称取一定质量的小鼠,绞碎,用一定量的溶剂处理,过滤后按液体处理就可以了.
最后把测得的U/mL值乘以溶剂量除以小鼠质量就可以得到每克小鼠含SOD的单位数了.
探讨汽车尾气对小鼠血液中的SOD、CAT、GSH-Px活性的影响.方法 64只小鼠分成相等的4大组，1大组作为对照组不通汽车尾气，2大组通1h汽车尾气，3大组通1.5h，4大组通2h。SOD活性和GSH-Px活性测定按试剂盒说明进行，用KMnO 4 滴定法测CAT活性。结果 随着污染程度的加重和污染时间的延长，3种酶活性均呈现先升高后下降的趋势，但酶升高和下降的趋势并不完全相同。结论 生物能够适应轻度污染的空气，但过度污染会伤害动物的防御能力SOD、CAT、GSH-Px在不同的污染程度下有一个最适配比，从而使3种酶在体内构成相互保护的防御系统随着中国经济的快速增长与居民生活水平的提高，交通运输工业开始呈爆炸式增长，汽车尾气污染也日益严重。汽车发动机排出的尾气中含有碳氢化合物、氮氧化合物、一氧化碳、二氧化碳、醛类、乙炔等80多种物质，其中烯烃类碳氢化合物、二氧化氮和3-4苯并芘等对人体危害很大。如果汽油中加抗爆剂四乙基铅，则尾气中还含有铅化合物 ［1］ 。汽车尾气污染问题已引起了人们的足够重视，因此尾气污染有可能引起人体内自由基、H 2 O 2 、脂质过氧化物等有害物质的升高，从而引发一系列的健康问题。而清除氧自由基、H 2 O 2 、脂质过氧化物的酶分别是超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、和谷胱甘肽过氧化物酶 ［2］（GSH-Px）。因此我们研究了受摩托车尾气毒害的小鼠的SOD、CAT、和GSH-Px的变化规律，特报告如下
1 材料和方法
1.1 材料 8～12周龄的健康昆明小鼠64只，体质量（18.4±2.3）g，均购于山东大学医学院实验动物中心，明暗周期12/12，食水自由。试剂药品:SOD活性测定试剂盒和GSH-PX活性测定试剂盒，均购自南京建成生物研究所，KMˉnO 4 ，购自Sigma公司。仪器:SIGMA3K30高速冷冻离心机，岛津UV2401紫外分光光度计，3辆大洋摩托（用90#汽油
1.2 实验方法 污染方法:昆明小鼠64只随机等分为4大组，每大组又随即等分a和b两小组:1、2、3和4大组小鼠分别放置在1、2、3和4号房间内（每个房间面积均相同）。除1号房间不放摩托外，其它房间都放1辆摩托，当4大组小鼠安置好后，2号房摩托开始发动1h，3号房发动1.5h，4号房发动2h。摩托熄火后4大组小鼠继续停留各号房间，直至24h后取出各房间的a小组小鼠立即进行取血放入冰箱中（与b小组血清一起进行酶活性检测），b小组继续延留至48h
血中酶液的提取 ［3］:尾气污染完成后，迅速杀死小鼠分别取血，离心，收集血细胞，接着用生理盐水洗涤，再离心，收集血细胞，用蒸馏水低渗裂解释放酶，离心，取上清液。酶活性测定:取上清液对SOD活性和GSH-Px活性进行测定，测定方法按试剂盒说明进行，用KMnO 4 滴定法 测定CAT活
2.1 汽车尾气在24h内对a小组小鼠抗氧化酶活性的影响结果 1大组的a小组为对照组，3种酶活性均较低，2号a、3号a和4号a小组随着污染程度的加重，3种酶活性均有升高的趋势，但升高的趋势各有特点:SOD和CAT活性从2组开始一直呈现快速上升趋势，而GSH-Px上升趋势较缓。如图1所示。
图1 汽车尾气在24h对小鼠抗氧化酶活性的影响
2.2 汽车尾气在48h内对b小组小鼠抗氧化酶活性的影响结果 1号b小组为对照组，但从2号b小组开始SOD和CAT活性开始下降，而GSH-Px活性仍继续上升，到3号b小组时活性开始下降，说明随着污染时间的延长，3种酶活性均下降，但下降的趋势不同。如图2所示。
图2 汽车尾气在8h对小鼠抗氧化酶活性的影响
3 讨论
小鼠在汽车尾气的胁迫下，3种抗氧化酶活性开始均随着胁迫程度的加重（如图1）而升高，这是生物适应环境的需要。但酶升高的程度和趋势并不完全相同:SOD和CAT在初期上升的较快，GSH-Px上升趋势较缓，说明生物能够适应一定污染的空气。另一方面3种抗氧化酶活性随着污染时间的延长（如图2），SOD和CAT在上升至顶点后先下降，随后GSH-Px也开始下降，说明长时间的污染会损伤动物的防御能力。
SOD和CAT比GSH-Px上升的趋势快，下降的趋势也快，GSH-Px变化程度小而且总是比前两者迟缓，说明3种酶之间的变化是不同的，总的来看SOD、CAT、GSH-Px在不同的污染程度下可能有一个最适配比，从而使3种酶在体内构成相互保护的防御系统，可能首先是清除汽车尾气引起的小鼠体内的H 2 O 2 和超氧阴离子自由基，以减轻和阻断脂质过氧化作用的一级引发。GSH-Px还原脂质过氧化物来减轻和防止二级引发作用，从而能防止和减轻大分子的损伤和细胞中毒
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