的机制:作为miRNA的海绵;与RBP结合;翻译为短肽或者蛋白质。从绘制的圈图看,这11个miRNA均存在MRE元件,可能可以与相应的miRNA相互作用。因此,我们使用CSCD和CRI数据库来预测相应的结合miRNA,并用Cytoscape软件构建相应的circRNA-miRNA网络图。随后,通过使用TCGA数据库中的数据,分析上述miRNA在甲状腺乳头状癌中的表达和预后价值。3、预测和分析PTC中上述miRNA下游的靶基因,通过上述的表达分析和预后分析,符合筛选要求的只有miR-605-5p和miR-876-3p两个miRNA。接着,我们使用综合性靶基因预测数据库miRNet,预测这两个miRNA下游的靶基因。通过蛋白互作网络分析,我们构建靶基因PPI网络,并结合CytoHubba中的算法(Cytoscape中的插件),最终筛选出20个hub基因。同时,使用STRING数据库,我们对预测出的靶基因进行GO和KEGG富集分析。

4、构建PTC中潜在的信号通路:hsa_circ_0088494-miR-876-3p-CTNNB1/CCND1,还是通过Cytoscape,我们构建miRNA-hub基因网。使用starBase数据库,我们对miRNA-hubgene关系对作表达相关性分析,从中筛选呈显著负相关的关系对(3个关系对符合)。最后,对三个关系对中的hub基因作表达分析,发现只有CTNNB1和CCND1在甲状腺乳头状癌中显著高表达,符合要求。

TCGA与ICGC。

TCGA, 全称为The Cancer Genome Atlas(癌症基因组图谱)。通过其名称我们就知道这个数据库主要做的就是肿瘤相关的数据库。

ICGC,全称International Cancer Genome Consortium(国际癌症基因组联盟)。这个数据库和TCGA的关系,就是ICGC数据库包括了TCGA的数据。另外呢,ICGC也纳入了其他别的地区所做的队列的测序数据。所以如果使用ICGC进行检索的话,我们可以得到更多的数据。

需要。

当我们使用TCGA表达数据,数据以gene-samplematrix形式整理好了,ICGC也是一个很大的癌症数据库,存放了几十种癌症的数据。我们需要将系数矩阵修改成gene-sample。

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